高中生物选修一:2.1微生物的培养与应用.pptx

高中生物选修一:2.1微生物的培养与应用.pptx

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1、专题1微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养一、微生物(一)特点(二)类型①种类多;②分布广;③易培养;④个体微小;⑤结构简单;⑥繁殖快;⑦代谢强;⑧易变异。微生物原核:真核非细胞类:细菌、放线菌、支原体、蓝藻等酵母菌、霉菌等真菌:原生生物病毒、类病毒、朊病毒等显微藻类:衣藻、小球藻等原生动物:草履虫、变形虫等1.球菌2.杆菌3.螺旋菌肺炎双球菌金黄色葡萄球菌乳酸链球菌大肠杆菌苏云金芽孢杆菌枯草芽孢杆菌霍乱弧菌幽门螺旋菌齿垢密螺旋体(三)细菌的形态细菌芽孢的结构模式图环境适宜时,芽孢可以萌发,形成一

2、个细菌。(四)细菌的芽孢和孢子芽孢:有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体(不是生殖细胞)。孢子:细菌的生殖细胞芽孢的壁很厚,含水量极低,抗逆性极强(对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力)。菌落具有大小、形状、光泽度、颜色、透明度等基本特征。菌落是鉴定菌种的重要依据。(五)菌落菌落:由单个细菌(或其他微生物)细胞或少数同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度,形成肉眼可见的子细胞群体。吸附注入合成释放组装噬菌斑即噬菌体侵染细菌细胞,导致寄主细胞溶解死亡,因而在琼脂培养

3、基表面形成的肉眼可见的透明小圆斑(“负菌落”)。在适当条件下,一个噬菌体形成一个噬菌斑。(六)病毒的繁殖二、无菌技术(一)定义在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。(二)措施1.对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。2.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。3.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。空气中有大量的微生物,而酒精灯的火焰旁能形成一个无菌区域。二、无菌技术(三)消毒1.定

4、义指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。(不包括芽孢和孢子)2.方法1)煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2)巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3)化学药剂消毒法:用酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源4)紫外线消毒:只适用于表面灭菌和空气灭菌5)化学药物消毒:照射前喷洒式碳酸或煤酚皂溶液等消毒液,以增强消毒效果二、无菌技术(四)灭菌1.定义使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。2.方法在酒精灯火焰上灼烧。适用于接种环、接

5、种针、接种钩等金属用具以及试管口、三角瓶口灭菌1)灼烧灭菌接种针、钩、环二、无菌技术2)干热灭菌干热灭菌箱内160~170℃1~2小时,适用于耐高温、需保持干燥的物品(吸管、培养皿)和金属用具等。3)高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌锅内100KPa、121℃、15~30min;适用于培养基、水的灭菌。高压蒸汽灭菌前,为什么要将灭菌锅内的冷空气排尽?利于温度升高。若冷空气未排尽,当压力升到100kpa时,锅内温度不会上升到应有高度,导致灭菌不彻底灭菌完毕后,若压力未降到零就打开气阀,会出现什么现象?为什么?灭菌容

6、器内的液体冲出容器。因为灭菌锅内外压力不平衡的缘故利用干热灭菌箱和高压蒸汽灭菌锅灭菌时,物品不能摆的太挤,为什么?以免妨碍热空气或蒸汽的流通超净工作台三、培养基(一)定义人们按照微生物对__________的不同需求,配制出供其的营养基质叫培养基营养物质生长繁殖种类是否含凝固剂用途固体培养基1.5%-2.5%分离、计数、鉴定半固体培养基0.2%-0.7%观察运动、鉴定菌种液体培养基否工业生产(二)类型(按物理性质划分)固体培养基:菌落固体斜面培养基固体平板培养基琼脂液体培养基三、培养基(三)基本成分成分

7、举例作用或特点碳源无机物有机物氮源无机物有机物无机盐水CO2、HCO3-等适于自养生物,不提供能量葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等适于异养生物,可提供能量N2、NH4+、NH3、NO3-等牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等KH2PO4、K2HPO4、(NH4)2SO4、MgSO4、CaCl2、Ca(NO3)2、NaCl、FeSO4等。参与酶的组成;调节并维持细胞的渗透压;调节PH的平衡。良好溶剂,参与物质运输;参与细胞内一系列化学反应;酶催化的介质生长因子微生物生长所必需的、微量的、自身不能合成或合成很少的有机物。

8、包括维生素、某些氨基酸、碱基三类物质牛肉膏、称量纸、少量水加入烧杯→加热溶解→取纸→蛋白胨、NaCl→搅拌溶解→冷却调pH→琼脂→搅拌熔化→补水至100mL(四)制备(牛肉膏蛋白胨固体培养基)1.计算:依配方计算100mL培养基所需各成分的用量。2.称量:玻璃棒挑取牛肉膏于称量纸上称取。牛肉膏和蛋白胨易吸潮,称取时动作要迅速。3.溶化:牛肉膏黏稠,保证粘附在称量纸上的牛肉膏也溶于水中,减少误差作为凝固剂防止琼脂糊底而导致烧杯破裂4.灭菌:培

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