实验6：α淀粉酶固定化.ppt

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1、ａ淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测一、酶的生产①提取法定义：采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来缺点：要有充足的原材料，广泛应用受到限制③发酵法——常用方法定义：通过微生物发酵获得所需要的酶。优点：易培养、繁殖速度快、便于大规模生产。②化学合成法缺点：成本高、已知分子结构的酶知识介绍二、酶的特点①天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活②溶液中酶很难回收，不能再次利用，提高了生产成本③反应后，酶会混在产物中，影响产品质量，难以在工业生产中广泛应用固定化酶：将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有

2、酶活性的制剂。三、酶的固定化方法1、物理吸附法：将酶吸附到固体吸附剂表面的方法，固体吸附剂多为活性碳、多孔玻璃等2、包埋法：将酶包裹在多孔的载体中，包埋成格子型或包埋成微胶囊型酶物理吸附法交联法包埋法酶的固定化方法类型优点不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量.固定化酶酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的直接使用酶和固定化酶

3、的优缺点实验原理：用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上，一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色表明水解产物糊精生成.实验设计淀粉α-淀粉酶糊精β淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶麦芽糖遇碘显蓝色遇碘显红色遇碘不显色枯草杆菌a-淀粉酶的固定化可溶性淀粉溶液KI-I2溶液实验器材和步骤反应柱固定化酶气门心夹子5ml注射器筛板淀粉收集流出液，鉴定“α淀粉酶固定化及淀粉水解作用的检测”实验步骤1、α淀粉酶的固定化。5mgα淀粉酶溶于4ml蒸馏水，加入5g石英砂，搅拌30min2、将石英砂装入含气门心并用夹子封住的注射器中。用40ml蒸馏水用流

4、速1ml/min来洗涤除去未吸附的游离淀粉酶3、使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱，在流出5ml后接收0.5ml流出液。加入1-2滴KI-I2溶液，观察颜色变化。实验预期结果：水解产物糊精遇碘呈红色.固定化酶技术生产果糖浆的图示：把酶固定在反应柱上有何好处？反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高果糖的产量和质量。知识介绍