应用荧光原位杂交技术检测膀胱尿路上皮癌的可行性费.pdf

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1、实用医学杂志2009年第25卷第15期2451应用荧光原位杂交技术检测膀胱尿路上皮癌的可行性熊标吕胜启庞一雄摘要目的：探讨荧光原位杂交技术辅助诊断膀胱尿路上皮癌的可行性。方法：采用3，7，17号染色体着丝粒探针和9p16染色体探针对22例确诊膀胱尿路上皮癌患者尿液和20例正常人尿液脱落细胞进行荧光原位杂交（fluorescenceinsituhybridiza-tion，FISH），统计并分析染色体畸变情况。结果：膀胱尿路上皮癌患者与正常人3、7、17和9p16染色体畸变数差异均有显著性，且4组探针联合诊断膀胱癌敏感性为63．6％，明显高于四种探针单独使用。结论：荧光原位杂交技术可

2、以作为膀胱癌诊断的一项辅助方法。关键词膀胱肿瘤；荧光原位杂交技术；检测ThefeasibilityoffluorescenceinsituhybridizationfordetectingurothelialcarcinomaoftheurinarybladderXIONGBiao，LVSheng-qi，PANGYi-Xiong．DepartmentofUrology，RenminHospital，WuhanUniversity，Wuhan430060，ChinaCorrespondingauther：LVSheng-qiE-mail：luker2007＠163．com【Abstr

3、act】ObjectiveToexplorethefeasibilityoffluorescenceinsituhybridization（FISH）fordetectingurothelialcarcinomaoftheurinarybladder．MethodsUsingcentromericprobesforchromosomes3，7，and17andachromosome9p21probe，weperformedFISHontheexfoliativecellsintheurinarysamplesfrom22patientswithpathologicallyconfi

4、rmedurothelialcarcinomaand20healthycontrols．Thenwenotedandanalyzedaberrationsinthechromosomes．ResultsThenumericalaberrationsofchromosomes3，7，17，and9p21differedsignificantlybetweenthepatientsandthecontrolsubjects．Furthermore，thesensitivityofthecombineduseof4probesfordetectingurothelialcarcinoma

5、oftheurinarybladder（63．6％）wasgreaterthanthatofeachprobealone．ConclusionsFISHcanbeusedasanauxiliaryapproachtodiagnoseurinarybladder．【Keywords】Bladderneoplasms；Fluorescenceinsituhybridization；Detection膀胱肿瘤是泌尿生殖系统最常见的肿瘤之一。绝1．2标本的处理收集膀胱癌患者和正常对照组晨大部分来源于上皮组织，其中90％以上为移行上皮肿尿200mL，经1200r／min离心后，弃上清，悬浊液

6、依瘤［1］次用胶原酶、低渗溶液、固定液处理后，常规滴片，室。目前膀胱镜检及尿脱落细胞形态学检查仍是临床上膀胱癌诊断普遍采用的两种手段。膀胱镜检是膀温过夜老化玻片。胱癌诊断的确诊方法，但此项检查为有创检测，患者1．3探针的使用采用金菩嘉医疗科技有限公司痛苦，难以接受。而尿脱落细胞形态学检查虽为无创GLP9P16／CSP17DNA探针与CSP3／CSP7DNA探针。性，但敏感性低［2］。因此，人们一直在探索更为有效、1．4原位杂交（1）玻片预处理：用RnaseA（100μg／mL）简便、安全、无创的诊断及监测膀胱尿路上皮癌的方和胃蛋白酶溶液先后处理后，玻片在室温下于2XSSC法。本研究

7、采用双色荧光原位杂交技术检测膀胱肿瘤（pH7．0）溶液中漂洗3次，每次2min，于预冷的乙醇患者晨尿中脱落细胞的3、7、17号染色体及9号染色中梯度脱水，自然干燥玻片。（2）标本准备及变性：玻体9p21区带（9p16基因）的畸变情况，并与正常组对片在70％甲酰胺／2XSSC（pH＝7．0），于73℃变性5照，探讨荧光原位杂交技术应用于膀胱尿路上皮癌诊min，预冷的乙醇中梯度脱水，自然干燥玻片。（3）探针断的可行性。处理：按照探针2μL、去离子水1μL、杂交缓冲液71资