DB34∕T 3293-2018 农田杂草反枝苋对草甘膦抗性检测技术规程.pdf

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1、ICS65.020B04DB34安徽省地方标准DB34/T3293—2018农田杂草反枝苋对草甘膦抗性检测技术规程Codeofpracticefordetectionofglyphosate-resistantredrootpigweed(AmaranthusretroflexusL.)incropland文稿版次选择2018-12-29发布2019-01-29实施安徽省市场监督管理局发布DB34/T3293—2018前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由安徽省农业科学院棉花研究所提出。本标准

2、由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽省农业科学院棉花研究所、中国农业科学院棉花研究所、岳西县农业技术综合服务中心、六安市植物检疫植物保护站、来安县农业技术推广中心、太湖县种植业管理局、宣城市种植业管理局、黄山市农业科学研究所、安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所。本标准主要起草人：李淑英、路献勇、马艳、马小艳、阚画春、程福如、陈敏、刘小玲、郑曙峰、程森林、王维、徐道青、石扬娟、祁静星、胡俊斌、胡锋、吴明奎、胡本进。IDB34/T3293—2018农田杂草反枝苋对草甘膦抗性检测技术规程1范围

3、本标准规定了农田杂草反枝苋（AmaranthusretroflexusL.）对除草剂草甘膦抗性检测试剂与溶液、仪器和设备、生物试材、试验步骤、数据统计与分析与抗药性水平的评价。本标准适用于反枝苋对除草剂草甘膦抗性的检测。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1胚根长度Lengthofradicel从与种子连接处到胚根顶端。2.2胚轴长度Lengthofhypocotyl从与种子连接处到胚轴顶端。3试剂与溶液3.1草甘膦原药。3.2莽草酸（ShikimicAcid；3,4,5-三羟基-1-环己烯-1-羧酸；99％

4、纯度）。3.310％TritonX-100（聚乙二醇辛基苯基醚）。3.40.1％TritonX-100。3.50.3％高锰酸钾（KMnO4）。3.60.25mol/L盐酸。3.71mol/L氢氧化钠。3.80.1mol/L甘氨酸（C2H5NO2）。3.90.1％高碘酸（HIO4·2H2O）。4仪器和设备4.1培养皿（内径9cm）。4.2盆钵。4.3移液器（20µL、100µL、200µL、1000µL和5000µL）。4.4可控定量喷雾设备。1DB34/T3293—20184.5紫外可见光分光光度计。4.6离心管（1

5、.5mL，2mL，10mL）。4.7超高速离心机。4.8光照培养箱。4.9人工气候箱：可设定温度为白天30℃黑夜25℃、相对湿度（RH）60±10％、光照周期12h:12h（L:D）。5生物试材5.1试验土壤采集有机质含量≤3g/kg、pH6.0～6.5或6.5～7.0壤土粉碎风干后备用，试验前在120℃干燥箱内烘6h（灭活土壤内杂草种子）。5.2杂草种子采集各试验样点成熟的反枝苋种子。种子的田间采集区域不小于100m×50m，每隔20km取样1次，然后将每个地区或县域内所取样本混合。同时在没有施用过草甘膦地区采集反

6、枝苋种子，作为敏感对照。杂草种子4℃低温冰箱中保存。6试验步骤6.1杂草种子处理首先将供试反枝苋种子用质量分数为0.3％的高锰酸钾溶液浸泡消毒10min，用无菌水清洗3次。然后在9cm培养皿内放2层滤纸，每皿放入50粒反枝苋种子，置于光照培养箱内催芽，培养周期和温度设为白天30℃12h、黑夜25℃12h，当种子露白时待用。6.2反枝苋幼苗处理试验土壤定量装至盆钵的4/5处。采用盆钵底部渗灌方式，使土壤完全湿润。将预处理的供试反枝苋种子均匀撒播于土壤表面，覆土0.5～1.0cm左右，播种后移入人工气候箱常规培养。以盆钵

7、底部渗灌方式补水。杂草出苗后进行间苗，当反枝苋长至3～4叶期时定苗，每钵保留长势一致的10棵幼苗。6.3药液配制6.3.1TritonX-100系列溶液配置6.3.1.130％TritonX-100量取30mLTritonX-100，加水定容到100mL。6.3.1.210％TritonX-100量取33.33mL30％TritonX-100，加水定容至100mL。6.3.1.30.1％TritonX-1002DB34/T3293—2018量取1mL10％TritonX-100，加水定容到100mL。6.3.2草甘膦

8、母液配置准确称取一定量的草甘膦原药，用丙酮溶解，并加入10％TritonX-100，配制成母液备用。6.4测定方法测定方法可选择附录A、附录B、附录C中的任一种，以附录B中整株植物测定法为宜。6.5结果调查根据不同测定方法，选择如下结果调查方法：——培养皿测定法：在草甘膦处理后7d测量反枝苋胚根和胚轴的长度。——整株植物测定法：在施药后8d，记