基于酶催化沉积放大和新型纳米材料的电化学免疫传感器.pdf

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1、基于酶催化沉积放大和新型纳米材料的电化学免疫传感器学位申请人姓名：导师姓名及职称：培养单位：专业名称：论文提交日期：论文答辩日期：答辩委员会主席：MasterofScienceAnalyticalChemistrytheGraduateSchoolofHunanUniversitySupervisorProfessorSHENGuoliMay，2011湖南大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师指导下独立研究所取得的科研成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其它人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明

2、。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：1参诞同期：幻／序，月2一日学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩影或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1．保密口，在年解密后使用本授权书。2．不保密团(请在以上相应方框内打“、／”)作者签名：导师签名：钰使砂惨／占为2．同卵加矿硕士学位论文摘要免疫分析信号的增强技术一直以来是免疫分析领域研究的一个重要方面，它对于提高分析

3、的灵敏度有着至关重要的意义。同时，在电化学免疫传感器的研制中，传感界面的设计对改善免疫传感器的响应性能起着重要作用。探索稳定、优良的免疫材料固定化方法，仍然是传感器研究工作者的主要目标之一。基于以上考虑，综合文献报道，本文主要在免疫材料固定化和免疫信号放大技术方面做了一些工作，主要内容如下：(1)提出了一种基于珊瑚状金纳米颗粒和壳聚糖的无机／有机杂化膜的高灵敏电化学免疫传感器(第2章)。运用种子媒介生长法在壳聚糖修饰的金电极上制备具有大表面积、三维的金纳米颗粒。它的独特形态不但能增大酶的固定量，而且它的有序空间定位和大的比表面积增强了电子传递。具有大表面积的珊瑚状金纳米颗粒大大的提高了组装数量

4、，并且具有非常好的电子传递性能，因此显著地提高了免疫传感器的性能。其形貌通过扫描电镜图(SEM)分析。在实验最优化条件下，免疫传感器表现了优越的性能(如线性范围跨越3个数量级，检测下限可低至5pg／mL和高特异性等)，使其成为对人IgG或其他生物分子的直接免疫的选择平厶1：3o(2)提出了一种用于检测人IgG的高灵敏度的电化学免疫传感器。电化学酶免疫分析基于HRP．H202．OPD(邻苯二胺)系统的酶催化沉积放大，酶催化产物2，3．二氨基吩嗪通过电化学方法检测。通过二步沉积法在金电极表面上沉积一层聚硫堇膜，由于聚硫堇膜含有大量的氨基基团，因此具有良好生物相容性的金纳米颗粒通过共价作用和聚硫堇膜

5、相结合。由于金纳米颗粒具有大的比表面积，大量的抗体分子被吸附到金纳米颗粒上，通过免疫夹心反应，辣根过氧化物酶标记的人IgG被捕获到电极表面，在H202作用下，催化底物OPD，反应生成不溶有机物沉积到电极表面，达到信号放大的目的。所提出的电化学免疫传感器表现出良好的性能，结果表明测定人IgG浓度的对数在100pg／mL至U50ng／mL范围内有很好的线性关系，检测下限为10pg／mL。(3)提出了一种基于聚硫堇膜／金纳米簇的酶催化沉积放大电化学免疫传感器(第4章)。首先在玻碳电极表面修饰一层聚硫堇的电聚合膜，为传感界面的构建提供了一个富含氨基的稳固基底。利用电沉积法在聚硫堇修饰的玻碳电极上制备金

6、纳米簇，所制备的金纳米簇具有稳定性好、比表面积大、生物相容性和电子传递性能好的特点。电沉积金纳米簇提供了直接的蛋白分子固定和电子传递界面，抗体分子可以通过氨基．金的亲和力固定到金纳米簇上，并具有高的负载量和高的免疫活性。以人IgG为分析模型，碱性磷酸酶标记的抗体通过免疫反应结合到传感IIIII达到信号相关。在现了对免生长法；硕上学位论文AbstractTheenhancementofimmunoassaysignalisanimportantaspectofimmunoassaystudy，whichisvitaltoimprovementoftheassaysensitivity．Meanw

7、hile，thekeypointforthefabricationofbiosensorswithexcellentpropertyistheefficientimmobilizationofbio．speciesonthesurfaceoftransducers．Soitisundoubtablethattheexplorerofnewimmunizationimmobilizationmate