2018_2019学年高中生物专题1基因工程1.2基因工程的基本操作程序课件新人教版选修.pptx

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1、方法基因文库的构建PCR技术扩增人工合成基因组文库部分基因文库(如cDNA文库)过程优点操作简单专一性强可在短时间内大量扩增目的基因专一性强,可产生自然界中不存在的新基因缺点工作量大、盲目性大、专一性差操作过程较麻烦,技术要求过高需要严格控制温度、技术要求高适用范围小比较项目PCR技术DNA复制区别解旋方式DNA在高温作用下变性解旋解旋酶催化场所细胞外(在PCR扩增仪内)细胞内(主要在细胞核内)酶耐热的DNA聚合酶(Taq聚合酶)DNA解旋酶、普通的DNA聚合酶等温度条件需控制温度,在较高温度下进行细胞内温和条件合成的对象DNA片段或基因DNA分子联系①模板:均需要脱氧核苷酸

2、链作为模 板进行物质合成②原料:均为四种脱氧核苷酸③酶:均需要DNA聚合酶进行催化④引物:均需要引物,使DNA聚合酶 从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸微生物动物植物生物类型Ca2+处理细胞↓感受态细胞↓基因表达载体与感受态细胞混合↓感受态细胞吸收DNA分子提取含目的基因的表达载体↓显微注射↓受精卵发育↓具有新性状的个体以农杆菌转化法为例:将目的基因插入Ti质粒的TDNA上↓转入农杆菌↓导入植物细胞↓整合到受体细胞的DNA上转化过程感受态细胞法显微注射技术农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法常用方法原核细胞受精卵体细胞受体细胞

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