国学薯植物研究所,南京o.pdf

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1、毫i仑垒赢述黑莓和树莓组织培养研究进展李维林,李海燕,王小敏,吴文龙(国学薯植物研究所,南京21o014)摘要:从无菌繁殖体系的建立、继代快速繁殖、愈伤组织的诱导和分化、试管苗的生根培养及其移栽驯化等方面综述了黑莓和树莓组织培养研究进展,并论述了组织培养技术在黑莓和树莓脱毒快繁、基因工程育种和诱变育种方面的应用状况。关键词:黑莓;树莓;组织培养;脱毒快繁;育种黑莓(Rubusspp.)和树莓(R.idaeusL.)是蔷薇席丛林¨用黑莓和红树莓幼嫩程度不同的茎段作科(Rosaceae)悬钩子属(RubusL.)

2、多年生浆果类果为外植体进行组织培养研究,结果发现选用中部半树⋯,其果实营养丰富,富含糖、有机酸及多种维生木质化的茎段为外植体存活率最高,褐化率最低。素,有防衰老和提高人体免疫力等功效,尤其是过氧徐桂娟等¨以黑树莓的带芽茎段为外植体进行组化物歧化酶(SOD)含量为水果之最_2J,因此受到欧织培养试验,结果发现选用半木质化的茎段作外植美等国家的普遍欢迎,具有很高的经济价值。黑莓和体,成活率达82.8%,明显高于嫩梢和未木质化的树莓在栽培中一般采用扦插、压条、分株和根蘖等无茎段。李从玉等¨用美国黑莓‘Hull’的叶

3、片作为性繁殖方法,但长期的田间无性繁殖,使病毒积累,危外植体,成功培育出了完整的植株。徐娥等¨以树害加重,导致产量下降,品质变劣,给生产造成重大的莓的茎尖为外植体进行组织培养,筛选出了各培养经济损失。通过组织培养,可以对植株进行脱毒复阶段适宜的培养基。Cantoni等对‘Hull’进行组壮,保持植物的优良特性和性状,防止品种过快退织培养研究,通过胚状体发生途径获得了再生植化I4J。组织培养法还具有繁殖周期短、繁殖快、繁株,并发现起源于同一胚的再生植株在形态方面存殖系数高、节省空间等优点。因此,对黑莓和树莓的在

4、差异。Mezzetti等l16]1999年采用树莓品种‘Au.组织培养技术进行研究,迅速提供大量优质苗木,是tumnBliss’(2n=2x=14)和黑莓品种‘Hull’(2n=保证其规模化发展的重要措施。4x=28)的叶片和悬浮细胞建立了有效的原生质分1黑莓和树莓的组织培养技术研究离和培养程序,并在不同的植物生长激素的调节下早在1934年,StoutemyerVT等已开始了树培养出了完整的植株。莓组织培养的研究,到了20世纪70年代,国外已建(2)外植体的灭菌。消毒灭菌中可用的灭菌剂立了一套完整的枝条离体繁

5、殖技术_8],并成功得到种类有多种,如HgC1、酒精、次氯酸钠、次氯酸钙、双了子叶分化植株¨。我国黑莓和树莓栽培历史较氧水、溴水、硝酸银、吐温一2O等。黑莓和树莓组织短,有关组织培养的研究报道较少,主要集中在对引培养中一般选用的灭菌剂为酒精和HgC1,但也有用进的优良黑莓和树莓品种的最适培养基成分的其他消毒剂的,如Gonzalez等用3种浆果(黑莓、探索上。树莓、蓝莓)的带芽茎段作为组织培养的外植体时,1.1无菌繁殖系的建立所采用的消毒灭菌程序为:外植体先在70%酒精和1.1.1外植体的选择与灭菌1%吐温一2

6、0中处理30S,然后在0.1%的苯菌灵(1)外植体的选择。黑莓和树莓组织培养常用(benomy1)中浸泡15min,0.5%次氯酸钠中表面消毒的外植体有茎尖、茎段、叶片、胚、子叶、原生质体。20rain,最后用无菌水冲洗4次。贺立恒研究了0.1%HgC1不同的消毒时间对红树莓和黑莓腋芽存收稿日期:2008-10-20修回日期:2008—11—17活及萌发的影响,结果显示:在红树莓和黑莓茎尖组基金项目:江苏省农业高科技项目“低山丘陵地区适栽果品一黑莓优良新品种选育”(编号:BG2007311);江苏省科技基础设

7、施建设计划项织培养快速繁殖体系的建立过程中,0.1%HgC1,对目“江苏省溧水黑莓产业公共技术服务中心”(编号:BM2008101)。腋芽最适的消毒时间为8min左右。袁艺等叫以第一作者简介:李维林(1966一),男,研究员,主要从事经济林和药用植物的研究。E—mail:1wlcnbg@mail.cnbg.net黑莓和树莓茎段作为外植体时,消毒灭菌的具体程序林业科技开发2009年第23卷第3期9苣论综述为:先用自来水将外植体表面冲洗干净,在超净工作1.1.3培养条件台上置于70%酒精中表面消毒30S,再用0.

8、1%植物组织培养中外界环境条件是一个重要因素,HgC1消毒8min,最后用无菌水冲洗4~5次,然后这些条件包括光照、温度、湿度、培养基酸碱度、气体接种。成分等方面。一般来说黑莓和树莓在培养温度为251.1.2培养基的选择~28℃,光照强度为1400~2500lx,光照时间为10培养基的种类、成分直接影响到培养材料的生长~15h/d,相对湿度为40%~80%,培养基pH为5.8发育,是植物组织培养成功

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