组织学与胚胎学之组织学绪论a.ppt

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1、组织学绪论IntroductionofHistology第1章组织学（histology）研究机体微细结构及其相关功能的科学研究水平：组织、细胞、亚细胞和分子（例：心脏）研究内容发展简史学习方法技术简介组织学组织意义图1组织（tissue）构成：细胞群和细胞外基质细胞：机体结构和功能的基本单位，成人约有1015个、200余种细胞外基质：由细胞分泌形成类型：上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织；组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官；若干功能相关的器官构成系统研究内容发展简史学习方法技术简介组织学组织意义促进了生理学的

2、进步是病理学的基础促进人类对自身的深入了解研究内容发展简史学习方法技术简介组织学组织意义简称光镜（lightmicroscope，LM）16世纪末荷兰人发明→1665年胡克命名“细胞”→马尔比基观察了脾、肺、肾、表皮；列文虎克发现红细胞、精子、肌纤维；格拉夫发现卵泡→1801年比沙提出“组织”概念光学显微镜细胞学说电子显微镜当代组织学研究内容发展简史学习方法技术简介提出：施万、施莱登（1838、1839）内容：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生光学显微镜细胞学说电

3、子显微镜当代组织学研究内容发展简史学习方法技术简介简称电镜（electronmicroscope,EM）发明：1932年卢斯卡、科诺尔，使分辨率提高到0.2nm超薄切片术（50~80nm）超微结构（ultrastructure）：即细胞膜、细胞器、染色体等亚细胞结构光学显微镜电子显微镜当代组织学研究内容发展简史学习方法技术简介细胞学说新仪器、新技术的发明和应用免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学引入分子水平组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景光学显微镜电子显微镜当代组织学研究内容发展简史学习方法技术简介细胞学说审

4、视角度组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞细胞水平：主要细胞的分布、结构特点（含重要细胞的超微结构）及功能形态和结构相统一结构是功能的基础，功能是结构的必然表现培养观察能力：重视实习课和图像观察培养空间思维能力：将二维图形还原为三维构像研究内容发展简史学习方法技术简介石蜡切片术（paraffinsectioning）：取材、固定、脱水、包埋、切片（5～10µm厚）、染色苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosinstaining，HE染色法）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质

5、和细胞外基质着红色嗜酸性（acidophilia);嗜碱性(basophilia)中性（neutrophilia）特殊染色光镜技术电镜技术组织化学放射自显影术图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介图3~4细胞培养组织工程图2透射电镜术（TEM）用于观察组织细胞的超微结构，需制备超薄切片（50~80nm厚）并经电子染色，根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色）扫描电镜术（SEM）用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无需制备切片光镜技术电镜技术组织化学放射自显影术

6、图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介细胞培养组织工程图5图6组织化学术（histochemistry）为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术，与组织学技术结合而产生的技术，在组织切片显示某种物质的存在和分布状态分类：一般组织化学术免疫组织化学术原位杂交术光镜技术电镜技术组织化学放射自显影术图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介细胞培养组织工程一般组织化学术：组织中的某种结构成分与所加试剂发生化学反应并呈现某种颜色，在显微镜下可观察到糖类：PAS（过碘酸希夫）反应，显示多糖和糖蛋白，呈紫红色脂类

7、：锇酸固定染色，呈黑色核酸：福尔根反应显示DNA，甲基绿－派若宁反应同时显示DNA与RNA酶类：酶与特异性底物的反应产物、再与捕捉剂反应，形成有色的沉淀物光镜技术电镜技术组织化学放射自显影术图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介图7细胞培养组织工程免疫组织化学（immunohistochemistry）根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中的肽和蛋白质用标记的抗体与组织中的抗原结合，标记物可于显微镜下观察。标记物有荧光素（荧光显微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶体金（多用于电镜观察）光镜技术电镜技

8、术组织化学放射自显影术图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介图8~10细胞培养组织工程原位杂交术（insituhybridization）即核酸分子杂交组织化学术，检测基因（DNA片段）的有无、基因的表达活性（mRNA）原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记