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《2019_2020学年高中生物1.2基因工程的基本操作程序课件新人教版选修3.pptx》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、1.2基因工程的基本操作程序一二三四一、目的基因的获取一二三四二、基因表达载体的构建一二三四三、将目的基因导入受体细胞一二三四四、目的基因的检测与鉴定探究点一探究点二当堂检测本课必记目的基因的获取和基因表达载体的构建问题导引1如何获得目的基因以用于基因工程?下面是获取目的基因的4个途径,试回答问题。探究点一探究点二当堂检测本课必记(1)途径一是通过建立文库的方式,途径二是通过建立文库的方式,a阶段需要酶。(2)途径三采取的是,b阶段(填“需要”或“不需要”)解旋酶,解旋的原因是。途径四表示法。答案(1
2、)基因组cDNA逆转录(2)PCR技术不需要高温使碱基对间的氢键断裂人工合成探究点一探究点二当堂检测本课必记归纳提升提取目的基因的方法比较探究点一探究点二当堂检测本课必记探究点一探究点二当堂检测本课必记特别提醒(1)获取目的基因的方法选择①如果不知道目的基因的核苷酸序列,可以通过构建基因文库的方法,即通过受体菌储存并扩增目的基因后,从基因文库中获取目的基因。②如果知道目的基因的核苷酸序列,而且基因比较小,可以通过DNA合成仪利用化学方法直接人工合成。③如果知道要扩增的目的基因及其两端的核苷酸序列,而且
3、基因又比较大,可以通过RCR技术扩增目的基因。(2)与从供体细胞的DNA中直接分离的目的基因相比,采用人工合成的目的基因长度要短些,没有启动子和内含子等非编码序列。探究点一探究点二当堂检测本课必记问题导引2如何将目的基因和质粒重组?试将下图补充完整。答案同一种124DNA连接酶探究点一探究点二当堂检测本课必记归纳提升构建基因表达载体的过程图解探究点一探究点二当堂检测本课必记特别提醒(1)完成基因表达载体的构建,需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶,由两个DNA片段连接的产物有目的基因—目的基因、目的基因
4、—载体和载体—载体三种。(2)切割质粒和切取目的基因的限制酶一般为同一种酶,这样形成的黏性末端的碱基之间互补,便于连接。为了避免目的基因与目的基因连接、载体与载体连接以及目的基因自身环化,可以同时用两种限制酶切割。(3)插入的目的基因的表达需要调控序列,因而目的基因首端有启动子,尾端有终止子。探究点一探究点二当堂检测本课必记将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定问题导引1将目的基因导入受体细胞的方法有哪些?不同的受体细胞,导入方法一样吗?根据农杆菌转化法的示意图回答问题。探究点一探究点二当堂检测
5、本课必记(1)一般情况下农杆菌不能感染的植物是。(2)农杆菌转化法的具体原理是在农杆菌的Ti质粒上存在T-DNA片段,它具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞上的特点,因此只要将携带外源基因的DNA片段插入到Ti质粒的(部位)上即可。(3)图中c过程中,能促进农杆菌移向植物细胞的物质是类化合物。答案(1)单子叶植物(2)染色体的DNAT-DNA(3)酚探究点一探究点二当堂检测本课必记归纳提升目的基因导入受体细胞的常用方法探究点一探究点二当堂检测本课必记问题导引2将目的基因成功导入受体细胞后是否意味着基因
6、工程操作成功?应如何进行检测?DNA分子杂交技术的原理是什么?除了用于目的基因检测与鉴定以外,试举例说明DNA分子杂交技术还有哪些应用。答案DNA分子杂交技术利用了碱基互补配对原则。DNA分子杂交技术还可用于亲子鉴定、刑事侦查、生物亲缘关系确定等。探究点一探究点二当堂检测本课必记归纳提升目的基因的检测与鉴定的方法探究点一探究点二当堂检测本课必记案例探究例题生物学家了解到,病毒感染的细胞能产生一种因子,这种因子能作用于其他细胞,干扰病毒的复制,故将其命名为干扰素。从1987年开始,用基因工程方法生产的干
7、扰素进入了工业化生产,并且大量投放市场。(1)若已知目的基因的核苷酸序列,则获取较小的目的基因较简单的方法是;目的基因还可以从文库中获取,而从cDNA文库中不一定能得到,原因是。(2)用限制酶处理质粒和含目的基因的DNA片段后,用酶处理,可形成基因表达载体,该载体的化学本质是。探究点一探究点二当堂检测本课必记(3)转基因技术是否成功,需要对受体细胞进行分子水平的检测,首先是检测受体细胞的上是否插入了目的基因,这是目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键,检测方法是采用;最后还要检测目的基因是否翻译成了相
8、应的蛋白质,利用的技术是。探究点一探究点二当堂检测本课必记解析(1)若已知目的基因的核苷酸序列,且基因比较小,则可以通过人工合成法获得目的基因;cDNA文库属于部分基因文库,所以cDNA文库中不一定有所需要的目的基因。(2)用限制酶处理载体和含目的基因的DNA片段后,需要使用DNA连接酶将目的基因与载体连接,基因表达载体的化学本质是DNA。(3)检测目的基因是否导入受体细胞使用的是DNA分子杂交技术;检测目的基因是否翻译成相应蛋白质采用的是抗原—抗体杂交
