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1、第42卷第9期2012年9月中国海洋大学学报PERIODICALOFOCEANUNIVERSITYOFCHINA42(9):028~034Sept.,2012盐度突变对凡纳滨对虾渗透调节中血蓝蛋白和糖酵解影响的初步研究+李英1’2,王芳P,赵卓英3,董双林1(1.中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室,山东青岛266003;2.北京市水产技术推广站,北京100021;3.国家海洋标准计量中心,天津300112)摘要:实验室条件下测定盐度突变对凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)血淋巴渗透压、血蓝蛋白、血糖
2、、己糖激酶(HK)以及丙酮酸激酶(PK)活力的影响。以蜕皮间期对虾为实验材料(初始湿体重为(2.485+_O.303)g),设盐度30为对照组,4个不同的盐度突变幅度(为2、4、6、8)为处理组(用S2、s4、S6和s8表示),于降低盐度和恢复盐度至30的不同时间点采样,实验持续7d。结果表明:(1)凡纳滨对虾血淋巴渗透压会随盐度变化而变化,s4组对虾血淋巴含量在整个实验过程中处于较低水平;(2)随着盐度突变幅度的增加,血蓝蛋白含量与对照组呈现显著性差异(P3、中一直处于较低水平,而S6、S8组对虾血糖含量相对较高;(4)整个实验过程中,S4组对虾肝胰脏中HK活力处于较低水平。而S6与S8组对虾肝胰脏中HK活力处于较高水平;(5)S2、S4组对虾肝胰脏中PK活力与对照组没有显著性差异(P4、雨或者持续干旱等原因,养殖水体的盐度经常发生突变,进而影响对虾的蜕皮和生长。在实际养殖生产过程中,也有部分养殖户采用换水或添加淡水的方式来刺激对虾蜕皮[i-2]。但是在盐度改变后,对虾渗透压变化情况和所需能量是如何提供等问题尚需进一步研究。此前,水生甲壳动物的渗透调节机制一直是国内外学者研究的热点。众多学者在渗透调节器官的形态结构,离子转运酶和血淋巴渗透压调节以及神经内分泌调控等方面作了大量的研究工作[3曲],并取得了许多重要的研究成果,而有关甲壳动物渗透调节中能量代谢,特别是生物体的首要能源糖及其有关的代谢酶活力变化5、的研究则相对较少。本文以我国主要的海水养殖虾类之一凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)为实验材料,并根据之前关于盐度突变对对虾蜕皮影响的研究[10-133选择4个不同的盐度突变水平,测定对虾血淋巴渗透压、血蓝蛋白、血糖及其糖酵解反应过程中的己糖激酶(Hexokinase,HK)和丙酮酸激酶(Pyruvatekinas,PK)活力的变化,以期为深入了解甲壳动物渗透调节过程中糖代谢的变化提供基础数据。1材料与方法1.1实验虾的来源与驯化凡纳滨对虾购自青岛市郊养虾场,体长3~5cm,为健康活泼的个体。对虾运回6、实验室后,在室内(25±o.5)℃下驯养2周,使之适应实验室的条件。驯养期间每天于7:00和17:30定时投喂“海马牌”人工配合饲料2次,驯养期间的光照周期为L:D一14:10。实验前对虾饥饿24h,并参照S.M.Chan等方法[14]将蜕皮间期的对虾挑出,备用。1.2实验设计实验设盐度30为对照组(IgC表示),4个不同的盐度波动幅度(分别为2、4、6、8)为处理组,分别用S2、S4、S6和S8表示(以S4组为例的盐度突变模式见图1),每个处理组设置5个水槽作为平行。每个处理组从驯化槽中选取100尾个体相近、体色透明7、、处于蜕皮问期的凡纳滨对虾,将其放人5个实验水槽(300cm×150crux80cm)中进行实验。实验用水的初始盐度为30,分别在实验开始前(0h)、降低盐度后3、6、12、24、48、72和96h及恢复盐度至30后的3、6、12、24、48和*基金项目:国家重点基础研究发展计划项目(2009CBll8706);国家科技支撑计划项目(2011BADl3803)资助收稿日期:2011一05—13;修订日期:2012—03—15作者简介:李英(1984一),男,硕士。E—mail:Liy.1210@yahoo.COIn.c8、n*_通讯作者:E-mail:wanglan9249@OUC,edu.cn9期李英,等:盐度突变对凡纳滨对虾渗透调节中血蓝蛋白和糖酵解影响的初步研究72h取样。每个取样时间点取5尾对虾,每尾对虾作为1个样本,分别测定对虾血淋巴渗透压、血蓝蛋白、血糖及肝胰脏中己糖激酶活力和丙酮酸激酶活力。实验所需低盐度海水为盐度30的砂滤海水和经曝
3、中一直处于较低水平,而S6、S8组对虾血糖含量相对较高;(4)整个实验过程中,S4组对虾肝胰脏中HK活力处于较低水平。而S6与S8组对虾肝胰脏中HK活力处于较高水平;(5)S2、S4组对虾肝胰脏中PK活力与对照组没有显著性差异(P4、雨或者持续干旱等原因,养殖水体的盐度经常发生突变,进而影响对虾的蜕皮和生长。在实际养殖生产过程中,也有部分养殖户采用换水或添加淡水的方式来刺激对虾蜕皮[i-2]。但是在盐度改变后,对虾渗透压变化情况和所需能量是如何提供等问题尚需进一步研究。此前,水生甲壳动物的渗透调节机制一直是国内外学者研究的热点。众多学者在渗透调节器官的形态结构,离子转运酶和血淋巴渗透压调节以及神经内分泌调控等方面作了大量的研究工作[3曲],并取得了许多重要的研究成果,而有关甲壳动物渗透调节中能量代谢,特别是生物体的首要能源糖及其有关的代谢酶活力变化5、的研究则相对较少。本文以我国主要的海水养殖虾类之一凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)为实验材料,并根据之前关于盐度突变对对虾蜕皮影响的研究[10-133选择4个不同的盐度突变水平,测定对虾血淋巴渗透压、血蓝蛋白、血糖及其糖酵解反应过程中的己糖激酶(Hexokinase,HK)和丙酮酸激酶(Pyruvatekinas,PK)活力的变化,以期为深入了解甲壳动物渗透调节过程中糖代谢的变化提供基础数据。1材料与方法1.1实验虾的来源与驯化凡纳滨对虾购自青岛市郊养虾场,体长3~5cm,为健康活泼的个体。对虾运回6、实验室后,在室内(25±o.5)℃下驯养2周,使之适应实验室的条件。驯养期间每天于7:00和17:30定时投喂“海马牌”人工配合饲料2次,驯养期间的光照周期为L:D一14:10。实验前对虾饥饿24h,并参照S.M.Chan等方法[14]将蜕皮间期的对虾挑出,备用。1.2实验设计实验设盐度30为对照组(IgC表示),4个不同的盐度波动幅度(分别为2、4、6、8)为处理组,分别用S2、S4、S6和S8表示(以S4组为例的盐度突变模式见图1),每个处理组设置5个水槽作为平行。每个处理组从驯化槽中选取100尾个体相近、体色透明7、、处于蜕皮问期的凡纳滨对虾,将其放人5个实验水槽(300cm×150crux80cm)中进行实验。实验用水的初始盐度为30,分别在实验开始前(0h)、降低盐度后3、6、12、24、48、72和96h及恢复盐度至30后的3、6、12、24、48和*基金项目:国家重点基础研究发展计划项目(2009CBll8706);国家科技支撑计划项目(2011BADl3803)资助收稿日期:2011一05—13;修订日期:2012—03—15作者简介:李英(1984一),男,硕士。E—mail:Liy.1210@yahoo.COIn.c8、n*_通讯作者:E-mail:wanglan9249@OUC,edu.cn9期李英,等:盐度突变对凡纳滨对虾渗透调节中血蓝蛋白和糖酵解影响的初步研究72h取样。每个取样时间点取5尾对虾,每尾对虾作为1个样本,分别测定对虾血淋巴渗透压、血蓝蛋白、血糖及肝胰脏中己糖激酶活力和丙酮酸激酶活力。实验所需低盐度海水为盐度30的砂滤海水和经曝
4、雨或者持续干旱等原因,养殖水体的盐度经常发生突变,进而影响对虾的蜕皮和生长。在实际养殖生产过程中,也有部分养殖户采用换水或添加淡水的方式来刺激对虾蜕皮[i-2]。但是在盐度改变后,对虾渗透压变化情况和所需能量是如何提供等问题尚需进一步研究。此前,水生甲壳动物的渗透调节机制一直是国内外学者研究的热点。众多学者在渗透调节器官的形态结构,离子转运酶和血淋巴渗透压调节以及神经内分泌调控等方面作了大量的研究工作[3曲],并取得了许多重要的研究成果,而有关甲壳动物渗透调节中能量代谢,特别是生物体的首要能源糖及其有关的代谢酶活力变化
5、的研究则相对较少。本文以我国主要的海水养殖虾类之一凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)为实验材料,并根据之前关于盐度突变对对虾蜕皮影响的研究[10-133选择4个不同的盐度突变水平,测定对虾血淋巴渗透压、血蓝蛋白、血糖及其糖酵解反应过程中的己糖激酶(Hexokinase,HK)和丙酮酸激酶(Pyruvatekinas,PK)活力的变化,以期为深入了解甲壳动物渗透调节过程中糖代谢的变化提供基础数据。1材料与方法1.1实验虾的来源与驯化凡纳滨对虾购自青岛市郊养虾场,体长3~5cm,为健康活泼的个体。对虾运回
6、实验室后,在室内(25±o.5)℃下驯养2周,使之适应实验室的条件。驯养期间每天于7:00和17:30定时投喂“海马牌”人工配合饲料2次,驯养期间的光照周期为L:D一14:10。实验前对虾饥饿24h,并参照S.M.Chan等方法[14]将蜕皮间期的对虾挑出,备用。1.2实验设计实验设盐度30为对照组(IgC表示),4个不同的盐度波动幅度(分别为2、4、6、8)为处理组,分别用S2、S4、S6和S8表示(以S4组为例的盐度突变模式见图1),每个处理组设置5个水槽作为平行。每个处理组从驯化槽中选取100尾个体相近、体色透明
7、、处于蜕皮问期的凡纳滨对虾,将其放人5个实验水槽(300cm×150crux80cm)中进行实验。实验用水的初始盐度为30,分别在实验开始前(0h)、降低盐度后3、6、12、24、48、72和96h及恢复盐度至30后的3、6、12、24、48和*基金项目:国家重点基础研究发展计划项目(2009CBll8706);国家科技支撑计划项目(2011BADl3803)资助收稿日期:2011一05—13;修订日期:2012—03—15作者简介:李英(1984一),男,硕士。E—mail:Liy.1210@yahoo.COIn.c
8、n*_通讯作者:E-mail:wanglan9249@OUC,edu.cn9期李英,等:盐度突变对凡纳滨对虾渗透调节中血蓝蛋白和糖酵解影响的初步研究72h取样。每个取样时间点取5尾对虾,每尾对虾作为1个样本,分别测定对虾血淋巴渗透压、血蓝蛋白、血糖及肝胰脏中己糖激酶活力和丙酮酸激酶活力。实验所需低盐度海水为盐度30的砂滤海水和经曝
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