AKTA层析仪使用操作规程.pdf

《AKTA层析仪使用操作规程.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、ÄKTA全自动层析仪操作规程1.开机打开主机和电脑电源，待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮不闪烁），双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。2.准备流动相和样品所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。当缓冲液中含有有机溶剂（如乙腈、甲醇），需在使用前用低频超声脱气10min。3.清洗管道及装柱3.1首先将A1管道放入平衡液或bandingbuffering中，将B1管道放入高盐溶液中或elutionbuffering中，在systemcontrol窗口点击manual→pump→pumpwashbasic，选中A

2、1,B1管道为ON，execute。泵清洗程序会自动运行结束。3.2选择manual→pump→flowrate，输入流速1ml/ml，insert；选择manual→Alarm&mon→alarmpressure，设置highalarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到），insert，execute。将进样阀的1号位管道接入柱子的柱头，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉，直接拧入紫外流动池或连接管道。4.手动运行4.1平衡柱子平衡好了（观察电导COND，pH的数值正确曲线走稳了）。此时将紫外调零，选择manual→Alarm&mon→autozero，exectue，

3、就准备上样了。4.2上样4.2.1用样品环上，将样品吸进注射器，推掉气泡，从进样阀的3号位推入（进样量不得低于样品环的体积的2倍），不要取下注射器。选择manual→flowpath→injectionValve→inject，execute。4.2.2用样品泵上样（AKTAexplorer系统），将样品置于SampleValve1号位（可以选8个不同的位置），点击manual→pump→DirectLoad_960输入进样流速和体积，execute。注意样品的管路要事先充满缓冲液。4.2.3用系统泵上样：点击pause，将A1放入样品中，点击countine；待样品上完后

4、，再将A1放入到平衡液中继续清洗柱子。4.3洗脱用缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。选择manual→pump→gradient，按照自己的条件选择target％B（例如100％）和length（例如20min），execute。4.4收集4.4.1固定体积收集：选择manual→Frac→fractionation_900,输入每管收集体积，exectue。结束固定体积收集选择Frac→fractionation_stop_900，exectue。4.4.2峰收集：选择manual→Frac→Peak_FracParametersUV，输入峰收集参数，insert，点击Peak

5、_Fractionation_900，输入每管最大收集体积，insert，exectue。结束峰收集，选择Peak_FracStop_900,execute。5.编程及自动运行5.1点击mothededitor窗口里工具栏的mothedwizard快捷图标，打开对话框。5.2按照对话框的要求选择条件，编好后按finish出现编程结果，在变量框中可以更改变量。保存点击工具栏里的保存快捷图标，输入文件名，点击ok。5.3运行自动程序：在systemcontrol窗口点击工具栏中的RUN打开编好的方法，点击next直到start开始运行。5.4运行中，按下工具栏上的hold键表示

6、保持目前的运行模块状态不进入到下一个命令中。点击manual→other→nextbreakpoint表示进入到下一个模块指令。5.5运行结束后，结果自动保存。6.清洗系统及拆柱将A1和B1入口放入纯水中，启动pumpwashpurifier功能冲洗A泵和B泵及整个管路。然后再将A1和B1入口放入20％乙醇中，同样操作将乙醇冲满整个管路保存。系统给柱子一个慢流速，设置系统保护压力，然后先拆柱子的下端，拧上堵头，再拆柱子的上端，拧上堵头。7.关机从软件控制系统的第一个窗口unicornmanager点击退出，其他窗口不能单独关闭。然后关闭AKTA主机电源，关闭电脑电源。（仪器

7、的维护另见系统维护指南）通用电气医疗集团生命科学部hotline：8008109118