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1、血细胞分析在临床中的应用血细胞分析的发展近年来,随着科学技术的飞速发展及计算机在血液分析仪中的广泛应用,各种先进的血液分析仪逐渐普及.1953年，第一台血细胞计数仪问世，标志着这一项目抛弃了作坊式手段；1913-1998ModelAHighspeedautomaticbloodcellcountandcellsizeanalyzer原理血液分析仪主要是利用阻抗原理进行细胞计数的.不同体积的血细胞,因其电阻大小不同,而产生相应大小的脉冲,分别进入到仪器设置的不同通道CBC(全血细胞计数)+DIFF(WBC分类)模式下WBC计数分类WBC/DIFF通道对WBC计数和分类时,使用的
2、两个信号:细胞经半导体激光激发产生侧向荧光强度侧向散射光强度信号使用的两种试剂:溶血素(4DL):将RBC完全溶解,同时在WBC膜表面打孔荧光染料(4DS,聚次甲基荧光染料)通过小孔进入WBC内,对胞浆和胞核中的核酸物质进行染色测定经过核酸荧光染色后的WBC在633nm激光的照射下,产生侧向荧光信号和侧向散射光信号。侧向荧光强度与WBC的核酸(DNA/RNA)含量成正比,侧向散射光强度反映了细胞内容物的复杂程度(核的分叶,胞浆颗粒的大小,数量,分布均匀程度)。123459鞘流技术激光计数原理示意图1流通池2梭头3样本头4鞘流头5透镜6吸收光7低角度散射光检测8高角度散射光检测
3、9光源876SideScatter(Internalstructure)淋巴细胞单核细胞嗜中性细胞嗜酸细胞Fluorescence(RNA,DNA)RBCghost嗜碱细胞RBC和PLT检测原理全血标本稀释后分配到RBC/PLT计数池,鞘流技术产生的层流使这个电阻信号转化为脉冲信号记录下来,脉冲的高度反映了细胞的大小,每个脉冲信号代表一个细胞,收集信号得到RBC和PLT的直方图。SLS血红蛋白检测方法检测使用的主要成份为十二烷基磺酸钠表面活性剂先将RBC溶解，释放出Hb分子Hb分子中的Fe2+被氧化为Fe3+，与SLS结合形成SLS-Hb有色基团，在535nm有最大吸收峰。S
4、LS血红蛋白检测方法特点不含氰化物，无毒具有环保性SLS是一种脂溶性试剂，可减少脂血和高WBC总数造成的浊度对血红蛋白检测的影响数据异常信息中性粒细胞增多感染（急性细菌感染）组织损伤（心肌梗塞.手术）恶性血液病药物使用(肾上腺素.类固醇)生理性增高淋巴细胞增多恶性血液病感染(百日咳.传单.病毒性风疹)应激状态(急性心衰.心脏梗塞.过敏反应)自身免疫性疾病.肿瘤.吸烟单核细胞增多感染(细胞性.败血症)胶原病妊娠性WBC增多霍奇金氏病恶性肿瘤嗜酸性细胞增多过敏反应(药物.寻麻疹)寄生虫病皮肤病纤维瘤内分泌病感染(结核病)中性粒细胞减少严重的细菌感染白血病.肿瘤骨髓转移药物血液恶液
5、质过敏性休克.酒精中毒淋巴细胞减少流行性感冒.败血病药物(抗肿瘤药物.肾上腺皮质激素)肿瘤晚期.霍奇金氏病胶原性疾病(系统性红斑狼疮.类风湿性关节炎)干扰因素造成假性增高(降低)WBC假性增高PLT聚集冷凝集有核红细胞难溶红细胞冷球蛋白PLT假性增高红细胞碎片小红细胞冷白蛋白PLT假性降低血小板聚集巨大血小板RBC假性增高白细胞增多巨大血小板RBC假性降低红细胞碎片冷凝集小红细胞急性粒细胞白血病Auer小体出现原始粒细胞DIFF散点图显示:淋巴细胞.单核细胞和原始细胞区域出现大量散点且连成一片,大部分原始细胞由于异常增殖含有过多的DNA/RNA出现异常淋巴细胞散点图显示:有大
6、量的异常淋巴细胞,荧光强度较弱而侧向散射光强度稍强RBC双峰分布表示出现大小不同的两群红细胞缺铁性贫血诊断与铁剂治疗后 直方图动态变化-疗效观察铁剂治疗2周后铁剂治疗4周后特发性PLT减少性紫癫(ITP)PLT直方图分布上,在40fl附近出现一个高峰,提示有大型PLT,因此反映细胞大小的直方图无法将PLT准确检测出来,许多大的PLT被计数成RBC需要镜检的情况、国际血液学复检专家组推荐的41条自动CBC和DC复检规则：1.新生儿：（1）复检条件：首次检测标本；（2）复检要求：涂片镜检。2.WBC、RBC、Hb、PLT、网织红细胞（Ret）：（1）复检条件：超出线性范围；（2）
7、复检要求：稀释标本后重新测定。3.WBC、PLT：（1）复检条件：低于实验室确认的仪器线性范围；（2）复检要求：按实验室标准操作规程（SOP）进行。4.WBC、RBC、Hb、PLT：（1）复检条件：无结果；（2）复检要求：①检查标本是否有凝块，②重测标本，③如果维持不变，用替代方法计数。5.WBC：（1）复检条件：首次结果<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。6.WBC：（1）复检条件：3天内Delta值超限，并<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2
