DB32T 1659-2010 杏鲍菇菌种生产技术规程.pdf

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1、ICS67.080B05备案号:DB32江苏省地方标准DB32/T1659—2010杏鲍菇菌种生产技术规程TechnicalrulesofPleurotusEryngiipurecultureproduction2010-10-12发布2010-12-12实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T1659—2010前言为了实现杏鲍菇菌种生产技术规范化,确保菌种质量,维护菌种生产者、经营者和使用者的合法权益,特制定本标准。本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》编写。本标准由江苏江南生物科技

2、有限公司提出。本标准由江苏江南生物科技有限公司起草。本标准主要起草人:姜建新、马一鸣、姜小红、姜雅、荆琴芳。IDB32/T1659—2010杏鲍菇菌种生产技术规程1范围本标准规定了杏鲍菇菌种生产的场地环境、设施设备、生产技术、标识、包装、运输及贮存。本标准适用于江苏省行政区域内生产、经销、使用的杏鲍菇母种、原种和栽培种。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志GB5

3、749生活饮用水卫生标准GB15569农业植物调运检疫规程NY5099食用菌栽培基质安全技术要求NY/T528食用菌菌种生产技术规程3场地环境3.1应选择地势高燥、排水畅通、通风良好、交通便利的地方建造菌种场。3.2菌种场应远离有“三废”污染的工厂、生活区、禽畜养殖场等。3.3应选用清洁水源,水质符合GB5749规定。3.4生产场地环境卫生及其他条件符合NY/T528的规定。4设施设备4.1基本设施具备控温控湿条件的冷却室、接种室、培养室和贮存室。4.2基本设备磅秤、天平、高压灭菌锅或常压灭菌锅、操作台、超净工作台或接种箱、

4、空调、除湿机、培养架、恒温箱、冰箱、显微镜等。生产量大的菌种厂还应配备搅拌机、装瓶装袋机。5生产技术5.1母种生产5.1.1培养基PDA培养基或PSA培养基5.1.2培养基制作1DB32/T1659—20105.1.2.1分装将配制好的PDA培养基或PSA培养基分装至符合NY/T528规定的Φ18㎜×180㎜或Φ20㎜×200㎜的玻璃试管中,装量为试管长度的1/3左右。试管口应保持干净,随后塞入棉塞或硅胶塞,并用牛皮纸包扎。5.1.2.2灭菌将分装和包扎好的试管直立放在高压灭菌锅内加热灭菌。加热到0.05MPa时,打开排气阀

5、,排尽锅内空气,待压力指针回到零点后,关闭排气阀。重复操作两次。当压力升到0.1MPa(温度为121℃)时,维持30min后停止加热,待指针回到零点,再打开锅盖。5.1.2.3斜面培养基制作从灭菌锅内取出试管,当试管冷却到60℃左右时,趁热将试管倾斜摆放在操作台桌面上,试管口比试管底部高1.0㎝~1.5㎝,做成培养基斜面,斜面长度为试管长度的2/3。5.1.2.4灭菌效果检查将灭菌后的培养基置于30℃±2℃条件下1d~2d检查有无细菌或霉菌的菌斑。5.1.3消毒与接种5.1.3.1消毒3将接种用具、培养基放到接种箱或超净工作

6、台内。接种箱应用气雾消毒剂消毒,用量5g/m;有紫外线灭菌灯的,同时开启照射30min。超净工作台使用前应开机30min预热。5.1.3.2接种消毒后进行接种。接种人员要注意清洁卫生,穿戴上经消毒过的工作服、工作帽、口罩,按无菌操作要求,手部和试管菌种表面应用医用酒精消毒。将接种用具用酒精灯进行火焰灭菌,放于箱内支架上冷却后备用。在酒精灯火焰四周的无菌区进行接种操作。开始接种时,左手同时握着转接母种和待接斜面培养基,试管口置于酒精灯火焰上方3㎝处的无菌区,用右手迅速分别拔开试管棉花塞,并用接种钩在转接母种试管中挑取绿豆粒大小

7、的菌种体迅速转接到待接斜面培养基内。接种位置为培养基斜面前端1㎝处,且菌种体菌丝面朝上。接种后迅速塞上棉花塞。将接种好的斜面培养基用牛皮纸包扎试管口,并贴标有菌号和接种日期的标签。标签粘贴位置为距试管口8㎝处。5.1.4培养将接种后的试管置于20℃~28℃培养箱或培养室恒温培养8d~10d,当菌丝长满试管斜面,即可用于生产原种。5.2原种生产5.2.1培养基要求应符合NY5099的规定。5.2.2培养料配方配方1:棉籽壳87%、麸皮10%、蔗糖1%、生石灰1%、石膏1%,料水比1:(1.2~1.3)。配方2:棉籽壳50%、木

8、屑30%、麸皮17%、蔗糖1%、石膏1%、生石灰1%,料水比1:(1.2~1.3)。配方3:玉米芯50%、木屑33%、麸皮15%、石膏1%、生石灰1%,料水比1:(1.2~1.4)。2DB32/T1659—20105.2.3拌料按配方比例称取原料,按料水比加水进行人工或机械搅拌。5.2.4

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