醇提水沉与水提醇沉提取杜仲叶活性成分的比较研究_夏循礼.pdf

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1、第25卷第3期湖北大学学报(自然科学版)Vol.25No.32003年9月JournalofHubeiUniversity(NaturalScienceEdition)Sep.,2003文章编号:1000-2375(2003)03-0267-04醇提水沉与水提醇沉提取杜仲叶活性成分的比较研究夏循礼,陈勇(湖北大学生命科学学院,湖北武汉430062)摘要:分别采用正交设计实验考察了提取溶剂浓度、提取次数、提取时间、溶剂用量以及醇沉溶剂浓度等对醇提水沉法和水提醇沉法提取杜仲叶活性成分的影响,结果表明,无论是活性成分的含量,还是活性物质的得

2、率,醇提水沉法都优于水提醇沉法.关键词:醇提水沉;水提醇沉;杜仲叶;活性物质中图分类号:R282.71文献标识码:A杜仲传统以皮入药,皮剥树死.为保护杜仲植物资源,近年来对杜仲叶的化学成分及药理作用进行了[1]较深入的研究.有文献报导:杜仲叶与杜仲皮一样,含有几十种药用有效成分,如生物碱、桃叶珊瑚甙、黄酮类、内脂、维生素、微量元素、糖类、果胶、氨基酸等,杜仲叶和皮的水溶性或醇溶性提取物都含有咖啡酸、绿原酸、白桦酯酸等.现代药理研究表明杜仲叶具有如下生理功能:¹杜仲叶提取物能较好地促进机体中胶原蛋白的新陈代谢,增强细胞的活力,抗衰老作用

3、强;º抗机体疲劳作用极为显著;»具有明显的体液和细胞免疫增强作用;¼具有较好的降血脂、减少中性脂肪形成的作用.杜仲叶资源丰富,无毒能食,但一直[2~6]没有得到有效利用.目前也有许多关于杜仲叶活性成分提取分离研究的报告,但还存在一些问题:如只对单因素进行考察而不是对多因素进行综合考察,或者只采用平行设计实验而没有采用正交设计实验,或者只对某一种成分进行考察而没有对其它相关成分进行总体上考察等.本实验中对杜仲叶活性成分的提取工艺进行了正交设计,对比研究了醇提水沉法与水提醇沉法对杜仲叶活性成分提取的影响.1实验材料与仪器杜仲叶(Foliu

4、mucommiae)采自湖北十堰市台子村杜仲林场,经湖北大学生命科学学院植物分类学教授王万贤鉴定为杜仲科植物杜仲EucommiaulmoidesOliv.的干燥鲜叶.标准品绿原酸(chlorogenicacid)为中国药品生物制品检定所产品(批号:0753-9909),标准品京尼平甙酸(geniposidicacid)为日本和光纯药工业株式会社产品(批号:079-03431).检测用甲醇为色谱纯,水为超纯水.其它化学试剂均为AR级.检测仪器为高效液相色谱仪Waters515泵,Waters996检测器.电子天平FA1004(上海天平仪

5、器厂).2实验结果及数据分析本实验采用醇提水沉法和水提醇沉法,运用正交试验设计,分别选取环烯醚萜类的京尼平甙酸(GA)和有机酸类的绿原酸(CHA)为指标,对影响杜仲叶活性成分提取的因素和相应水平如溶剂浓度(50%~70%)、提取次数(1~3)、提取时间(1~3h)、溶剂用量倍数(8~12)和沉醇浓度(50%~70%)进行系统的考察,研究了杜仲叶活性成分的提取情况.2.1醇提水沉法醇提水沉法各因素水平安排见表1,数据分析见表2.提取的一般工艺流程见图1:就京尼平甙酸的得率而言,6#实验结果最好,因素水平组合为A2B3C1D2,即溶剂浓度

6、为A2,提取收稿日期:2002-11-29基金项目:武汉市科技局2001年重大攻关项目(20016001008)作者简介:夏循礼(1969-),男,硕士生268湖北大学学报(自然科学版)第25卷B3次,每次提取C1小时,溶剂用溶剂冷浸2h粗滤加适量水杜仲叶醇提醇提液浓缩转溶于水量倍数为D2倍.而从统计分析的角度来看,京尼平甙酸提取的过滤最佳工艺应为A1B2C1D3,即溶控温干燥干物质(含活性成分)水溶液剂浓度为A1,提取B2次,每次提取C1小时,溶剂用量倍数为D3图1醇提水沉法工艺流程倍.表1醇提水沉法因素水平安排就绿原酸的得率而言,

7、3#实水平溶剂浓度(A)提取次数(B)提取时间(C)溶剂用量(D)验结果最好,因素水平组合为1A1B1C1D1A1B3C3D3,即溶剂浓度为A1,提2A2B2C2D23A3B3C3D3取B3次,每次提取C3小时,溶剂用量倍数为D3倍.而从统计分表2醇提水沉法正交设计实验数据分析析的角度来看,绿原酸提取的最佳工艺应为A1B3C1D3,即溶剂ABCDGA得率P%CHA得率P%得率和P%1#11110.300.771.07浓度为A1,提取B3次,每次提取2#12220.340.861.20C1小时,溶剂用量倍数为D3倍.3#13330.27

8、0.941.214#21230.250.660.91就京尼平甙酸和绿原酸的提5#22310.280.710.99取率之和而言,6#实验结果最6#23120.370.891.267#31320.160.570.73好,因素

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