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时间:2020-04-04
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1、D-二聚体/FDP的检测及应用(Ⅲ)上海交通大学医学院附属瑞金医院王鸿利1一、D-D/FDPs的生成凝血系统的激活导致凝血酶生成,凝血酶结合于纤维蛋白原的中央结构域,释放纤维蛋白肽A(FPA)和纤维蛋白肽B(FPB),生成纤维蛋白单体(FM)和多聚体;在活化FXIII的作用下,生成交联的纤维蛋白。纤溶酶降解纤维蛋白原(Fg)和纤维蛋白单体(FM)生成的终产物称FgDPs;纤溶酶降解交联纤维蛋白,生成多种交联的纤维蛋白降解产物称FbDPs,其中包括D-D和其它的片段。因此FDPs应包括FgDPs和FbDPs两
2、组降解产物。2D-二聚体生成示意图内源凝血外源凝血FXIII凝血酶FXIIIa纤维蛋白原纤维蛋白的单体交联的纤维蛋白FPA、FPB纤溶酶纤维蛋白原降解产物交联的纤维蛋白降解产物(FgDPs)(FbDPs)FDPs3血液凝固的终产物:纤维蛋白凝块CoagulationThrombin
3、2FPA
4、2FPBFibrinmonomersFibrinogenDEDFibrinPolymer(soluble)Fibrinclot(notsoluble)XIIIa4纤维蛋白溶解的终产物:D-DimersFibrinclo
5、t(notsoluble)PlasminFibrinolysisED-Dimer56二、D-D/FDP的检测方法D-D/FDP的检测方法有多种,可分为:(一)乳胶凝集法:定性/半定量试验经典血浆胶乳凝集法全血胶乳法:自身红细胞凝集法(二)酶联免疫吸附法(ELISA):定量测定经典ELISA法快速ELISA法:乳胶免疫比浊法7D-D的检测方法单份标本检测快速定量敏感性特异性胶乳法经典血浆胶乳凝集法+----全血胶乳法自身红细胞凝集法++-+/--ELISA经典ELISA法--++-快速ELISA法乳胶免疫比浊法
6、++++-两种快速D-D检测方法与经典检测方法的比较8常用D-D试剂盒的性能比较线性范围(μg/mL)参考范围(μg/mL)STA0.22~4.00<0.5(FEU)日本积水0.5~60<1.0DadeBehring0.05~6.50.0638~0.2464ACL0.2~1.05<0.278BE(Biopool)0.15~14.4<0.15MC0~3.2<0.1上海太阳0.5~60<1.0(FEU)0.25~30<0.5(DDU)9对75例可疑VTE患者(男41,女34,年龄56±6岁)全部以血管造影作为诊断
7、“金标准”,作5种D-D检测方法的比较。5种检测D-D的方法比较(%)SESPNPVPPVRL-RL+Ⅰ93.344.490.952.80.151.68Ⅱ96.746.795.554.70.071.81Ⅲ90.040.085.750.00.251.50Ⅳ86.728.976.544.80.461.22Ⅴ90.048.988.054.00.211.75105种检测D-D方法在排除VTE中的价值Ⅱ>Ⅰ>Ⅲ>Ⅴ>Ⅳ。故D-D缺乏特异性,不能用于诊断VTE;有很高的阴性预测值,可用于排除VTE。5种方法都有极好的相关
8、性。其中:Ⅰ与Ⅱ相关性最好(r=0.9106);Ⅲ与Ⅳ相关性最差(r=0.3048);Ⅰ、Ⅱ与Ⅴ的相关性分别为0.8360和0.8764,也较好。11三、D-D/FDP检测的影响因素(一)生理因素可使D-D/FDP↑。年龄随年龄增长而增高,>80岁88%D-D水平↑饮食高脂饮食、酗酒活动剧烈活动妊娠随妊娠期延长而增高月经月经期12(二)病理因素可使D-D/FDP↑。严重感染、败血症/脓毒血症、组织坏死/坏疽、慢性肝病、甲减、结节病、先兆子痫、外科手术/创伤、分娩/产褥期、恶性肿瘤、冠心病、免疫病13(三)药物
9、因素1.可使D-D/FDP↑。溶血栓(SK、UK、rt-PA)2.可使D-D/FDP↓抗凝药(肝素/LMWH、口服抗凝剂)抗高血压药(氯沙坦等)14(四)标本采集因素时间固定长7~9时为宜扎臂时间<5min为宜顺利要求一针见血,防止反复穿刺注射器硅化/塑料,针头用21G1.5/20G1.5号15(五)抗凝剂因素用含0.109mmol/L枸橼酸钠,与血液标本严格1:9混合,轻轻混匀。抗凝剂量少,D-D测定值偏高;抗凝剂量多,D-D测定值偏低。溶栓治疗监测时,需用枸橼酸钠+抑肽酶作为抗凝剂,可以精确测定D-D/F
10、DP。16(六)标本贮存因素全血标本4℃~10℃<2h,3000rpm离心10min去血小板。放-20℃、4℃、20℃、32℃2h内无变化;4℃放24h无变;放20℃、32℃4h后D-D/FDP水平↑。分装(0.5~1.0mL)放-20℃贮存,用时快速溶解。17(七)仪器因素国际上大多数临床实验室是用血凝仪测定D-D/FDP,且与凝血4项(PT、APTT、TT、Fg)测定匹配;但也有少数单位在生化仪
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