怀牛膝与川牛膝指纹图谱比较.pdf

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1、·3∞·《中蒋医学杂惠)2008年增刊吸附量，为116．25rag．g—I，洗脱率为92。9％，高习：其它4种大孔吸附树脂。同时，其动态吸附一洗脱性能也最好，总黄酮鬻收率为鲻。13％。综合考虑各因素，AB一8垄大砘吸辱l；}树脂为分离纯化革珊瑚总黄酮的最佳树脂。3．2被吸附有效成分与大孔树脂用量比。目前，尚未见有大孔吸附树脂分离纯化草珊瑚总黄酮上样浓度的摄导，但裔摄导上撵液孛被分离骞效成分浓度对吸附量有影响¨J，上样液中被分离露效成分与大孑L树脂用量要有一合理菇：倒才能达刭最佳效果。率研究表疆上样液中总黄酮

2、浓度与吸附量呈明显的正相关关系，19．82rag．L“吸附恩明显高予9．93mg．L一，适当提高上样液中被分离有效成分浓度有利于吸附。上样液有效成分以分离的目标产物草珊瑚总黄酮计，可消除草瑗瑚药鸯于产地、品种等不隧造成的慧黄酮含量夔异，有利子保证吸辩完全及减少损失。所以，用被分离有效成分与大孑L树脂用量比较用原生药与大孔吸附树脂用量比为好。本研究上样液与树脂比为10：1(总黄酮质量：树脂质墩=1：10．5)时效果好，为保证吸附完全，实际生产中树脂量应约太子此比例，以保涯达裂饱耜吸附及吸尉完全。3。3筛选上柱

3、工艺条件(柱径高毖、pH、温度、流速、洗脱剂种类及浓度、冲洗杂质溶剂及浓度等)。在选定树脂后，分别对影响AB一8型树脂吸附、洗脱的因素进行了考察，研究表明：上样液以pH4—5时饱和吸附量最大，函黄酮类化合物多具酚羟基，显弱酸性，当上样液pH偏大时，萆珊瑚总黄酮有离子化趋势丽不易被吸附。因诧，上撵液pH值偏酸有乖j予吸附；洗脱荆乙醇浓度增高，洗脱率逐渐增大，70一90％的乙醇洗脱率均在90％以上，而乙醇浓度高易挥发，从经济，节约出发选用70％乙醇即可；洗脱剂用量以3BV，上柱流速为2—3mL．rain一；样品

4、液上柱流速必2—3mL．rain～；冲洗杂质用水量2—3BV，上柱漉速为3—4mL。min～，即可达到满意效果，惑黄酮纯度达90％、圈收率达90％。3．4树脂再生或更换。随着吸附～洗脱次数的增加，残留在树脂上而不能被洗脱下来杂质会增加，使吸附力减弱或丧失，总黄酮吸附率、纯度等均呈下降趋势。因此使用一段时间膀(4—5次)，必须对撼貉进行再生处理，以僳涯总黄酮强收率、纯发均在90％以主。3．5在线裣测。在生产中，为了保证吸附完全及减少有效成分?f

5、}漏损失，疑随时进行检测，判断上柱终点、洗脱终点、水洗终点等。工

6、作量较大，操作麻烦，有条件的企业可考虑采取在线检测，以提高质数及效益。参考文献：(略)怀牛膝与川牛膝指纹图谱比较王丽景。李金贵。刘传敏，陈±申(扬州大学兽医学院。江苏扬髑225009)摘嚣：本文以怀牛膝、川牛膝两个不同品种牛膝的干燥根粉末为材料，通过紫外一可见光谱法、红外光谱法、X射线糖浆法及簧蠹震sDs—PAGE电溶浪分别建立两种牛臻的指纹窭谱，以此表区分鉴别拜个不箴的品种，结果表明紫外光谱法、红外光谱法与X毒}线衍射法可有效区分两寿。而蛋白质指纹图谱捆儆。不能作为区分两者的指标。关键词：,g．q-膝；川

7、牛臻、紫外光谱法、红外光谱法、x射线衍射法、萤白质SDS—PACE电泳法牛膝(AchyranthesbidentataBI．)叉名百倍、_怀牛膝、鸡胶骨，为苋科植物牛膝的干燥校，具有补肝肾、强筋骨、逐瘀通经、引血下行簿功效。因主产于河南古怀庆府，故称怀牛膝。川牛膝为苋科川牛膝Cyathulaofficinaliskuao的干燥根⋯。前者长予李}肝肾，强筋骨。后者长于活血纯淤。本文以二者的干燥根粉末为材料，建立其根中化学成分的紫外、红外和x射线粉末衍射的指纹图谱，并通过SDS—PAGE分离醇溶、水溶憔蛋白建立

8、蛋白质指纹图谱，试图比较两品种牛膝根中化学成分的差异，并以此作为相应生物活性的评价指标。1材料及方法1．1材料及仪器怀牛膝及川牛膝均购自困药控般汉苏有限公司中药饮晶厂(产地分别为河南安阳，四川雅安)，经扬列大学兽医学院中磐医教研室鉴定为怀牛膝，周串膝的于燥裰。取其掇粉碎，遗160目筛，樗样品粉末。记为H，C。《中兽医学杂志)2008年增刊·紫外一可见分光光度计(日本岛津．MPS一2000型)；红外光谱仪(德国Bmker公司．Ten．∞＆7型)：x射线糟末衍射仪(德国BrIlkcr—AXS公司，D8Super

9、Speed型)；电泳仪(北京六一，DYY一Ⅲ系列)12试验方法12I紫外一可见(UVS)光谱指纹图谱的建立取样品019溶于3m170％的乙醇溶液或3nd蒸馏水中，40℃水浴过夜，12．000一mln离心10rain，取上清液适量加入相应溶剂稀释至一定维度作为供试渡，在190一500衄范围内扫描，紫外可见光谱吸收度最大量程为：2ooo，即得紫外一可见光谱指纹图谱。122红外(IR)光谱指纹圈谱的建立KBr压片法测定