DB52T 604-2010 马铃薯原原种生产技术规程.pdf

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1、ICS65.020.01DB52贵州省地方标准DB52/T604—2010马铃薯原原种生产技术规程2010-06-24发布2010-07-01实施贵州省质量技术监督局发布DB52/T604-2010前言本标准的附录A是资料性附录。本标准由贵州省农业委员会提出并归口。本标准由贵州省种子管理站、贵州省马铃薯研究所、贵州省扶贫技术指导中心、贵州省农技总站负责起草。本标准主要起草人：施文娟、黄萍、宋耀、苏跃、杨恩琼、颜谦。I学兔兔www.bzfxw.comDB52/T604-2010马铃薯原原种生产技术规程1范围本标准规定了马铃薯脱毒苗和原原种的生产技术。本标

2、准适用于马铃薯原原种的生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB18133马铃薯脱毒种薯NY/T1212—2006马铃薯脱毒种薯繁育技术规程NY/T401—2000脱毒马铃薯种薯（苗）病毒检测技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1外植体用于马铃薯茎尖培养的幼芽段。3.2培养基一种人工配制的、适合培养材料生长繁殖的混合养料。主要由一定比例的无机盐、有机物、蔗糖、植物生长调节剂组成，其中不加凝固剂呈液

3、态的培养基质称为液体培养基，加入凝固剂呈固态的培养基质称为固体培养基。3.3消毒一种采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分有害病原菌，而对被消毒物体基本上无害的措施。3.4灭菌采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施，如各种高温灭菌技术措施等。3.5扩繁给予合适的培养条件，在人工配制的培养基上、短期内繁殖出大量新植物体的技术。3.6脱毒1DB52/T604-2010应用茎尖分生组织培养技术，脱去主要危害马铃薯的病毒及类病毒。3.7脱毒试管苗应用茎尖分生组织培养技术获得的再生试管苗，经检测确认不带马铃薯X病毒（

4、PVX）、马铃薯Y病毒（PVY）、马铃薯S病毒（PVS）、马铃薯卷叶病毒（PLRV）、马铃薯M病毒（PVM）和马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVd）的试管苗。3.8原原种用脱毒试管苗或种子在防虫网室、温室条件下生产的符合质量标准的微型薯。4脱毒试管苗建立4.1薯块选择选择田间生长势强、健壮、具有该品种典型特征的植株块茎进行脱毒。4.2外植体选择选择无病虫、生长健壮的幼芽，切取带生长点的茎段2.0cm～3.0cm，用自来水冲洗干净。4.3茎尖剥离将表面冲洗干净的外植体置于超净工作台上，先用70%的酒精表面消毒10s，用2%的次氯酸钠溶液消毒10min～15m

5、in后，无菌水冲洗3次～5次，置于无菌滤纸上吸去水分。将消毒好的外植体置于超净工作台上的双目解剖镜下，用解剖针轻轻剥去外植体上的未展开小叶至露出茎尖生长点，在1个～2个叶原基（大小0.2cm～0.4mm）处用解剖刀小心地将其切下，茎尖向上、切面向下置于试管或三角瓶内的茎尖诱导培养基上（配方见本标准资料性附录A），封口、编号。4.4茎尖组织培养将马铃薯茎尖置于温度22℃±2℃、光照强度2000Lx～3000Lx、每日光照12h～16h的光照培养箱或培养室，培养，茎尖经生长分化即可形成具2片～4片展开叶的试管苗。4.5试管苗的病毒检测参照NY/T401—2

6、000，采用双抗体夹心酶联免疫法（Dot—ELISA）对各试管苗株系的PVX、PVY、PVS、PLRV和PVM病毒进行检测，不带以上5种病毒的试管苗即为脱毒试管苗。5脱毒试管苗的扩繁5.1试管苗的扩繁在超净工作台上，将形成6片～10片叶的马铃薯脱毒试管苗进行切段，每段留1片叶，叶面朝上插在固体增殖培养基上（配方见本标准资料性附录A），于培养箱或培养室内培养。5.2脱毒试管苗扩繁的培养条件温度22℃±2℃，光照强度2000Lx～3000Lx，每日光照12h。2DB52/T604-20105.3脱毒试管苗检测马铃薯脱毒试管苗扩繁过程中的检测参照GB1813

7、3中的5.1.2执行。6原原种的生产6.1网棚构建参照NY/T1212—2006中的9.3.6执行。6.2基质配方参照NY/T1212—2006中的9.2执行。6.3基质消毒在组培苗移栽前2Od，用土壤消毒剂（如100倍福尔马林水溶液，按5kg／667㎡）对基质进行细菌和真菌消毒。6.4移栽苗的筛选选择具4片～7片叶、株高5cm～8cm、根长1.5cm～2.0cm的组培苗用于网棚内移栽。6.5试管苗的棚内移栽按照要求选取马铃薯脱毒试管苗，洗去根部培养基后移栽至大棚中，移栽密度是5cm×5cm～10cm。6.6遮荫保湿移栽前苗床浇透水保持充分湿润，移栽后

8、搭小拱棚并加遮阳网保湿遮阴。中途无需浇水，待苗形成新根后可拆除小拱棚及遮阳网。6.7肥水管理据