胰岛素与肾上腺素对血糖浓度的影响.ppt

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1、胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响实验目的1、掌握胰岛素和肾上腺素对血糖水平的调节作用2、熟悉分光光度计的使用。二、实验原理人和动物体内,血糖浓度受各种激素调节而维持恒定。胰岛素能降低血糖;其他很多激素则具有升高血糖的作用,其中以肾上腺素作用较为迅速而明显。胰岛素促进肝和肌将葡萄糖合成糖原,又加强糖的氧化利用,故可降低血糖;肾上腺素促进糖原分解而增高血糖。人和动物体内,血糖浓度受各种激素调节而维持恒定。胰岛素能降低血糖;其他很多激素则具有升高血糖的作用,其中以肾上腺素作用较为迅速而明显。胰岛索促进肝和肌将葡萄糖

2、合成糖原,又加强糖的氧化利用,故可降低血糖;肾上腺素促进糖原分解而增高血糖。三、实验材料1、家兔。2、722N型分光光度计。3、试剂。(1)草酸钠。(2)葡萄糖。(3)肾上腺素lmg/ml。(4)胰岛素。四、实验方法1.动物准备:取正常家兔一只,实验前预先饥饿16h,称体重(一般为2~3kg)。2.取血:心脏采血,放入含抗凝剂的试管中,约需5ml,混匀。(抗凝血1)3.注射激素后取血:取饿兔血后,其中一组在兔皮下注射胰岛素,剂量按1U/kg体重计算,并记录注射时间。30分钟后再取血。另一组在兔皮下注射肾上腺素

3、,剂量按0.4mg/kg体重计算。并记录注射时间。15分钟后再取血。(抗凝血2)制备无蛋白血滤液3.5ml蒸馏水+0.5ml抗凝血+0.5ml1/3mol/L硫酸+0.5ml10%钨酸钠混匀后离心五分钟,三档(1500转/分),将上清液用胶头滴管转移至干燥的试管中。即为无蛋白血滤液血糖管试剂ml空白管标准管测定管1测定管2无蛋白血滤液一一1ml1ml标准葡萄糖应用液一1ml一一蒸馏水2ml1ml1ml1ml碱性铜试剂2ml2ml2ml2ml混匀,置沸水浴中煮8min。取出用自来水冷却(切勿摇动)磷钼酸试剂2m

4、l2ml2ml2ml混匀后放置2min,临比色前加水至25ml比色测定将各管颠倒混匀后,用空白管调零,在620nm处测定吸光值。操作注意1、等水沸腾后,才能放入血糖管。加热要准确8分钟。2、冷却时切不可摇动血糖管,以免还原的氧化亚铜被空气中的氧再氧化,降低实际结果。3、加入磷钼酸后迅速比色。4、分光光度计的使用。分光光度计的使用1、接通电源,打开比色皿盖,预热20-30分钟后,调节波长至所需波长。2、将盛有空白溶液的比色皿放在比色架的第一格,其余放测定溶液。将比色皿盖盖上,此时空白溶液在光路上。将光点调到“T

5、”,调节T为100%。3、将光点调到“A”,轻轻拉动比色架固定拉杆,使第二个比色皿溶液处在光路中,此时读数即为该溶液的吸收度。4、依次拉出第三、第四个比色皿,分别读取吸收度。5、测定完毕,先打开比色皿盖,再断电源。结果计算测定管吸收度标准管吸收度0.1×0.5551/=1L血液中的血糖mmol数

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