瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachellii)脂肪酸去饱和酶FAD2和延伸酶ELOVL5的克隆及表达分析.pdf

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1、第48卷第4期20l7年7月海洋与湖沼0CEANOLOGIAETLIMNOLOGIASINICAV引．48．NO．4Jul．．2017瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrusvachellit)]旨肪酸去饱和酶FAD2和延伸酶ELOVL5的克隆及表达分析半覃川杰1文正勇1袁登越1邵婷1龚全2(1．内江师范学院生命科学学院长江上游鱼类资源保护与利用匹t]ll省重点实验室内江641112；2．四川省农业科学院水产研究所成都611731)摘要脂肪酸去饱和酶(FAD，fattyacyldesaturase)及延伸酶(ELOVL，elongasesofverylongchainfattyacids)

2、在鱼类脂肪代谢过程中发挥了重要作用。利用RT-PCR克隆得到瓦氏黄颡(Pelteobagrusvachellii)肝脏中控制高不饱和脂肪酸合成的(FAD2)和(ELOVL5)基因cDNA序列。瓦氏黄颡鱼FAD2cDNA片段长2041bp，编码447个氨基酸，含有3个组氨酸簇(HDxGH，HxxHH，QxxHH)，含亚铁血红素结合基序(HPGG)的类似细胞色素b5结构域等。瓦氏黄颡鱼ELOVL5cDNA片段长1065bp，编码294个氨基酸，含有组氨酸簇(HxxHH)、内质网停留信号(K、R)和4个ELO共有的保守区域(KxxExxDT,QxxFLHxYHH，NxxxHxxMYxYY,T

3、xxQxxQ)等结构域。荧光定量PCR分析表明，FAD2和ELOVL5mRNA在瓦氏黄颡鱼脑、肝脏的表达量最高，显著高于肠道、脾脏、肾脏、鳃等组织。结果表明，瓦氏黄颡鱼具有合成高不饱和脂肪酸的关键酶FAD2和ELOVL5，且肝脏为合成高不饱和脂肪酸的主要场所。关键词脂肪酸去饱和酶(FAD2)；脂肪酸延伸酶(ELOVL5)；瓦氏黄颡鱼；cDNA中图分类号Q789doi：10．11693／hyhz20170400088瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrusvachellii)是一种偏肉食性的杂食性鱼类，隶属于鲇形目(Siluriformes)、鳞科(Bagride)、黄颡鱼属(Pelteob

4、agrus)，其肉细嫩、味道鲜美，深受消费市场青睐(丁。瑞华，1994)。该鱼体型较大、生长快，已成为我国重要的淡水名优经济养殖鱼类。目前，吴代武等(2017)发现，饲料中添加过高的植物蛋白会明显降低黄颡鱼旧fulvidraco)生长，饲喂鱼蛋白水解物日粮使黄颡鱼肌肉游离氨基酸含量的升高，特别是呈味氨基酸含量增加。饲料中添加豆油不会显著影响瓦氏黄颡鱼的增重率、肝体指数和体成分等，但会影响肌肉中脂肪酸的组成，增加肌肉中C18：In．9、C18：2n．6和单不饱和脂肪酸比例(邵婷等，2017)。变换昼夜投喂时间会显著影响肝脏中酰基一CoA去饱和酶(acyl—CoAdesaturase)，葡

5、萄糖．6一磷酸酯酶(glucose．6一phosphatase)，1，．谷氨酰转肽酶1(gamma—glutamyltranspeptidase1)，胰凝乳蛋白酶B(chymotrypsinB)等与蛋白、脂肪和糖代谢的相关基因mRNA的表达(Qinetal，2017)。因此，深入分析瓦氏黄颡鱼高不饱和脂肪酸的生物合成能力有助于制定合理的饲料配方。鱼类必需营养素中的高度不饱和脂肪酸(highunsaturationfattyacids，HUFAs)，尤其是二十碳五烯酸(eicosapentaenoicacid，EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoicacids，DHA)，

6、它们对维持生物机体的正常机能，促进生长发育和繁殖，以及提高成活率等方面起着重要生理作用。水产养殖业中大部分HUFAs的来源主要是鱼油，但由于其高昂的价格，增加了养殖成本，导致经济效益降低；因而，缺乏高不饱和脂肪酸的豆油等植物油被广泛应用于水产饲料(覃川杰等，2013)。一般而言，鱼类可以通过，2—3和+国家自然科学基金项目，31402305号；四川省科技厅应用基础项目，2017JY0161号；四川省“十三五”育种攻关项目，2016NYZ0024号。覃川杰，博士，副教授，E—mail：qinchuanjie@126．tom收稿Ft期：2017-04—07，收修改稿日期：2017．04—2

7、54期覃川杰等：瓦氏黄颡侄a(Pelteobagrusvachellii)J]旨肪酸去饱和酶FAD2和延伸酶ELOVL5的克隆及表达分析885／或n一6的途径去饱和及碳链的延长作用，将植物产品中的18：3n．3及18：2n．6脂肪酸分别转化为长链高不饱和脂肪酸(Cooketal，2002)。但不同鱼类合成HUFAs的能力相差比较明显，如淡水鱼类的高不饱和脂肪酸的合成能力明显优于海水鱼类(Tocheretal，1999，2006)。因此，了解和掌