白色芸豆防御素的促凋亡作用和抑制肺癌细胞株A549增殖效应-论文.pdf

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1、．884．江苏医药2014年4月第40卷第8期Jian~suMedJ，ADri12014，v0l40，No．8·论著·白色芸豆防御素的促凋亡作用和抑制肺癌细胞株A549增殖效应刘劝陶永辉白瑞珍华东【摘要】目的探讨白色芸豆防御素对肺癌细胞株A549增殖的抑制作用及可能机制。方法构建白色芸豆防御素的真核表达载体pcDNA3．1-defensin-byd，并将其转染至A549细胞中。采用磺酰罗丹明B法检测A549细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡，Westernblot检测凋亡蛋白表达。结果白色芸豆防御素可显著抑制A549细胞活性，促进A549细胞凋亡(P<0．05)，上调p53及半胱天冬氨

2、酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达(P<0．05)。结论白色芸豆防御素通过上调p53及Caspase-3的表达促进A549细胞凋亡，抑制其增殖。【关键词】植物防御素；肺癌【中图分类号1R734【文献标识码】A【文章编号】0253—3685(2014)08—0884—03EficiencyofwhitekidneybeandefensininpromotingapoptosisandinhibitingproliferationoflungcancercelllineA549LJuQuan，0Yonghui，Ruizhen，eta1．DepartmentofOncology，Af

3、filiatedHospital，JiangnanUniversity，wf214062，cH：[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheefficiencyofwhitekidneybeandefensininpromotingapoptosisandinhibitingproliferationoflungcancercelllineA549．MethodsTheeukaryoticexpressionvectorpcDNA3．1一defensin-bydencodingwhitekidneybeandefensinwasconstructedandt

4、hentransfectedintoA549cells．TheviabilityandapoptosisofA549cellsweredetectedbysulforhodamineBcolorimetricassayandflowcytometry，respectively．Theproteinexpressionsofp53andCaspase-3weredeterminedbvWesternblotResultsWhitekidneybeandefensincouldsignificantlyinhibitcellviability，promotecellapoptosisan

5、dupregulatetheproteinexpressionsofp53andCaspase-3(P<0．05)．ConclusionWhitekidneybeandefensininhibitstheproliferationofA549cellsviaapoptosispathwaybyupregulatingp53andCaspase-3expressions．[Keywords]Plantdefensin；Lungcancer~JiangsuMedJ，Aprif2014，40(8)：884—886．]肺癌占世界上肿瘤死亡原因的首位。在我国，用，但其对肺癌的作用尚不清楚。本研

6、究通过肺癌占全部因恶性肿瘤死亡病例的22．7_1]。尽pcDNA3．1真核表达系统将白色芸豆DNA导人管经过多学科的积极治疗，总的肺癌5年生存率仍肺腺癌A549细胞株表达，验证其抗肺癌活性，并在20左右L2]。肺癌的治疗现状促使医生及研究初步探讨其抗肿瘤机制。者寻找新的更有效的治疗手段。植物防御素是生材料与方法一物抗菌肽的一种，由29—6O个氨基酸组成，包括6—8、材料个保守的半胱氨酸，对革兰氏阳性、阴性菌、真菌1640培养液(Gibco公司)；磺酰罗丹明B病毒均有杀伤作用。越来越多的研究发现，植物(SRB)(Sigma公司)；人肺腺癌细胞株A549(中科防御素也能显著抑制人肿瘤细胞

7、增殖[3_，植物院细胞所)；pUC57一defensin-byd基因载体(南京金防御素的抗肿瘤作用或可为肿瘤的治疗提供新斯瑞生物科技公司)；脂质体2000(Invitrogen公的思路。白色芸豆防御素由Wong等_6]分离鉴司)；真核细胞表达载体pcDNA3．1为江苏省血吸定，体外实验显示其具有明显的抗乳腺癌肿瘤作虫病防治研究所卫生部重点实验室保存。二、方法基金项目：无锡市市级科技计划(10530cy0004)1．真核表达载体pcDNA3．1-defens