组织学与胚胎学之绪论

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时间:2018-10-11

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1、组织学与胚胎学教学课件浙江中医药大学绪论(Introduction)I.什么是组织学(Histology)?组织学是研究人体正常细微结构及其相关功能的科学。A.微观结构:1.光学显微镜(Lightmicroscope,LM):计量单位是微米(μm)。(1μm=0.001mm)。2.电子显微镜(Electronmicroscope,EM):计量单位是纳米(nm)。(1nm=0.001μm)。B.相关功能:微观结构和其功能相适应,反之亦然。C.人体结构的4个层次:1.细胞(Cell):人体结构的基本结构和功能单位。2.组织(Tissue):由一群结构和功能相

2、同或相似的细胞(及其细胞间质)构成。人体内有4种基本组织:上皮组织,结缔组织,肌组织和神经组织。3.器官(Organ):由组织有机地结合起来而构成。4.系统(System):由结构相似且功能相关的器官构成。胚胎学:研究人体在子宫内正常发育和异常发育的科学。精子卵子胚胎分娩受精卵3-8w9-38w1day-2w联体畸胎7w(Fertilization)II.为什么要学习组织学?1.组织学又叫微观解剖学(Microanatomy),是解剖学知识的进一步完善。2.结构是功能的基础,学好组织学是学好生理学(Physiology)的基础。3.只有了解正常结构,才能

3、学习其异常变化。因此组织学是病理学(Pathology)的基础。4.组织学成绩不及格,必须补考,重修和留级。问题解决方法观察对象太小放大显微镜观察对象无色,无反差染色(HE染色)观察对象生化成分不同细胞化学、免疫组织化学观察对象是活体培养组织胚胎学研究技术c.切片:用切片机将组织切成1~20μm厚的蜡片,然后将其放到温水上,待其完全展开后,裱到有粘附剂的载玻片上。除切片外,还有其他处理组织的方法:*铺片(Wholemount):用于很薄的组织,如肠系膜。*磨片(Groundsection):用于很坚硬的组织,如骨和牙。*涂片(Smear):用于液态组织,

4、如血液,精液和唾液。2.染色(Staining):染料可以将微观结构显示不同的颜色以便观察鉴别。在染色前,需要脱蜡入水,因为染料是水溶性的。a.最常用的染料是苏木素(Hematoxylin,H)和伊红(Eosin,E)。*苏木素是碱性染料,蓝紫色,可以使细胞核等着色。被苏木素着色的结构本身为酸性,具有嗜碱性(Basophilic)。*伊红是酸性染料,粉红色。可以将大多数细胞的细胞质染成红色。被伊红着色的结构本身为碱性,具有嗜酸性(Acidophilic)。*不易被苏木素和伊红着色的结构具有嗜中性(Neutrophilic)。HE染色:苏木精(Hemato

5、xylin)伊红(Eosin)染色碱性染料将嗜碱性物质(本身酸性)染成蓝色酸性染料将嗜酸性物质(本身碱性)染成红色细胞核中的DNA、RNA细胞质中的RNA细胞质、膜性结构(线粒体、溶酶体、滑面内质网)肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料)染成紫红色b.如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同,该结构具有异染性(Metachromasia)。c.如果某结构能将银离子还原成银原子,并吸附银原子而使自身显示棕黑色,该结构具有嗜银性(Argyrophilic)。网状纤维具有嗜银性,因此可以用银盐染色来显示。H&E染色的中等动静脉d.不同的染色方法,其结果不同。

6、醛复红染色的中等动静脉在染色后,重新进入酒精和二甲苯,最后用中性树胶封片,以便长期保存。*切片:固定→梯度酒精→二甲苯→石蜡。*染色:石蜡→二甲苯→梯度酒精→水。*保存:水→梯度酒精→二甲苯→中性树胶。B.EM技术:1.EM可分为透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)2类。2.EM的原理和LM相似,但用电子束代替光线,磁场代替玻璃透镜。分辨率约为0.2nm。3.EM的组织的制备与LM的相似,但有以下不同:a.通常使用戊二醛和四氧化锇作双重固定。b.切片超薄(厚度小于90nm),塑胶包埋。c.用重金属盐如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此,所有原始的电镜图片都是黑

7、白的。SEM显示巨噬细胞表面扫描电镜图(SEM)脾血窦细胞分裂TEM显示胰腺腺泡细胞内部结构。C.特殊的染色方法:1.组织化学(Histochemistry,细胞化学)法:通过生物化学的方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物,来显示微细结构的位置,然后用显微镜观察。PAS反应:用来显示多糖的分布。先用过碘酸(Periodicacid)将多糖氧化,在多糖表面形成戊二醛结构,然后用无色亚硫酸品红(Schiff试剂)还原戊二醛形成紫红色沉淀。肝脏的PAS染色免疫细胞(组织)化学利用抗原(antigen,Ag),抗体(antibody)特异结合的原理,用已知抗体

8、检测未知抗原的一种方法。免疫细胞化学(Immunocytochemistry)染

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