资源描述：
《DNA指纹图谱法及其应用_刘德立.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、生物化学与生物物理进展年第卷第期指纹图谱法及其应用刘德立华,。。。中师范大学生物系武昌提要指纹图谱,卫星区,法是利用卫星作探针探刚不同生物的产生相应。。的指纹图谱的杂交方法它是八十年代中期发展起来的最新技术短暂几,,、年该法得到迅速发展和完善并在法医学人类遗传学以及鸟类和其它哺乳类的遗传研究中得。到广泛应用指,,卫星关键词纹图谱指纹技术探针,。随着分子生物学的飞速发展各种先进技的图谱称之为指纹图谱这种利,用人,术正在不断涌现和完善并在各个领域得到
2、广体卫星区作为探针探测不同生物泛应用。八十年代中期出现的一指纹技术的卫星区,产生相应的指纹图谱的杂交。。就是其中之一方法叫指纹图谱法、、一指纹图谱的发现二卫星探针的制备,含在人类染色体中有许多分散的具有串人类卫星探针最初由小组。〔。联重复单位的微小卫星区在合成他们首先从人肌红蛋白基因的卫星区,。该重复单位由对碱这些区域中由于重复单位的数目不同和重复分离出单一重复单位,,基。,,拷贝数的等位性不同所
3、以许多卫星区表现出组成然后头尾相接再克隆到质粒,。〔‘一,,。高度多态性中得到一重组体用限制性内,等人发现,—,年这些区域可通过一种切酶和同时切割产生一个〔,。。一个碱基对的核心序列来检测根据碱基对的插人片段该片段几乎是个这种核心序列合成的探针能同时检测到许多高完整的重复单位每个重复单位是个碱基,,。用度可变的位点即卫星区产生相应的图对如图所示将人体部分。,,,,又谱
4、不同生物同一生物的不同品种甚至同一消化形成一片段克隆到噬菌体,。,,构。品种的不同个体其所含卫星区各异因此杂成人的基因库再用由重组体,制。交产生的图谱各不相同就象人的指纹备的探针进行筛选杂交结果表明在。,,一样所以把这种具有个体特征和种属特性个重组体中至少有个从强到弱的杂二,,卜口了亡,筋犷,一‘,
5、,‘了而口,,皿口甘·口,‘,留人本文于年月日收到人肌红蛋白基因外显子一脚绝到!中户’,户一
6、七卜台图碱基对探针的制备。人肌红蛋白荃因,个重复单位,第一个内含子中有一个卫星区含有仁每个重复单位由”对碱基组成两侧各有。对碱基用表示。分离纯化出单一重复单位。头尾相接。克隆到中插人片段的电泳图谱。。,交斑随机挑选个斑进行纯化杂交斑代号对每种卫星区的重复单位分别是人肌红蛋,,,,,,,分别为又白基因中卫星区的3碱基对探针的一半如又..。,和并对重组噬菌体进行杂交分33,和3315分别为1
7、7bp和16bp;或者相同..,..析。结果表明:在,几333,几336几3310又3311;,每个重组体中杂交DNA如和或者加倍如...02一Zkb)。。位于一个独特的小区(序列分析表几332和2334分别为62bp和64bp由此制备:,明这8个重组体的独特区是一个微小卫星的这8种DNA片段又成为新的探针可用于区。它。。由串联的重复单位组成重复单位数从人类DNA杂交和其它动物DNA的杂交其..3一29个不等。、中6和3每个重复单位的序列长度从探针315在与哺乳类和鸟类DNA..”巧中的16碱基对到又334中的64碱基。2
8、所示。杂交中特别有效其结构如图。,,336[(AGGGCTGGAGG)8几探针J1、。一DN15(AGAGGTGGGCAGGTGGA探针33)三指纹图潜的获取.图2探针33.6和3315的序列,用卫星DNA探针可以较容易地获取图3不同人种的DNA指纹图邀a)(b)(。.1,.斗,.()分别为探针”””1
