细胞培养常用缓冲液配置及保存.doc

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1、细胞培养常用缓冲配制及保存（所需水全用合格的去离子水）1）Hank's液用途：用于保存标木产品编号：HA2004丫产品规格：500ml价格：120.00配制：500ml(ddH2O)称戢:NaCI・・■・_・■・・・・■・_・・・・■・_・_・・・・■•4gMgSO4.7H2OgNa2HPO4.12H2O...0.067gKH0P040.03qCaCL0.07g葡萄糖0.5g注意:A：在300-400ml水中依次溶解NaCKKCkMgSO4.7H2OxNa2HPO4.12H2O.KH2PO4s葡萄糖为A液。B：在约50

2、ml水中溶解CaCI_2为B液。C：将B液缓缓倒入A液屮，同时搅拌，为C液。D：在C液中加入1%酚红1ml,混均,加水至500ml,该液即为Hank's液,此液偏酸。消毒：10磅10分种高压消毒（消毒时压力波动不能大，否则葡萄糖会沉淀出來，消毒完毕，须等冷却方打开高压锅，以免液体冲出。）保存：4度。使用：在使用时加入5.6%NaHCO3调PH至7.2左右，然后加入10%（体枳/体积）青链霉素液。2）5.6%NaHCO3液；用途：调节溶液的PH值。配制：50ml称最：NaHCO32.8g注意：在约40ml水中溶解NaHC

3、O3,再加水至50ml即可,NaHCO3溶解缓慢,故可适当加热。消毒：10磅10分钟高压消毒。保存：4度。3）1%酚红液；用途：作溶液的指示剂。配制:100ml称最：酚红..19注意：A）在于1NNaOH2ml溶液中溶解酚红；酚红较为困难，所以在硏钵屮进行，不断研磨至溶。B）待溶解后片刻，再加入1ml1NNaOHC）加水至100ml,配制完毕。消毒：加入其它溶液屮一起高压灭菌。保存：4度。4）青/链霉索原液；产品编号：PS2004HY产品规格：100ml价格：130.00浓度：1万单位青霉索、1万单位链霉素或1Mg链霉

4、素/ml。配制："无菌操作*A）80ml水10磅10分钟高压灭菌。B）溶解80力单位的青链零索于80ml水屮。分装：1〜2mI小分装。保存：-20度使用：按1%（体积/体积）加入溶液屮，终浓度1力单位青链霉素/ml5）L-谷氨酰胺液;产品编号：L2004HY产品规格：10ml价格：100.00浓度：30mg/ml配fliO：10ml称量：L•■谷氨酰胺10ml消毒：100nm过滤除菌。保存：小分装存于一20度使用：A）用时终浓度为0.3mg/mlB）具体用法：培养基《含血清》/L-谷氨酰胺=100ml/1ml注意：化冻

5、后混均。6）无CaMg离子PBS：产品编号：PB2004丫产品规格:500ml价格：120.00用途:A）配制EDTA、胰酶、胶原酶;B）冲洗组织和细胞;配制:500ml（ddH2O）、Ji；「:NI*4L*0•1gNa2HPO4.12H2O....1.445gKH2PO40.1g注意:在400ml水中依次溶解上述试剂；加入1%酚红1ml,然后加水至500ml。消毒：10分钟10磅高压灭菌；保存：4度。7）胰蛋DiW/EDTA：使用：用时以5.6%NaCO3调pH至7.2左右，但用于配制胰酶、EDTA、胶原酶时，不调p

6、H。产品编号：TE2004Y产品规格：100ml价格：150.00用途：原代消化传代消化消化丢弃细胞浓度：0.25%配制：100ml称量：胰酹0.25g注意：用90ml无Ca、Mg离子PBS、溶解胰除再加该PBS至100ml（丿庚爾溶解较难，必要时在4度过夜以便溶解）。消毒：100nm过滤除菌。保存：小分装于-20度保存。使用：用时调PH7.2左右，用5.6%NaCO3调。原代消化用0.25%浓度；传代用0.25%胰陋与0.04%EDTA对半混合。8）EDTANa4盐；产品编号：ED2004丫产品规格:100ml价格:

7、90.00浓度：0.1%配制：100ml；称量：EDTANa—”0.04g注意：用90ml无Ca、Mg离子PBS溶解EDTAN%后加该PBS至100ml消毒：10磅10分钟高压灭菌。保存：小分装于-20度保存。9）胶原酶;用途：用于原代消化细胞；浓度：0.1%；配制：100ml；称最：胶原酶0.1g;注意：用90ml无Ca、Mg离子PBS（或HankS无血淸RPM1640）溶解胶原旃，后加液至100ml.消毒：100nm过滤除菌:保存：小分装于度保存。10）干粉培养基配制；配制:500ml；（ddH2O）称最：培养基粉

8、5g;注意：以水400ml溶解培养基粉，以NaHC03（粉剂）调PH至7左右，再加水至500ml。消毒：过滤除菌；保存：4度或-20度保存；（4度保存不超过30天：・20度保存不超过100天。）11）0.25%柠檬酸胰酹；产品编号：T2005HY产品规格：100ml价格：150.00用途：用于细胞传代培养：配制:1000ml；不"