桑黄技术规范 第1部分:桑黄菌种制作技术规范.pdf

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1、ICS中国标准文献分类号团体标准T/ASJ000-2020桑黄技术规范第1部分:桑黄菌种制作技术规范TechnicalspecificationofSanghuangporusbaumiiPart1:TechnicalspecificationforcultureproductionofSanghuangporusbaumii2020-*-*发布2020-*-*实施安徽省食用菌技术协会发布T/****.1—2020前言本部分根据GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》规定的规则编写。T/****—2019《桑黄技术规范》分为4个部

2、分:——第1部分:桑黄菌种制作技术规范;——第2部分:桑黄菌棒制作技术规范;——第3部分:桑黄栽培技术规范;——第4部分:桑黄质量要求。本部分为T/****第1部分。本标准由安徽省食用菌技术协会提出并归口。本标准起草单位:金寨尚臻生物科技有限公司、安徽省食用菌技术协会。本部分主要起草人:陆本坤、秦绍新、王琨、许鹏飞、左松、赵文静、魏新宇。T/****.1—2020桑黄技术规范第1部分:桑黄菌种制作技术规范1范围本标准规定了桑黄栽培过程中菌种制作的术语和定义、菌种制作的要求。本标准适用于桑黄各级菌种的制作。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

3、凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB5749生活饮用水卫生标准GB26373乙醇消毒剂卫生标准NY/T1284食用菌菌种中杂菌及害虫的检验3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1母种经各种方法选育得到的具有结实性的桑黄菌丝纯培养物及其继代培养物,以玻璃试管、培养皿为培养容器和使用单位,也称为一级菌种、试管种。3.2原种由母种移植、扩大培养而成的载有桑黄纯菌丝的培养基,也称二级菌种,常以塑料菌种瓶(750ml)或12cm24cm聚丙烯塑料袋为容器。3.3栽培种由原种

4、移植、扩大培养而成的载有桑黄纯菌丝体的培养基,也称三级菌种。常以12cm24cm聚丙烯塑料袋为容器。栽培种只能用于生产栽培,不可再次扩大繁殖菌种。4菌种制作4.1菌种的来源应使用经专业机构鉴定的锈革孔菌科桑黄孔菌属真菌鲍姆纤孔菌Sanghuangporusbaumii(Pilat)L.W.Zhou&Y.C.Dai。4.2生产用水应符合GB5749的要求。4.3乙醇消毒剂应符合GB26373的要求4.4母种制作T/****.1—20204.4.1工艺流程培养基配制→分装→灭菌→冷却→无菌检验→接种→培养→检验→母种。4.4.2容器使用18mm180mm或2

5、0mm200mm的玻璃试管,试管塞采用棉塞或硅胶塞。4.4.3培养基按照附录A规定进行配制。4.4.4分装将配制好的培养基立即分装,装量为试管长度的1/5左右,试管口保持洁净,塞入试管塞,使用牛皮纸包扎。4.4.5灭菌将包扎好的试管直立放在高压灭菌锅中灭菌,灭菌条件121℃,115kPa,30min。4.4.6冷却灭菌结束后,趁热将试管摆放在操作台面上,斜面长度为试管的2/3。4.4.7无菌检验按3%~5%随机抽取斜面试管、置于28±1℃恒温培养48小时,无微生物长出的为灭菌合格。4.4.8菌种制备4.4.8.1菌株分离挑选生长两年左右、长势良好、形状规则

6、桑黄子实体做为种菇,用体积分数75%的酒精浸泡五分钟后放置在洁净的培养皿中,点火灼烧至酒精燃烧完毕,将解剖刀在酒精灯上灼烧消毒,然后在桑黄子实体表面划一圈,深度1~2cm,沿刀口掰开子实体,将解剖刀在酒精灯上灼烧消毒,冷却后挑取桑黄中心部位,切成3mm3mm小块后用接种针取一块接种于斜面试管,28℃培养15~20天,待菌丝布满培养基,选取无杂菌试管菌株。4.4.9转管培养选取菌丝茁壮、长势优良的斜面试管,用接种针挑取10mm10mm的菌块,按无菌操作要求,转接到新的试管培养基中,置于28±1℃的培养箱中培养15~20天,当菌丝长满试管斜面,即得母种,可用

7、于生产原种。4.4.10菌种检查接种48h后应做首次检查,挑拣出未萌发或受污染者。母种菌落长至直径约2cm左右时,进行第二次检查,长满前再检查一次,检出污染或生长不良的菌种。按照NY/T1284的规定进行检查。4.5原种、栽培种制作4.5.1工艺流程T/****.1—2020培养基配制→装袋(瓶)→灭菌→冷却→接种→培养→检查→原种(栽培种)。4.5.2容器使用12cm24cm聚丙烯塑料袋或耐126℃高温的塑料菌种瓶。4.5.3培养基按照附录B规定进行配制。4.5.4装袋(瓶)、灭菌4.5.4.1每袋(瓶)装料350g~500g,保证装料松紧度的一致,压紧

8、料面,中央打孔,套上无棉盖体。4.5.4.2灭菌培养

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