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1、四川大学学报(医学版)2010;41(3):5182522JSichuanUniv(MedSciEdi)3前列腺原代基质细胞培养方法的研究△柳良仁,刘振华,魏强四川大学华西医院泌尿外科(成都610041)【摘要】目的建立前列腺原代基质细胞(PS)培养的方法,并研究年龄与胶原打底对于PS的影响。方法对老年男性前列腺组织分别进行酶消化法、组织块法、酶消化法+组织块法PS培养。通过免疫细胞化学染色对PS进行鉴定。结果组织块法成功培养PS。酶消化法中PS细胞接种后3d贴壁率仅6.4%,细胞2周已经老化。酶消化法+组织块法培养细胞无法贴壁。胶原
2、打底组细胞贴壁率与生长状态优于普通瓶底组,供者年龄<60岁的PS贴壁率与生长状态优于供者年龄≥60岁的PS。结论组织块法简单易行,适于行前列腺PS培养。胶原打底与供者年龄<60岁的原代细胞培养更适合行PS培养。【关键词】细胞培养良性前列腺增生症年龄胶原【中图分类号】R329.2,R691.2△PrimaryCultureofBenignProstaticHyperplasiaStromalCellLIULiang2ren,LIUZhen2hua,WEIQiang.DepartmentofUrology,WestChinaHospita
3、l,SichuanUniversity,Chengdu610041,China△Correspondingauthor,E2mail:weiqiang933@126.com【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheprimaryculturetechniqueinvitro,andtoevaluatetheinfluenceoftheprostatedonorageandthecollagencoatingontheprimaryprostaticcellculture.MethodsThreediffer
4、entmethods(enzymicdigestivemethod,tissuecultureandenzymicdigestivemethodcombinedwithtissueculture)wereinvestigatedintheprimaryprostaticcellculture,thestromalcellwereidentifiedbyimmunocytochemistry.ResultsComparedwiththemethodsofdigestion(eitherwithorwithouttissueculture
5、),tissueculturepossessedbettercellularadherenceandproliferativeability.Thincoatingofcollagenoncultureflaskcouldimprovetheadherenceofcellandpromotecellproliferation.Prostatestromalcellsfromdonorsaged≥60yearsoldgrewslowerthanthosefromdonorsaged<60yearsold.ConclusionTissue
6、cultureisasimple,conveniencemethodfortheprimarybenignprostatichyperplasia(BPH)stromalcellculture.Thincoatingofcollagenincultureflaskcouldimprovetheprimaryculture,andprostatestromalcellsfromdonorsaged<60yearsoldaremoresuitableforstromalcellculture.【Keywords】CellcultureBe
7、nignprostatichyperplasiaAgeCollagen良性前列腺增生症(benignprostatic收集12例四川大学华西医院泌尿外科2008年hyperplasia,BPH)为引起老年男性排尿障碍原因10月至2009年1月因膀胱癌行根治性膀胱癌切除[1]中最为常见的一种疾病。近期的研究显示:前列术患者前列腺移行区手术标本,供者年龄45～67腺基质细胞在BPH的发病过程中发挥着重要作岁。所有前列腺标本均经病理检查诊断为前列腺增[2]用。由于BPH发病过程缓慢,构建动物模型耗生,并排除前列腺癌、膀胱移行细胞癌前列腺组织
8、浸[3,4]时、耗力。前列腺原代基质细胞(PS)培养不但润等病变。可以模拟BPH体内环境,而且节约成本,为目前1.2主要仪器设备、试剂BPH基础研究的重要模型。但传统的基质细胞培RPMI21640、DMEM培养基、胰蛋白
