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时间:2020-03-30
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1、实验一大型海藻种类形态观察<4学时第八周)一、实验目的了解海洋藻类----大型海藻与微藻的形态与分类。二、实验材料及用具1、实验材料:1)大型海藻标本<学院标本室);2)海带孢子体<可用干海带泡发),江篱<海洋学院附近打捞);<取一部分冻存于-20冰箱,作为叶绿素提取实验的材料)b5E2RGbCAP2、实验器材:显微镜、胶头滴管<每瓶藻一支)、盖玻片、载玻片、刀片<做海藻切片)。4、试剂:70%乙醇<每组一瓶)三、实验步骤1、大型海藻标本观察;将标本馆的拉丁文名抄录下来,网上检索图片和分类。2、海带的外部形态观察:藻体明显分为固着器、柄部和叶片,在
2、叶片中央有两条平行纵走的浅沟,孢子体幼龄期叶面平滑,小海带期叶片出现凹凸现象,大海带期叶面则平直宽厚。p1EanqFDPw3、海带的内部构造:①用徒手切片的方法,取一小块孢子体进行横切片,在显微镜下观察:孢子体的柄和叶均分为表层、皮层和髓部。②同样取一小块孢子体进行纵切片,在显微镜下观察:表皮层由1-2层排列紧密的小细胞组成,外皮层细胞间分布1-2层粘液腔,其腔内有分泌细胞,髓丝细胞一端膨大为喇叭花,分生细胞位于叶片与柄之间。DXDiTa9E3d10/104、江蓠的内部构造观察:①江蓠的纵切面。②江蓠的横切面。③江蓠囊果横切面。5、紫菜的形态与构造
3、:干紫菜先用水浸泡散开,再进行观察。固着器:由根丝集合而成。叶状体:由一层或两层细胞构成。柄:叶状体基部与固着器之间的部分。四、作业:1、绘制大型海藻图:选5个标本,注明拉丁文名,简要说明其生物学特性<利用拉丁文名进行网上检索)。2、绘出海带和江篱的内部构造,紫菜的外形。附1:江篱与海带的内部构造图1.江篱藻体的内部构造A.藻体横切面观;B.藻体纵切面观;1表皮;2髓部细胞3表皮细胞10/10图2.海带构造A.海带孢子体横切面;B.髓部,C.示喇叭丝;皮层部分横切面,示粘液腔道形成的时期;D.成体横切面,示粘液腔道;co皮层;e分泌细胞;hg藻丝;
4、me髓部;m表面分生细胞;s分泌腔;v.b.f结合的喇叭丝RTCrpUDGiT实验二微型海藻形态观察和培养<4学时,第九周)一、实验目的观察几种重要经济微藻的形态特征,几种掌握单细胞微藻的实验室培养方法,细胞生长曲线观察。二、实验材料及用具1、实验材料:小球藻、扁藻、等鞭金藻、角毛藻、骨条藻、茧形藻、池塘水样等微藻。2、实验仪器:电炉、恒温干燥箱、灭菌锅、pH计、可见分光光度计、血球计数板3、实验器材:500ml试剂瓶<每组5个);0.45mm的滤膜<一个);抽滤装置(或针管>;玻棒、500ml烧杯、50ml容量瓶<每组一个);250ml锥形瓶<每
5、组2个)、牛皮纸、细绵绳5PCzVD7HxA4、试剂:蒸馏水、消毒海水、各种试剂<见培养基配方),微藻培养母液三、实验步骤1、微藻形态观察:分别取各种微藻水样置于载玻片上,盖上盖玻片,于显微镜下观察。先用10倍镜观察,然后转换物镜转换器用40倍观察。jLBHrnAILg10/102、培养基母液配制<配方见附2):<提前配好,有兴趣的同学可与实验老师王老师联系好时间,学习配制)1000倍培养基母液<强调维生素母液的配制方法)。配方见附1。xHAQX74J0X3、培养微藻的容器、工具及用水的消毒<提前准备):<1)培养微藻所用的容器、工具应用洗刷干净后
6、晾干,放置恒温干燥箱中加热,120℃恒温1小时以上,自然冷却备用。LDAYtRyKfE<2)加热煮沸消毒海水冷却至室温后备用。4、配制微藻培养液。按照母液配制比例把母液加入消毒海水,配制培养液<例如,1000倍母液,则每升消毒海水中加入1毫升母液,摇晃均匀,就成了培养液)。Zzz6ZB2Ltk5、接种:取两种微藻,各按1/3~1/5接种<即把1份藻种加入3~5份培养液中)。6、培养、管理。将接种好的微藻置于适宜的条件下培养,每天摇晃1-2次,。7、藻细胞密度计数<方法见附3)。分光光度计测定吸光值或血球计数板计数藻细胞密度。不同种类的微藻所选用的波
7、长不一样,一般绿藻门波长为720-750,金藻门、硅藻门波长为420。dvzfvkwMI18、本实验采用分光光度计每2天测定一次,培养时间为横坐标,藻细胞的OD值为纵坐标,绘制生长曲线。培养两周。rqyn14ZNXI四、作业:1、绘制观察到的微藻的形态图。2、通过哪些具体措施使培养基无菌?3、为何配制母液?配制培养基时,为何要等消毒海水冷却后再加母液?4、EDTA的作用?5.以培养时间为横坐标,相对应藻液的OD值为纵坐标,作图。6、计算每瓶藻的培养6天的生长速率,公式如下:K=8、K<2)其中:K为相对生长速率;t1、t2为对应的培养时间;N1和N2分别为t1、t2时的细胞密度(微藻用OD值,江篱用重
8、K<2)其中:K为相对生长速率;t1、t2为对应的培养时间;N1和N2分别为t1、t2时的细胞密度(微藻用OD值,江篱用重
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