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《rna干扰沉默hdac1基因对胃凋亡组蛋白乙酰化和甲基化的影响_庄涵虚》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、网络出版时间：2014-02-1517:52网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/doi/10.3969/j.issn.1673-4254.2014.02.21JSouthMedUniv,2.html·246·doi10.3969/j.issn.1673-4254.2014.02.21JSouthMedUniv,2014,34(2):246-250基础研究RNA干扰沉默HDAC1基因对胃癌细胞增殖、凋亡、组蛋白乙酰化和甲基化的影响11112庄涵虚，马旭东，赖亚栋，许向农，王小众12福建医科大学附属漳州市医院消化内科，福建漳州363000；福建医科大学附属协和医
2、院消化内科，福建福州350001摘要：目的探讨RNA干扰沉默HDAC1基因对人类胃癌MGC803细胞增殖、凋亡及组蛋白乙酰化水平的影响。方法设计针对HDAC1基因小干扰RNA片段，经脂质体转染入MGC803细胞，RT-PCR及Westernblot鉴定其干扰效果；MTT法绘制细胞生长曲线，TUNEL分析细胞调亡，Westernblot检测组蛋白H3、H4乙酰化、组蛋白H3K9甲基化的影响及凋亡相关蛋白BCL-2、pro-caspase-9、pro-caspase-3、C-myc蛋白表达。结果HDAC1siRNA转染MGC803细胞后，HDAC1基因的mRNA、蛋白表达均明显下降，有统计
3、学意义（P<0.05）；60、120、240nmol/LHDAC1siRNA处理24h后，细胞凋亡率分别为（18.5±3.5）%、（41.4±4.3）%、（59.2±5.5）%，而对照组仅为（4.8±2.7）%，有统计学意义（P<0.05）；同时下调Bcl-2、proCaspase-9、proCaspase-3、c-Myc的表达；上调细胞周期蛋白P21的表达；干扰HDAC1基因可上调组蛋白H3，H4乙酰化水平，下调H3K9甲基化水平。结论干扰HDAC1基因表达后可能通过上调与基因转录激活有关的组蛋白H3、H4乙酰化水平，下调与基因转录抑制有关H3K9甲基化水平，从而抑制细胞增殖，诱导细
4、胞凋亡。关键词：胃癌；组蛋白乙酰化；HDAC1；RNA干扰EffectofsiRNAtargetingHDAC1geneonproliferation,apoptosis,histoneacetylation,andhistonemetylationingastriccancercellsinvitroZHUANGHanxu1,MAXudong1,LAIYadong1,XUXiangnong1,WANGXiaozhong21DepartmentofGastroenterology,ZhangzhouHospitalAffiliatedtoFujianMedicalUniversity,
5、Zhangzhou363000,China;2DepartmentofGastroenterology,UnionHospitalofFujianMedicalUniversity,Fuzhou350001,ChinaAbstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofsilencinghistonedeacetylases1(HDAC1)genebyRNAinterferenceontheproliferation,apoptosisandhistonemodulationingastriccancerMGC-803cellline.MethodsTh
6、eoptimalsegmenttargetingHDAC1genewasdesignedandtransfectedintoMGC-803cellsbyLipofectamineTM2000.HDAC1mRNAandproteininthetransfectedcellsweredetectedbyRT-PCRandWesternblotting,respectively.ThegrowthinhibitionofMGC803cellswasevaluatedbyMTTassayandthecellapoptosiswasdetectedwithTUNELassay.Theexpres
7、sionofBcl-2,procaspase-9,procaspase-3,c-Myc,histoneacetylationofH3,H4,andhistonemethylationofH3K9wasdetectedbyWesternblotting.ResultsThesiRNAtargetingHDAC1HDAC1markedlysuppressedmRNAexpression,inhibitedcellproliferationandin
