复方鹿花盘提取物对奶牛乳房炎致病菌的抗菌作用研究.pdf

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1、2015年第6期吉林畜牧兽医一。ShiYanYaMiU嚣帮■复方庶花盘提取物对奶牛孔房炎致病菌的扰菌作用研宄王晶，朱超杰，闫志强，陈爱丽，柴方红，王海洋1．吉林农业科技学院动物医学院，吉林吉林市132101；2．吉林省动物疫病预防控制中心，吉林长春130062摘要：本试验使用鹿花盘对奶牛乳房炎致病菌进行抑制作用研究，试验采集临床型乳房炎患牛的乳样进行病原菌分离鉴定，主要病原菌为无乳链球菌、金黄色葡萄球菌以及停乳链球菌。试验使用鹿花盘提取物及多种抗菌药物进行抑菌试验对比，结果表明复方鹿花盘对几种致病菌有较好的抑制作用，特别是金黄色葡萄球菌的抑菌圈达到16mm，属于高度敏感药物，显示

2、出较好的抗茵作用，可应用于IJ盘床实践。关键词：奶牛乳房炎；致病菌；鹿花盘；抗茵作用奶牛乳房炎发病率高，是奶牛常见病之一，1．1试剂严重影响奶牛养殖业的发展，奶牛乳房炎不仅影蛋白胨(中国医药集团上海化学试剂公司)，响产奶量，且影响牛奶的品质，给奶牛业造成极氯化钠(南京化学试剂厂)，牛肉膏(中国医药大的经济损失，甚至影响人的健康，可造成无法集团上海化学试剂公司)，磷酸氢二钾(南京化估量的损失。全世界大概有2亿多头奶牛，约有学试剂厂)。l／3左右患有乳房炎，每年造成的损失高达350i．2病料采集多亿美元，美国损失就达20多亿美元，我国奶乳样采集于吉林市丰满地区，从奶牛养殖场牛乳房炎发

3、病率高于国外⋯。随着人们生活水内选取有典型乳房炎症状并未经治疗的奶牛，用平的提高，人们对乳品质量要求也有提高，现在温水洗净乳房，用75％酒精棉球擦洗乳头和挤主要采用抗生素治疗乳房炎，但因耐药菌株的出奶人员的手指，弃去奶牛的第2把奶，然后将乳现，效果在逐渐减弱并且存在药物残留的问题。汁挤入预先灭菌的试管内，做好标记，每管大约我国的中草药种类繁多，但是目前常用抗乳5mL，放在4℃冰箱内保存，6h内送检。房炎的中草药抗菌效果大多数不如西药，通过试验筛选高效、无残留防治奶牛乳房炎中草药显得1．3培养基的制备尤为重要，因此现已成为研究的热点，目前鹿花1．3．1肉汤培养基蒸馏水1000mL，

4、蛋白胨盘在人医上已有应用，主要用于治疗人的乳腺炎，i0g，氯化钠5g，磷酸氢二钾1g，牛肉膏i0g，且取得较好疗效，本试验使用复方鹿花盘提取物放入锥形瓶内，在高压蒸汽灭菌锅内保持对奶牛乳房炎致病菌进行抑菌作用观察，为中药121．3℃灭菌30min。治疗奶牛乳房炎的临床应用提供依据。1．3．2普通琼脂培养基在肉汤培养基中加入琼脂20g，放入高压蒸汽灭菌锅内保持l2i．3℃1材料与方法灭菌30min，制成培养基备用。1．3．3鲜血培养基制备好德普通琼脂培养基项目简介：吉林农业科技学院大学生科技创新项目。室温冷却至40～50。，向其中加入5％血清，通讯作者：王海洋，讲师，吉林农业科技学

5、院动物科技学院。倒在培养皿中制成。23：塞坠纽究：2015年第6期吉林畜牧兽医ShiyanYanJiU1．4复方鹿花盘有效成分提取本次分离的病原菌为金黄色葡萄球菌、无乳链球将复方中药(鹿花盘、连翘、蒲公英、金银菌、停乳链球菌。花)按一定比例放在药锅中，加入4倍的蒸馏水2．2药敏试验结果浸泡30min，加热至沸腾，保持沸腾1h，过滤，表1药敏纸片抑菌直径(mm)然后向药渣中加入2倍的蒸馏水加热至沸腾，保持沸腾i5min，合并煎液，过滤后药液放在4℃冰箱内保存。1．5细菌分离与鉴定将采取的奶样无菌条件下接种于血液琼由表1可知，复方鹿花盘对三种菌的抑菌脂培养基和普通琼脂培养基，37℃恒

6、温培直径均大于l5mm，说明中药复方鹿花盘提取物养24～72h，记录病原菌的生长情况，革兰的抑菌作用强，试验药物除环丙沙星外都呈现一染色后显微镜检查，观察其病原菌的形态和染定程度的耐药性。色特性，其具体方法：病原菌涂片固定；草酸3讨论铵结晶紫染l～2min后水洗；加5％碘液媒染3min后水洗；用95％酒精脱色30S至13．1病原菌的分离结果rnirl后水洗；最后应用石炭酸复红染色液复染l本试验对奶样中病原菌进行分离鉴定，分离min，水洗、干燥、镜检。同时挑取单个可疑的病原菌为金黄色葡萄球菌、无乳链球菌以及停菌落进行纯培养，用于生化鉴定。乳链球菌，与其他人试验中分离的奶牛乳房炎致病

7、菌为金黄色葡萄球菌，大肠杆菌和链球菌结果I．6药敏试验基本一致，也与资料记载的奶牛乳房炎病原分针对已鉴别出的菌株应用纸片扩散法进行离鉴定的结果为金黄色葡萄球菌、停乳链球菌、药敏试验，恒温箱37℃培养24h后测量抑菌圈无乳链球菌及大肠杆菌的结果相近H。可见，的大小。中药判定标准：抑菌圈的直径小于金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和大l0mm为不敏感；在l0～15mm之间为中度敏感；肠杆菌是导致吉林地区奶牛乳房炎的主要致病抑菌圈在15mm以上的为高度敏感。菌，由单一病原引起的奶牛