西北师范大学组织学课件-(1).ppt

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1、组织学绪论西北师范大学生命科学学院研究内容组织学（histology）研究机体微细结构及其相关功能的科学研究水平：组织、细胞、亚细胞和分子比较组织学(comparehistology)研究不同动物微细结构及其相关功能的科学肌动蛋白肌球蛋白肌钙蛋白细肌丝粗肌丝肌球蛋白杆肌球蛋白头组织（tissue）构成：细胞群和细胞外基质细胞：机体结构和功能的基本单位，成人约有1015个、200余种细胞外基质：由细胞分泌形成类型：上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织；组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官；若干功能相关的器官构成系统意义促进了生理学的进步是病理学的基础促进人

2、类对自身的深入了解发展简史光学显微镜简称光镜（lightmicroscope，LM）16世纪末荷兰人发明光镜1665年英国人胡克命名“细胞”意大利人马尔比基观察了脾、肺、肾、表皮荷兰人列文虎克发现红细胞、精子、肌纤维；格拉夫发现卵泡1801年法国人比沙提出“组织”概念细胞学说德国人施万、施莱登（1838、1839）提出了细胞学说.内容：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生由于显微技术的提高、组织切片机的发明、生物标本的固定和染色方法的出现，19世纪下半叶成为组织学和细胞学发展的黄金时代。到19世纪末人们已

3、能较正确地描述细胞结构。电子显微镜简称电镜（electronmicroscope,EM）1932年德国人卢斯卡和科诺尔发明电镜，使分辨率从0.2μm提高到0.2nm约二十年后出现超薄切片术（50~80nm）同时，以观察物体表面结构的扫描电镜问世组织学进入第二个黄金时代。可观察超微结构（ultrastructure）：即细胞膜、细胞器、染色体等亚细胞结构，组织学从细胞水平飞跃到了亚细胞水平。当代组织学新仪器、新技术的发明和应用，如图像分析仪、共焦激光扫描显微镜、流式细胞仪等。免疫组织化学技术能显示细胞和组织中的蛋白质，提供其定位、定性和定量的信息，可获知亚细胞

4、结构的蛋白组成、空间分布关系及在细胞不同时期的变化。原位杂交技术能在切片上特异性地显示器DNA与mRNA片断，提供细胞所含基因及其表达的信息。免疫组织化学技术和原位杂交技术将组织学引入分子水平。组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景，在体外模拟培养皮肤、软骨、骨等器官和组织。学习方法审视角度组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞细胞水平：主要细胞的分布、结构特点（含重要细胞的超微结构）及功能形态和结构相统一结构是功能的基础，功能是结构的必然表现培养观察能力：重视实习课和图像观察培养空间思维能力：将二维图形还原为三维构像技术简介光镜技术石蜡切片术（paraff

5、insectioning）：取材、固定、脱水、（置换）、包埋、切片（5～10µm厚）、贴片、脱蜡、染色苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosinstaining，HE染色法）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红色嗜酸性（acidophilia);嗜碱性(basophilia)中性（neutrophilia）特殊染色：用硝酸银将神经细胞染为黑色(镀银染色法)用醛复红将弹性纤维和肥大细胞的分泌颗粒染为紫色活体染色，即将无毒或毒性小的染料经静脉注入后，再取材制成切片观察。如注入的台盼蓝(trypanblu

6、e)可被肝、脾等器官内的巨噬细胞吞噬。在组织化学术,常使用荧光染料染色或作为标记物,用荧光显微镜观察电镜技术透射电镜术（TEM）用于观察组织细胞的超微结构，需制备超薄切片（50~80nm厚）并经电子染色，根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色）扫描电镜术（SEM）用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无需制备切片透射电镜术：组织块(lmm3)用戊二醛与饿酸两次固定，脱水后树脂包埋，用超薄切片机切片，再经醋酸铀和拧橡酸铅染色。电子束射落到切片时，随细胞构成成分的密度以及吸附重金属铀、铅、饿的程度不同，而发

7、生相应的电子散射。当电子束技射到密度大、吸附重金属多的结构(如溶酶体)时，电子被散射得多，因此，射落到荧光屏上的电子少而呈暗像，电镜照片上呈黑或深灰色，习惯称该结构为高电子密度(electrondensity)；反之呈浅灰色，称低电子密度扫描电镜术：不需要制备切片，组织块(约0.3cm大小)用戊二醛和饿酸固定后，经脱水、干燥，再于其表面喷镀薄层碳与金属膜。组织化学组织化学术（histochemistry）为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术，与组织学技术结合而产生的技术，在组织切片显示某种物质的存在和分布状态及定量信息。分类：一般组织化

8、学术免疫组织化学术原位杂交术一般组织化学术：组织中的