DB34∕T 2723-2016 农田杂草马唐对草甘膦抗性检测技术规程.pdf

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1、ICS65.020B04DB34安徽省地方标准DB34/T2723—2016农田杂草马唐对草甘膦抗性检测技术规程Codeofpracticefordetectionofglyphosate-resistantcrabgrass(DigitariaSanguinalis(L.)Scop)incropland文稿版次选择2016-09-27发布2016-10-27实施安徽省质量技术监督局发布DB34/T2723—2016前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省农业委员会提出。本标准由安

2、徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽省农业科学院棉花研究所、中国农业科学院棉花研究所。本标准主要起草人：李淑英、朱加保、路献勇、程福如、马艳、马小艳、郑曙峰、刘方志。IDB34/T2723—2016农田杂草马唐对草甘膦抗性检测技术规程1范围本标准规定了农田杂草马唐（DigitariaSanguinalis(L.)Scop.）对除草剂草甘膦抗性的基本检测方法。本标准适用于农田禾本科杂草对除草剂草甘膦抗性的监测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的

3、版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1培养皿测定法PetriDishScreeningAssay.将杂草种子平铺于加有不同浓度梯度草甘膦的培养皿内，通过测定草甘膦对杂草种子的发芽率、胚根长、胚芽鞘长的影响而进行的生物测定方法。3.2整株植物测定法Wholeplantpotassays将杂草种子盆栽，在适宜温湿度条件下培养。当杂草培养到适宜时期，设置不同剂量草甘膦对杂草进行茎

4、叶处理，通过测定草甘膦对杂草生物量的影响而进行的生物测定方法。3.3莽草酸测定法ShikimicAcidBioassaywithWholePlants将杂草种子盆栽，在适宜温湿度条件下培养。当杂草培养到适宜时期，设置不同剂量草甘膦对杂草进行茎叶处理，通过测定草甘膦对杂草体内莽草酸累积量的影响而进行的生物测定方法。3.4胚根长度从与种子连接处到胚根顶端。3.51DB34/T2723—2016胚芽鞘长度从与种子连接处到胚芽鞘顶端。4试剂与溶液4.1仅使用分析纯试剂和符合GB/T6682规定的水。4.2草甘膦原药。

5、4.3莽草酸。4.4TritonX-100。4.530％TritonX-100——量取30mLTritonX-100，加水定容到100mL。4.610％TritonX-100——量取33.33mL30％TritonX-100，加水定容至100mL。4.70.1％TritonX-100——量取1mL10％TritonX-100，加水定容到100mL。4.80.3％高锰酸钾——称取0.3g高锰酸钾溶解于100mL水中。4.90.25mol/L盐酸——量取8.333mL浓盐酸缓慢加入80mL水中，冷却至室温，再加水

6、定容到100mL。4.101mol/L氢氧化钠——在400mL水中加入20.0g氢氧化钠，溶解后，冷却至室温，再加水定容到500mL。4.110.1mol/L甘氨酸——在160mL水中加入1.50g甘氨酸，充分溶解后，再加水定容到200mL。4.120.1％高碘酸——称取0.238g高碘酸溶解于200mL水中。5仪器和设备5.1电子天平（感量0.1mg）；5.2烧杯（10mL、25mL、100mL、500mL）；5.3滤纸5.4培养皿（内径9cm）；5.5超纯水器；5.6盆钵；5.7移液器（20µL、100µ

7、L、200µL、1000µL和5000µL）；5.8恒温水浴锅；5.9可控定量喷雾设备；5.10紫外可见光分光光度计；5.11量筒（100mL，250mL，500mL，1000mL）；5.12离心管（1.5mL，2mL，10mL）；5.13超高速离心机；5.14低温冰箱；2DB34/T2723—20165.15光照培养箱；5.16人工气候箱：——设定温度为白天30℃黑夜25℃、相对湿度（RH）60±10％、光照周期12h:12h（L:D）。6生物试材6.1试验土壤采用有机质含量≤3％、pH中性、通透性良好、过

8、筛的风干壤土，试验前在120℃干燥箱内烘6h，灭活土壤内杂草种子。6.2杂草种子采集各试验样点成熟的马唐种子。经过挑选以后将种子放入牛皮纸袋中晾干，保证种子发芽率在80％以上，放置于4℃低温冰箱中保存。种子的田间采集区域不小于100m×50m，每隔20Km取样1次，然后将每个地区或县域内所取样本混合保存。同时在没有施用过草甘膦地区采集马唐种子，作为敏感对照。7试验步骤7.1杂草种子处理首先将供试马唐