灰黄霉素中去氯灰黄霉素杂质的提取和分离.pdf

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1、技术管理灰黄霉素中去氯灰黄霉素杂质的提取和分离吕书阳李树学（赤峰艾克制药科技股份有限公司，内蒙古赤峰024000）摘要：采用薄层色谱法和硅胶柱层析法对灰黄霉素产品中能是溶剂丙酮影响了展开剂的比例，使层析效果不佳。改为N，去氯灰黄霉素杂质进行分离提取。利用柱层析硅胶为固定相，N二甲基甲酰胺溶剂后，分离效果理想。去氯灰黄霉素在灰黄正己烷-乙酸乙酯（1:3）为洗脱剂，进行单向一次性色谱分离得霉素产品中含量很少，须经多次硅胶柱层析，将所有收集到的到去氯灰黄霉素，用HPLC法测得其纯度为90.5%。去氯灰黄霉素溶液合并，进行浓缩结晶，

2、才能得到一定量的去关键词：灰黄霉素；杂质；去氯灰黄霉素；薄层层析；硅胶柱层析。氯灰黄霉素溶液。灰黄霉素(griseofulvin)，属于芳香族衍生物类抗生素，分子1.2.3浓缩与结晶：将含有去氯灰黄霉素组分的合并洗脱液式为C17H17ClO6，相对分子质量为352.77。生物合成灰黄霉素过用旋转蒸发仪进行浓缩，60℃条件下蒸馏，将得到的剩余溶液倒程中，缺少氯离子或氯化反应受阻时，灰黄霉素的合成量下降入干净的锥形瓶中，加入少量水，即有白色晶体析出，经过滤、甚至不能产生，会通过一个分支反应途径，形成去氯灰黄霉洗涤、干燥，即得去氯

3、灰黄霉素结晶。素。去氯灰黄霉素抗真菌的活性很弱，会严重影响灰黄霉素的1.2.4产物的纯度检查：采用反向HPLC法，以乙腈：水=35:使用效果，是灰黄霉素发酵产物中的主要杂质，所以必须严格65为溶剂，以乙腈：水：冰乙酸=40:50:1为流动相。采用面积归控制灰黄霉素产品中去氯灰黄霉素的含量。而在质量控制和一化法计算产品的纯度，在相同条件下测定去氯灰黄霉素和灰检验过程中，需要去氯灰黄霉素的纯品作为对照标准品。本文黄霉素产品的色谱图。探讨了从灰黄霉素中提取和分离去氯灰黄霉素的条件和方法。2结果1材料与方法2.1薄层层析法考察洗脱剂

4、的条件1.1实验药品及来源：灰黄霉素产品：由赤峰制药股份有限2.1.1丙酮作为溶剂时薄层层析法结果：各比例展开剂的薄公司提供；试剂为分析纯，设备仪器为实验室常规使用设备。层层析实验图如图1，其中1为去氯灰黄霉素，2为灰黄霉素。1.2实验方法其中展开剂正己烷：乙酸乙酯的比例分别为：a=1:1，b=1:2，c=1:1.2.1薄层层析法考察洗脱剂的条件：通过HPLC法测得灰3，d=2:1，e=3:1。由图可知，样品中物质分离且样品点展开位置黄霉素产品中去氯灰黄霉素的含量为0.3%。根据相关文献可比较理想的是正己烷：乙酸乙酯为1:3

5、的展开剂。知，去氯灰黄霉素在丙酮和N，N-二甲基甲酰胺中具有较大的2.1.2N，N-二甲基甲酰胺作为溶剂时薄层层析法结果：不溶解度，故分离去氯灰黄霉素的展开剂由乙酸乙酯与正己烷组同溶剂所得薄层色谱图效果如图2。其中1为去氯灰黄霉素，2成。本实验以不同配比的展开剂进行薄层层析对比分离效果，为灰黄霉素。f是以N，N二甲基甲酰胺为溶剂，g是以丙酮为溶剂。对比可知，以N，N二甲基甲酰胺为溶剂时，样品中物质分并对比采用丙酮和N，N-二甲基甲酰胺作为溶剂的分离效果。离较好，且样品点展开位置比较理想。1.2.2硅胶柱层析a准备工作：取一柱

6、长45cm，直径约3cm的下端有沙漏和活塞的玻璃层析柱，洗净，凉干。取层析硅胶200克于大烧杯中，加入配好的比例为正己烷：乙酸乙酯为1:3的展开剂至层析硅胶完全浸没，密封，放置24小时。b装柱：向浸泡后的层析硅胶中加入适量展开剂，用玻璃棒搅起硅胶沉淀，然后将浑浊夜倒入玻璃柱中然后静止，待硅胶沉淀完全，放出适量展开剂，再以同样的方法将剩下的层析硅胶装图1、同配比展开剂所得薄层色谱图入柱内，静置至沉淀完全，始终保持液面高于层析硅胶上面。c样品溶液配制：称取约30g的灰黄霉素产品于100mL锥形瓶中，加入展开剂至100mL的刻度线

7、处，置于超声波仪器中超声30min，取出静置至沉淀完全，将上清液用滤纸过滤后收集滤液，待用。d层析分离：将过滤后的样品溶液加入到层析柱中，加入样品溶液的高度约4cm，流速每秒1-2滴，用50mL锥形瓶接流出液，做薄层层析，收集带有去氯灰黄霉素斑点的流出液。图2、不同溶剂所得薄层色谱图经过柱层析，灰黄霉素和去氯灰黄霉素并未成功分离，可(下转第116页)1142015年2月技术管理系统的仿真模拟，能够极大的节约该研究过程中原料的浪费，不同进料区域等，通过多次的萃取模拟，其结果显示，为了实现节省人力资源，提升生产效率。同时还能对V

8、DF生产工艺的更混合物的高效分离，提升HFPO的分离纯度，将其回流比设置在新换代，也有着重要作用，因该模拟研究过程发现，可以通过去3.50，在第4塔板区域，将溶剂投放进去，HFPO物质的分离纯除若干塔设备的方式，通过侧线采出的手段，实现对工艺技术度，能够高达98,88，该纯度的HFPO可以