日本红枫组织培养技术研究

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1、黑龙江农业科学2010(10)：4～7HeilongJiangAgriculturalSciences◆生物技术El本红枫组织培养技术研究李莹。罗晓芳(北京林业大学生物科学与技术学院，北京100083)摘要：对日本红枫茎段组织培养过程中的外植体灭菌、启动培养、增殖培养和生根培养等进行了研究。结果表明：日本红枫外植体经l_0次氯酸钠灭菌4min后，成活率达到最高，为78．9；以MS为基本培养基筛选出适宜日本红枫的启动培养基为MS+6-BA1．0mg·I+NAA0．1mg·I一；在Ms培养基中附加0．0

2、05mg·l。TDZ时，可获得最佳的增殖效果，最佳的生根培养基为1／2MS+IBA0．2mg·L。+蔗糖30g·【。。+琼脂5g·I，生根率可达97．8。幼苗经炼苗后移栽，成活率在9O以上。关键词：日本红枫；组织培养；快速繁殖中图分类号：$687．9文献标识码：A文章编号：1002—2767(2O10)1O-0004—04日本红枫(Acerpalmatumatropurpureum)切割成1．542．0on1长的带芽茎段。用饱和洗衣属槭树科槭树属落叶乔木，广泛分布在日本、韩国粉水刷洗后流水冲洗0．5

3、～1．0h，转人超净工作和我国许多地区，其树高4～8m，冠幅4～5m，台，在7O乙醇中浸泡30S，然后分别选用叶5～7裂，树型优美，叶色鲜艳，是优良的园林绿0．5、1．0、2．0的次氯酸钠进行2、4、6和化彩叶树种，具有很高的社会价值和经济价值。8min的灭菌处理，最后用无菌水冲洗3～4遍，吸日本红枫目前主要采用扦插、嫁接等无性繁干水分，切去裸露的被消毒剂灼伤的部分，接种于殖方法进行繁殖，其繁殖速度慢，育苗效率低，使培养基上，每个处理接种3O个外植体，重复3次，推广受到了极大的限制。近几年来随着城市

4、绿化培养10d后，统计外植体污染率、褐化死亡率、存的需要，人们越来越重视彩叶植物栽培繁殖技术，活率及观察生长状况，并计算相关参数：尤其是组织快繁技术的研究。目前包括紫叶李、污染率／=污染个数／接种个数×100(1)红叶石楠和银杏等在内的多种彩叶植物组织培养褐化死亡率／一褐化死亡个数／接种个数×100研究已有报道[]。J，槭属植物中的茶条槭、元宝枫(2)和挪威槭的组织培养也已获得成功]，但有关日存活率／％一(接种个数一污染个数一褐化本红枫组织培养方面的研究，国内外鲜有报道。死亡个数)／接种个数×10o

5、(3)为了加快日本红枫快繁和推广，现对日本红枫组1．2．2外植体的启动培养将经过灭菌处理的织培养过程中外植体灭菌、启动培养、增殖培养、外植体分别接种到含有6一BA(0、1．0、生根及移栽等关键技术进行了研究，为进一步研2．0mg·I)、NAA(0、0．1、0．2mg·I。)的究提供了依据。1／4MS、1／2MS和MS基本培养基中培养，每个1材料与方法处理接种30个外植体，重复3次，接种30d后，计算抽芽率，并观察腋芽生长情况，确定启动培养1．1材料的最佳生长调节剂添加量。研究所用材料来自北京林业大学

6、良种繁育研抽芽率／=抽出新芽并达到1．0cm以上的外究中心温室，采集生长健壮无病害的日本红枫母植体个数／接种个数×100(4)株当年生嫩枝作为试材。1．2．3增殖培养基的筛选启动培养后，待茎段1．2方法腋芽萌发展叶，从基部切下转接到分化培养基中。1．2．1外植体的灭菌取当年生嫩枝去除叶片，以MS为基本培养基，分别选择6一BA(0．5、1．0、2．0mg·L0)、Thidiazuron(TDZ)(0．002、0．005、收稿日期：2010-05—310．010mg·L)2种细胞分裂素，配合生长素第一作

7、者筒介：李莹(1977一)，女，吉林省吉林市人，博士，助教，从事植物生物化学与分子生物学研究。E-mail：liy—NAA(0．1、0．2、0．5mg·)进行L9(3)正交试inglO19@163．eom。验。接种培养40d后，观测腋芽分化及生长状通讯作者：罗骁芳(1938一)，女，江苏人，学士，教授，从事植物生物技术研究。况，并计算增殖系数、平均株高度，确定最佳调节410期李莹等：日本红枫组织培养技术研究◆生物技术◆剂种类和添加量。果影响差另U较大，其中以处理6灭菌效果最好，污增殖系数一增殖后的芽

8、总数／接种的芽数(5)染率和褐化死亡率最低，分别为0和21．1，成平均株高度／cm=：f~殖芽总高度／接种时芽总高度活率相对最高，为78．9。(6)表1不同灭菌处理对外植体的污染率、1．2．4生根培养和移栽选取生长健壮、高度达存活率和褐化死亡率的影响到2cm以上的芽剪下，分别转入到含有IBA(0．1、0．2、0．3mg·L。)和蔗糖(10、20、30g·L)的1／4MS、1／2MS和MS基本培养基中进行生根诱导。培养20d后，统计生根率、平均生根条数和平均根长等指标。