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1、血细胞分析仪自动计数外周血有核红细胞的临床应用【摘要】为探讨血细胞分析仪自动计数外周血有核红细胞(NRBC)的方法学特点,评价其临床应用价值,选择150例血液及非血液病患者,用BeckmanLH750全自动血细胞分析仪及显微镜计数法计数其外周血中NRBC数量。结果,BeckmanLH750与显微镜计数法计数外周血中NRBC数量有极好的柑关性(Q0.97),二者计数结果差异无显著意义(P=0.2016),高值、中值和低值NRBC标本绝对计数的批内CV平均V6.0%。在(0〜15)XI09/L范围内计数NRBC有极好的线性。BeckmanLH750自动计
2、数外周Hll.屮NRBC的灵敏度和阴性预测值均为100%。外周血中NRBC增高时,WBC显著高于去除NRBC的计数结果。表明LH750血细胞分析仪可灵敏、准确、精密地自动计数外周血中NRBC,并且可在NRBC増高的标本中准确计数白细胞数量。血细胞分析仪自动计数外周血中NRBC,有助于一些血液病及非血液病患者的筛查与诊断。【关键词】血细胞分析仪;有核红细胞;血细胞计数血液中出现有核红细胞(NRBC)是山于幼稚的骨髓红系细胞释放入外周血所致。健康成年人血液中无NRBC,但在新生儿或幼儿血液中可见[1]。血液中有NRBC多为晚幼红细胞,但也可见中幼红细胞或
3、更幼稚的红细胞,如红血病、红白血病。一旦成年人外周血中出现NRBC,则多为病理状态,常见于一些溶血性贫血、急性大量失血、严重的组织缺氧、急慢性白血病、恶性肿瘤、骨髓纤维化症等多种疾病。因此,准确计数血液中有核红细胞具有重要的临床意义。显微镜油镜分类计数瑞氏染色血涂片中100个白细胞时所见到的NRBC数量,即为NRBC在血液中的百分率(NRBC%),这是多年来计数NRBC最经典的方法。显微镜法计数细胞相対较少,英计数的准确度和精密度受技术人员的主现因素影响大。Beckmancoulter公司研究人员利用VCS法检测原理(V:电阻抗原理测彊细胞体积;C:
4、电导性技术;S:光散射技术),并成功运用于LH750Ifll.细胞分析仪自动计数NRBCo本文旨在把此法与经典显微镜法进行比较,探讨其临床应用价值。1对象与方法1.1对象选取住院患者150例,采集静脉血2mL,EDTA-K2抗凝,患者中血液病82例,非血液病68例。1.2仪器与试剂LH750全自动血细胞分析仪及英配套试剂,山美国贝克曼库尔特公司提供。真空采血针及EDTA-K2血液抗凝管山湖北金杏公司提供。Olypus光学显微镜、刘氏快速染液(改进的瑞氏染液)。1.3NRBC计数1.3.1仪器法:血液采集后4h之内测定。LH750全自动血细胞分析仪均按
5、仪器的标准操作规程操作及检测标本,按要求进行室内质控。仪器可自动计数每升血液中的NRBC绝对数(×109/L)和每分类200个白细胞所计数的NRBC的百分率(NRBC%),并从白细胞计数中减去NRBC的数量,得到真实的白细胞计数值。1.3.2显微镜法:用显微镜油镜分类计数,刘氏快速染色血涂片中100〜200个白细胞所见到的NRBC百分率。2结果LH750血细胞分析仪自动计数外周血NRBC,可通过绝对计数及光散射点图显示异帶,依据VCS检测原理,使NRBC得以准确计数。2.1LH750与显微镜计数NRBC的相关性LH75O血细胞分析仪绝对计
6、数阳性的标本为67例,以分类200个白细胞所算得的NRBC百邠(NRBC%)和显微镜计数的NRBCU分率进行相关性分析,显示良好的线性关系。NRBC计数的细胞数在0〜50个吋,r=0.9781;NRBC计数的细胞数在0〜200个吋,r=0.9985o2种方法67例标本的NRBC%进行配对[检验,差异无统计学意义(P=0.2010)2.2血细胞分析仪与显微镜计数NRBC的方法学比较2.2.1LH750计数NRBC的批内重复性:取3例NRBC分别为高值、中值和低值的标本,在15min内重复计数4〜6次,计算NRBC的绝对计数值(NRBC计数)、NRBC'
7、B■分率(NRBC%)、变异系数(CV值),见表I,高值、中值和低值NRBC标本的绝对计数的批内CV平均为4.36%,百分率计数的CV平均为5.01%。222LH750血细胞分析仪与昭微镜计数NRBC的阳性与阴性结果比较:血细胞分析仪检测到NRBC均视为阳性,反之为阴性(・)。在150例检测样本中,绝对计数阳性的占67例,其中50例显微镜计数也为阳性,真阳性为74.6%。绝对计数和显微镜计数两种方法NRBC均为阴性的样本为82例,只有1例LH-750绝对计数为阳性,阳性值为0.24%,显微镜计数为阴性。表1LH750计数NRBC的重复性(CV)比较标
8、本类型NRBCC×109/L)平均数CV值NRBC%平均数CV值高值23.101.12164.2