苦瓜抗白粉病SCAR分子标记的开发.pdf

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1、南方农业学报JOURNAl．OFSOUTHERNAG砌CULTURE2013，44(10)：1595-1601ISSN2095—1191：CODENNNXAABhnp：／／www．nfn”b．cnDOI：10．39690：issn．2095-1191．2013．10．1595苦瓜抗白粉病SCAR分子标记的开发周生茂-．一，尚小红1，梁任繁1，郭元元1，文俊丽1，黄皓‘，陈振东1，班美玲3，黄如葵1’(1广西农业科学院蔬菜研究所，南宁530007；2广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室，南宁5300073广西环境保护科学研究院，南宁

2、530099)摘要：【目的】获得与苦瓜抗白粉病基因紧密连锁的分子标记，为加快苦瓜抗白粉病新品种的选育奠定基础。【方法】以高抗白粉病野生苦瓜MCl8为父本、高感白粉病苦瓜栽培种MCl．2为母本创建F：代分离群体；经单株抗病性鉴定后，以BSA法构建F2代单株的高抗和高感白粉病苦瓜DNA近等基因池；利用SRAP技术筛选多态扩增片段，对仅在抗白粉病近等基因池和父本中出现的差异片段进行同收、测序、比对和转化成scAR标记，并利用已知抗病性的单株DNA分析标记与苦瓜抗白粉病的相关性。【结果】从1188对SRAP弓J物组合中筛选到稳定阳性差异条带

3、的引物组合5对，其中ME20EM5弓l物对扩增的差异条带长度为332bp，与葡萄抗体蛋白基因(抗性基因)的DNA序列有较高相似性，并将其成功转化成与苦瓜白粉病抗性相关、大小为320bp的scAR标记。【结论】开发的SCAR—ME20EM5分子标记町用于苦瓜抗门粉病分子标记辅助选择。关键词：苦瓜；白粉病；集团分离分析法；SRAP；SCAR中图分类号：$642．5文献标志码：A文章编号：2095—1191(2013)10—1595—07DevelopmentofSCARfromSRAPmolecularmarkerscloselylin

4、kedtopowderymildew-resistantgenesinbittermelon(MomordicacharantiaL．)ZHOUSheng-ma01一，SHANGXiao-hong’，LIANGRen—fanl，GUOYuan-yuanl，WENJun-lil，HUANGHa01，CHENZhen—don91，BANMei—lin93，HUANGRu—kuil+(1VegetableResearchInstitute，GuangxiAcademyofAgriculturalSciences，Nanning530007

5、。China；2GuangxiCropGeneticImprovementLaboratory，Nanning530007，China；3GuangxiAcademyofEnvironmentalProtectSciences，Nanning530022，China)Abstract：【Objective】Molecularmarkerscloselylinkedtopowderymildewresistantgenesinbittermelon(Momordi—caeharantiaL．)wereobtainedtoprovide

6、basisonacceleratingthedevelopmentofHewpowderymildewresistantcultivars．【Method】neplantsfromF2generationswerecreatedthroughthehybridizationofhighlypowderymildew—sensitiveandcultivatedbittermelonMCl一2askmaleparentwithstronglypowderymildew—resistantandwildbittermelonMCl8as

7、maleparent．Afteridentificationpowderymildewresistanceabilitieswiththeirparents．thenear—isogenicDNApoolsfromF2populationplantswereclassifiedonthebasisofbulkedsegregationanalysis(BSA)method．Polymorphicamplifiedfragmentswerescreenedfromnear-isogenieDNApoolsbysequence—rela

8、tedamplifiedpolymorphism(SRAP)technique．Thedifferentialfragmentsonlybelongingtopowderymildew—resistantnear—isogenicpo