POR和MDR1基因多态性对硝苯地平人体药动学的影响.pdf

《POR和MDR1基因多态性对硝苯地平人体药动学的影响.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterInfluenceofPORandMDR1polymorphismsonpharmacokineticsofnifedii"inHealthySubiectsnlteOlplneealthybut)ectslBy：YanxiaQiSupervisor：Prof．LirongZhangDepartmentofPharmacology,BasicMedicalCollegeOctober,2013

2、原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。⋯⋯：裔娠吼矽，弓⋯川日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权

3、郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：究挽铉日期：勿哆年f。月岱日摘要POR和MDRl基因多态性对硝苯地平人体药动学的影响研究生：齐艳霞导师：张莉蓉教授郑州大学基础医学院药理学教研室河南郑州450001摘要研究背景和目的：硝苯地平是细胞色素P450酶系(CYP)3A经典的代谢底物。细胞

4、色素P450氧化还原酶(CytochromeP450oxidoreductase，POR)是目前发现的所有CYP同工酶的唯一电子供体。已有动物实验研究证明，POR活性降低可引起多种CYP同工酶活性降低。编码人POR的基因具有明显的基因多态性，在这些已知的功能性单核苷酸多态性中，POR*28(A503V)变异频率较高，因此，对POR*28多态性进行药物基因组学研究具有重要的临床意义。P．糖蛋白(P—gP)是多药耐药基因(Multidrugresistance1，MDRl)的产物，能够能量依赖性地将细胞内药物

5、转运至细胞外。MDRl基因C1236T、G2677T／A和C3435T位点变异率较高，研究报道较多。硝苯地平属于P．gP底物，但未见MDRl基因多态性对硝苯地平药动学影响的报道。本研究目的探讨POR*28及MDRlC3435T基因多态性对硝苯地平在健康人体内药动学的影响，为实现硝苯地平个体化用药提供依据。研究方法：1研究对象共有45名中国健康受试者参与研究，其中男32例，女13例。平均年龄23．13+1．89Y，平均身高170．03+7．25cm，平均体重65．17i7．96kg。检查血尿常规、肝肾功能及

6、心电图，各项检查指标均正常。所有受试者均无药物过敏史，摘要在参与实验前两周及实验期间未服用其他任何药物。该研究得到郑州大学第一附属医院伦理委员会批准，所有受试者均自愿参加试验并于试验前由本人签署知情同意书。2试验方案所有受试者在服药前禁食10h，分别在单次服用90mg硝苯地平后，定时采血，用高效液相色谱．质谱联用法分析受试者硝苯地平血药浓度并进行相关药动学参数的计算。3POR*28和MDRlC3435T基因型分析用酚氯仿法提取基因组DNA，POR*28基因型用PCR产物直接测序法检测，MDRlC3435T

7、基因型用PCR-RFLP法检测。根据检测结果，POR枣28CC、CT和TT3种基因型分别为15、24和6例；MDRlCC、CT、TT3种基因型分别为13、24和8例。4硝苯地平血药浓度测定用高效液相色谱．质谱联用法分析受试者的硝苯地平血药浓度。样品在进行LC．MS／MS分析前需要进行预处理。5药动学参数求算及统计分析C一(峰浓度)和Tm觚(达峰时间)可从药时曲线直接读出，AUC计算采用梯形法，Tl／2用3p97软件计算。采用SPSS13．0软件处理数据。不同基因型之间药动学参数的比较采用单因素方差分析。P

8、<0．05认为有统计学意义。结果：1硝苯地平血浆药物浓度测定的方法学考察标准曲线y=0．101x+0．00155，回归系数r2=O．9991，线性范围0．5．250ng／ml，最低检测限为0．5ng／ml；平均回收率为97．9％，日内、日间变异范围均小于15％，样品稳定性良好。方法准确度、灵敏度、稳定性均符合生物样品分析要求。2．POR*28基因多态性对硝苯地平药动学参数的影响II摘要POR*28CC、CT、TT基因型组的AU