艾篙挥发油体内外抑菌作用实验探究.doc

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1、艾篙挥发油体内外抑菌作用实验探究【摘要】目的:对艾篙挥发油进行体外抑菌作用和体内保护作用进行的实验研究,检测艾篙挥发油体内外抑菌效果。方法:并以红霉素为对照采用琼脂培养基(Mue-Hinton)二倍稀释法对艾篙挥发油的最低抑菌浓度(MIC)检测;通过对感染小鼠进行试验性治疗来检测致死保护率。结果:艾篙挥发油对实验菌的MIC90值范围0.78-25uL/mL;对对金葡萄球菌感染小鼠致死保护率20%-50%,对绿脓杆菌感染小鼠死亡的保护率30%-40%,对大肠杆菌感染小鼠死亡的保护率20%-40%。结论:艾篙

2、挥发油体外对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌具有抑菌作用,其抑菌作用优于或等同于红霉素;体内对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌感染小鼠具有较好的保护作用。【关键词】艾篙挥发油;最低抑菌浓度;体外抑菌;体内保护【中图分类号】R-3【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2010)10-042-2菊科多年生植物艾篙Artemisiaargyilevel.etVant.的干燥叶作为中草药,可以就地取材,有较高的药用价值和悠久的应用历史。传统药性理论认为艾篙具有理气血、逐寒湿、温经血、安胎、杀虫止痒等

3、作用。现代医学的药理研究表明,艾篙挥发油是一种广谱的抗菌抗病毒药物,它对细菌和病毒具有抑制和杀伤作用,对呼吸系统疾病有一定的防治作用。艾篙味芳香、苦燥辛散,能理气血、温经脉、逐寒湿、止冷痛,为妇科良药。可用于治疗院腹冷痛,经寒不调,宫冷不孕等症;炒炭止血,可用于治疗虚寒性月经过多,崩漏带下,妊娠胎漏;艾篙捣绒,制成艾条、艾柱,外灸能散寒止痛,温煦气血;煎汤外洗可治湿疮疥癣,祛湿止痒。艾篙化学成分含挥发油0.45%-1.00%,是艾篙抗菌作用的重要成分。油中主要为:一松油醇、8-按叶精、a—侧柏酮(a-th

4、ujone)、a—水芹烯(a-pHellandrene),B~T香烯(B-caryopHyllene),茨烯、樟脑、藏茵香酮、反式苇醇(transcarveol)o为了将艾篙更方便、科学地应用于临床,我们提取艾篙挥发油,进行了体外抑菌作用和体内保护作用的研究。1实验材料1.1药物艾篙购于安徽中医学院第一附属医院药房;红霉素片,石药集团欧意药业有限公司出品,批号50404010c1.2菌种金黄色葡萄球菌10株(含标准菌株ATCC25923).大肠杆菌10株(含标准菌株ATCC25922).绿脓杆菌10株,由

5、本院微生物教研室提供。1.3培养基琼脂培养基(Mue-Hinton),上海东海医化试剂公司生产,批号0010320c1.4动物昆明种小鼠,体重(20i2)g,清洁级,安徽医科大学动物中心提供。1.5艾篙挥发油制备取艾篙适量,装入5000mL的蒸溜瓶中,加水浸泡lh,加水量不得超过3500inLo按《中国药典》2000版(一部)附录XD水蒸气蒸馆法提取挥发油。馆出物含有少量水。加氯化钠少许,置冰箱冷藏24h,使水、油两相分层,再用分液滤斗进行分离,滤得绿色透明的、具有浓郁芳香气味的液体,即艾篙挥发油。2方法

6、与结果2.1体外抑菌作用2.1.1供试菌液的制备将各供试菌种分别接种于供试培养基中,37*培养24h,选用标准菌落接种于液体培养基中培养6h,调整菌液浓度为108CFU/mL,备用。2.1.2含药物培养基的制备将试验品及对照品分别加入培养基中做2倍稀释,艾篙挥发油(uL/nil)和红霉素(pg/mL)最终浓度依次为200,100,50,25,12.5,6.25,3.12,1.56,0.78,同时设空白对照。2.1.3供试菌接种用接种环分别取供试菌液一环(含菌量约为104CFU),分别接种于含艾篙挥发油的培

7、养基上和含红霉素的培养基上,371培养24h,观察试验结果。艾篙挥发油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌有显著的抑菌作用;其抑制金黄色葡萄球菌的效果等同于红霉素,抑制大肠杆菌、绿脓杆菌的效果大大优于红霉素。结果见表1。表1艾篙挥发油和红霉素对实验菌MIC测定结果物(N二10)实验组MIC红霉素(ug/mL)艾篙挥发油(uL/mL)大肠杆菌MIC5012.500.78MIC902000.78金黄色葡萄球菌MIC500.780.78MIC900.780.78绿脓球菌MIC501000.312MIC90100

8、25注:MIC50,MIC90分别为抑制50%,90%所试菌株的MIC值2.2体内保护试验2.2.1菌液及药液稀释将3种菌的原菌液用5%高活性干酵母液稀释(增强细菌的毒力)至所需浓度,测出试验菌株的100%最小致死量(MLD)o药液以2%吐温-80为溶剂,艾篙挥发油稀释浓度为120,80,40ug/mL3种溶液。表2艾篙挥发油对金葡萄球菌感染小鼠死亡的保护作组别剂量感染菌量死亡数死亡率(%)死亡保护率Ml/(kg.d)MLD/

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