实验四酵母菌形态及菌落特征的观察.doc

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1、实验四酵母菌形态及菌落特征的观察一、目的要求1.观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式。2.观察酵母菌的菌落特征。3.学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法。二、基本原理酵母菌是多形的、不运动的单细胞微生物，细胞核与细胞质已有明显的分化，菌体比细菌大。繁殖方式也较复杂，无性繁殖主要是出芽生殖，仅裂殖酵母属是以分裂方式繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊抱子。本实验通过用美蓝染色制成水浸片，和水-碘水浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。美蓝是一种无毒性染料，它的氧化型是蓝色的，而还原型是无色的，用它来对酵母的活细胞进行染色，由丁细胞中新陈代谢的作用，使细胞内具有较强的还

2、原能力，能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型，所以酵母的活细胞无色，而对于死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此，用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态，还可以区分死、活细胞。但美蓝的浓度、作用时间等均有影响，应加注意。三、器材1•活材料：酿酒酵母(Saccharomycescalsbergensis)2-3d培养物;2.染液：吕氏碱性美蓝染液3.器材：显微镜，载玻片，盖玻片等。U!、操作步骤1.酵母菌落形态观察并记录。2.美蓝浸片观察(1)在载玻片中央加一滴碱性美蓝染液，液滴不可过多或过少，以免盖上盖玻片时，溢出

3、或留有气泡。然后按无菌操作法取斜面上培养2-3d的酿洒酵“少许，放在碱性美蓝染液中，使菌体与染液均匀混合。(2)取盖玻片一块，小心地盖在液滴上。盖片时应注意，不能将盖玻片平放下去，应先将盖玻片的一边与液滴接触，然后将整个盖玻片慢慢放下，这样可以避免产生气泡。(3)将制好的水浸片放置3分钟后镜检。先用低倍镜观察，然后换用高倍镜观察酿酒酵母的形态和出芽情况，同时可以根据是否染上颜色來区别死、活细胞。2.水浸片观察在载玻片中央滴一滴蒸馆水，取酿酒酵母少许，放在水-碘液滴中，使菌体与水混匀，盖上盖玻片后镜检。可以适当将光圈缩小观察。五、实验报告绘图说明你所观察到的酵“菌的

4、形态特征。