浅析影响胎牛血清质量的几大因素.doc

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1、浅析影响胎牛血清质量的几大因素浅析影响胎牛血清质量的几人因索关键词：胎牛血清内毒素2011-07-1500:00來源：互联网点击次数：5421市场上的胎牛血清种类繁多，鱼龙混杂，很多科研T作者，特别是刚接触细胞培养的人，难以分辨血清质量的优劣。木人根据十多年來血清生产销售的经验，总结如下：一、外观拿到血清，最先接触的是血清外观，对于缺少细胞培养经验的人來说，外观的判断尤为重要1、颜色根据血红蛋门含暈的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上，血红蛋门含暈的高低对血清并无直接彫响，这个指标的意义在于能体现岀采血过程的严谨规范程度，良好

2、的操作能降低血清的溶血。国产血清的采血点很分散，人多是由屠户采血后马上离心收集，所以很少会有溶血，表现出明亮的蜡黄色，当然，国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。进口胎牛血清或多或少总有点溶血，因为真正的胎牛血清凝血功能差，红细胞容易破裂。总的來说，国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清，质量最好的呈现出谈黄、微红色，如Gibco16000,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然，热灭活血清或保存不当的血清，由于血红蛋白的破坏氧化，会呈现出喑红，甚至咖啡色。2、沉淀很多血清客户，会发现进口血清育沉淀，从而怀疑血清的质暈问题，这是没有根据的。血清小的沉淀是由纤维蛋门的凝聚产生，对血清质量没有任

3、何彫响，沉淀的产生原因很多，和厂家的加工生产方式密切相关。国产的血清，人多來自北方，由于价格低廉，保存坏境都不好，从采血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程，就会析出部分纤维蛋「I沉淀,这样，血清成品过滤后看起來反而史加的“干净”，很少有沉淀产生。进口的胎牛血清，过滤分装前很少会反复冻融，生产后的成品也是清澈的，但随着时间的推移，血清屮的人量纤维蛋门会析出形成沉淀。当然，进口的新生牛血清，-•般牛龄都在2周左右，血清小的各种蛋门含量明显偏高，生产后血清可能会浑浊，其至有人量沉淀。当然，购买冋來的血清都是冰冻状态，使川时需要融化，融化过程最好在温度较低的状态下慢慢进行，否

4、则沉淀相对较多，虽然沉淀并不肓接影响血清的质量，但对细胞的显微观察有一定的阻碍。3、澄清度进口胎牛血清由于蛋门和脂类等物质含量低，表现为稀薄、清淡，而国产血清，因为绝大多数是新生牛血清，相对而言史加粘稠，颜色略深，这对于初步接触血清的人很难判断，但把两考进行对比，可容易分辨。二、主要技术指标日前国内血清的质暈标准是2005版的《屮华人民共和国药典》,主要指标有以下几占•1、内毒索标准为不高于SEU/mlo内毒索是细菌破碎后细胞壁的成分，因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程屮的无菌操作情况。日前，国产血清基木都能达到这一要求，很多进口胎牛血清内毒素含量反而史高，如Gib

5、co26140,只要求不高于50EU/ml,高出我国标准10倍,即使是16000,也要10EU/ml,jfll.清质量也未见影响。可见，内毒素含量偏高不影响质量，除非含量极高，预示着已经污染。2、总蛋白含量胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高，说明采血的牛龄偏人，不是胎牛，数值偏低，表明血清可能掺水了。3、血红蛋白标准为不高于20mg/dl,颜色越红，数值•越高，反之，数值越低。4、pH国产血清，人多高于7.5,进口胎牛血清，人多低于7.5,具体原因未知，可能和牛龄有关，这也能用來初步鉴别血清的來源。5、微生物包括细菌、霧菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。随着国内

6、血清厂家生产条件的改善提高，细菌、霉菌等“大型”微生物儿乎能100%控制，支原体经过0.Im过滤,人多也能清除。人肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的，主要是生产环境过程屮带入，又无法过滤，很难彻底清除，但对血清质量彩响不人。病原性病毒，特别是BVDV,在国产血清小几乎90%以上都存在，这类微生物是影响国产血清质量的重要因索之一，而进口胎牛血清中基本都控制的很好。6、免疫球蛋门国产血清的只是定性检测，结果也很不准确，进口胎牛血清人多定量检测。免疫球蛋门的数值能完全体现出采血的时的牛龄情况，国产血清，基木都是新生牛的，血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,

7、IgG的含量也较低。7、其它不管是国产还是进口血清，都是不测抗生素的（无四环素胎牛血清除外）。国外，抗生素的使川很严格，川量也很少，每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量极低；国内，抗生素的滥用已成了普遍现象，血清屮残留很高，对细胞培养极为不利，这是国产血清质量差的根本原因。三、血源Tlj场上的血清血源主要分为小国、北美、南美和澳洲。1、国产血清质量差，这是公认的，主要原因并不是生产厂家的责任，而是天然坏境差和抗生索的人景使用。国内环境污染严重