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1、基因工程试卷B一.名词解释(每个2分,共20分)1,转化:2,质粒转移性:3,DNA文库:4,RACE:5,选择标记基因:6,降落PCR：7,载体:8,感受态细胞:9，CaMV35s:10,ORF:二,选择题(每题1分,共15分)1()限制性核酸内切酶是由细菌产生的,其生理意义是A修复自身的遗传缺陷B促进自身的基因重组C强化自身的核酸代谢D提高自身的防御能力2()生物工程的下游技术是A 基因工程及分离工程B蛋白质工程及发酵工程C 基因工程及蛋白质工程D分离工程及蛋白质工程3()基因工程操作常用的酶是:(I内切酶II连接酶III末端转移酶
2、IV聚合酶 A.I+IIB.I+III+IVC.II+III+IVD.I+II+IV+III4()限制性内切核酸酶的星星活性是指:A在非常规条件下,识别和切割序列也不发生变化的活性. B活性大大提高C切割速度大大加快D识别序列与原来的完全不同5()下列五个DNA片段中含有回文结构的是A.GAAACTGCTTTGACB.GAAACTGGAAACTGC.GAAACTGGTCAAAGD.GAAACTGCAGTTTC6()关于cDNA的不正确的提法是:A同mRNA互补的单链RNAB同mRNA互补的含有内含子的DNAC以mRNA为模板合成的双链R
3、NAD以上都不正确7()下列有关连接反应的叙述,错误的是A.连接反应的最佳温度为37℃B.连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C.连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD.连接酶通常应过量2-5倍8()T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起,其底物的关键基团是A.2'-OH和5'–PB.2'-OH和3'-PC.3'-OH和5'–PD.5'-OH和3'-P9()载体的功能是A.外源基因进入受体的搭载工具B.不能为外源基因提供整合能力C.不能提供复制能力D.不能为外源基因提供表达能力10()黏性末端连接法,不
4、仅操作方便,而且A产生新切点B易于回收外源片段C载体不易环化D影响外源基因的表达11()下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大 A质粒B黏粒C酵母人工染色体(YAC)Dλ噬菌体12()考斯质粒(cosmid)是一种 A.容量最大一种载体B.由λ-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体C.是一种单链DNA环状载体D.不能在受体细胞内复制,但可以表达13()某一重组DNA的载体部分有两个BamHI酶切位点.用BamHI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子,其长度总和与已知数据吻合,该重组分子插入片段上的BamHI酶切位点共有 A.4个B
5、.3个C.1个D.2个14()下列哪一种酶作用时需要引物 A限制酶B末端转移酶C反转录酶DDNA连接酶15用下列方法进行重组体的筛选,只有()说明外源基因进行了表达.(a)Southem印迹杂交(b)Northem印迹杂交(c)Western印迹(d)原位菌落杂交三,简答题(每题5分,共25分)1,简述获得目的基因常用的几种方法.2,什么是α-互补筛选 3,简述酶切反应体系及反应条件 4,核酸操作的基本技术有哪些 5,限制性核酸内切酶有几种类型常用是哪种类型并简述其特性.四,论述题(每题10分,共40分)1论述重组子的筛选和鉴定常用的方
6、法. 2基因工程基本操作程序. 3试述5′RACE技术原理和方法4试举例说明基因工程中为什么常用大肠杆菌作为工程菌 基因工程试题标准答案及评分标准B一,选择题(每题1分,共15分)1,D2,A3,A4,D5,D6,C7,A8,C9,D10,C11,C12,B13,D14,C15,C 二,名词解释(每题2分,共20分)1,严格地说是指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达质粒载体DNA分子的生命过程 2,质粒不亲和性:在没有选择压力的情况下,两种不同质粒不能够在同一宿主细胞系中稳定地共存的现象.3,cDNA文库:是指某生物某一发育时期所转录形成的
7、cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合.4,RACE:是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术,是以mRNA为模板反转录成cDNA第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点到3,或5,端之间未知序列的方法.5,基因文库:通过克隆方法保存在适当宿主中的某种生物,组织,器官或细胞类型的所有DNA片段而构成的克隆集合体.6,RT-PCR:先用逆转录酶作用于mRNA,以寡聚dT为引物合成cDNA第一链,然后用已知一对引物,扩增嵌合分子,这种方法称为逆转录PCR7,载体:指基因工程中携带外源基因进入受体细胞的运载工具,它的本质是DNA复制子
8、.8,S-D序列:在大肠杆菌mRNA的核糖体结合位点上,含有一个转译起始密码子及同16S核糖体RNA3,末端碱基互补的序列,该序列最初由Shine,Dalgarno发现,故后来命名为Shine—Dalgar
