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时间:2019-02-09
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1、中山大学硕士学位论文国产探针荧光原位杂交在膀胱癌诊断中的应用姓名:张嘉希申请学位级别:硕士专业:外科学指导教师:周祥福20080528中山大学硕士学位论文国产探针荧光原位杂交在膀胱癌诊断中的应用国产探针荧光原位杂交在膀胱癌诊断中的应用专业:外科学申请人:张嘉希导师:周祥福教授中文摘要背景与目的:膀胱癌是世界十大恶性肿瘤之一,也是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤,但其早期诊断比较困难。膀胱移行细胞癌(BladderTransitionalCellCarcinoma,BTCC)是其中最为常见的病理类型,其显著特点是具有多病灶和高复发率。因此膀胱癌病人术后监测尤为重要。传统
2、的膀胱癌的诊断及术后监测手段主要有尿脱落细胞分析、膀胱镜检查等。这些方法有侵入性,且缺乏敏感性和特异性。随着分子生物学技术的发展,近年出现了一些检测膀胱癌的新方法,和尿脱落细胞分析相比有较高的诊断敏感性,但可受血尿、尿路感染、膀胱灌注治疗的影响而出现假阳性结果。因此,仍需一种更为有效、简便、安全的方法来诊断及监测膀胱尿路上皮癌复发。Sandberg研究认为,膀胱癌易发生非随机的染色体改变,包括结构畸变和染色体数目异常。Sokolova等和Hailing等根据以往研究结果,研发了四色FISH(UroVysion)试剂盒,用于尿路上皮癌的诊断和术后监测。国外的研究显
3、示其诊断敏感性高于尿脱落细胞学,特异性与尿脱落细胞学相当。但由于费用和技术的问题,FISH在我国一直未得到广泛应用,尤其是在膀胱癌诊断应用中。最近,国内金菩嘉公司研制出膀胱癌DNAFISH探针,降低了FISH膀胱癌诊断费用,但在我国尚无与此试剂盒相关的研究结果报告。本研究使用国内金菩嘉公司膀胱癌DNAFISH探针,采用FISH技术检测9p21区带及l7、7、3号染色体的畸变情况,探讨使用国产膀胱癌DNAFISH探针的FISH应用于中国人膀胱癌诊断中山大学硕士学位论文国产探针荧光原位杂交在膀胱癌诊断中的应用的可行性。材料与方法:20例尿液标本来自于2007年1月至
4、2008年5月中山大学附属第三医院泌尿外科手术病例,在未经治疗前留取。所有病例均经病理诊断为膀胱癌。另取20例正常人尿液标本作为对照。使用国内金菩嘉公司膀胱癌DNAFISH探针,采用FISH技术检测9p2l区带及l7、7、3号染色体的畸变情况,并对结果进行相应的统计学分析。结果:在正常人对照组中,各探针所标记的染色体均未发现有达到国外诊断标准的畸变。在总共20例膀胱癌病人组中,4个染色体均显示较高的畸变率。9p21区带畸变率为75%,17号染色体畸变率为60%,7号和3号染色体畸变率均为70%。根据国外FISH探针诊断膀胱癌判定标准,国产膀胱癌9p2l及l7、7
5、、3号染色体探针组合诊断膀胱癌的敏感性为90%,特异性为100%。9p21以及l7、7和3号染色体畸变率与病理分期、分级均有显著相关性(P<0.01)。结论:1.膀胱癌FISH检查有着较高的敏感性和特异性,虽然在目前尚不能完全取代膀胱镜检查诊断膀胱癌的金标准,但在一些可疑病例中,仍不失为一种较好的辅助检查方法。2.本研究中,运用金菩嘉公司国产膀胱癌DNAFISH探针诊断膀胱癌具有较高的敏感性及特异性,但能否用于中国人膀胱尿路上皮癌的诊断,尚需要增大样本量,并研究更多的染色体在膀胱尿路上皮癌患者、非尿路上皮癌尿路疾病患者和正常人尿脱落细胞中的畸变情况,以制定适当的
6、阳性判断标准及寻找适于中国人的探针组合。关键词t膀胱癌,荧光原位杂交,染色体畸变,诊断中山大学硕士学位论文国产探针荧光原位杂交在膀胱癌诊断中的应用DetectionoftheUrinaryBladderCarcinomabyFluorescenceInSituHybridizationwithChineseDNAFISHProbesABSTRACTBACKGROUND&OBJECTIVE:Urinarybladdercarcinomaisacommonmalignantneoplasmofthegenitourinarysystem.Thisstudywasto
7、analyzechromosomeaberrationsintheurinarybladdercarcinomainChinese,andevaluatethepossibilityandvalidityoffluorescenceinsituhybridization(FISH)withChineseDNAFISHprobesindetectingurinarybladdercarcinoma.METHODS:Theprobesof9p21regionandchromosome17,7,3centromereswerelabeledbyrandomprimer
8、method.FISHw
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