各种PH值的磷酸盐缓冲液配制.doc

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1、各种PH值的磷酸盐缓冲液配制PH=PKa+lg([a]/[b])K1=7.52X10-3,K2=6.23X10-8,K3=2.20X10-13.?设磷酸磷酸二氢钾浓度为C1磷酸氢二钾浓度为C2pH=pK-lg(C1/C2)=7这里的pK是7.2(这个值只适用于磷酸二氢根/磷酸氢根缓冲对,公式是通用的)解得C1:C2=1.585(mol比)磷酸的二级电离常数)Ka,求出PKa,然后根据公式可以算出磷酸二氢钾与磷酸氢二钾的浓度比C1:C2。这时混合物中P的质量分数为(31/136×1.585+31/174×1)/(1.585+1)=20

2、.87%混合盐的质量比136×1.585:174×1=215.56:17410mg/20.87%=47.916mg(47.916/(215.56+174))×215.56=26.51mg(47.916/2.575)×174=21.40mg应取磷酸二氢钾26.51mg磷酸氢二钾21.40mg用蒸馏水稀释至1L磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g,与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH2.0)甲液:取磷酸16.6ml,加水至1000ml,摇匀。乙液:取磷酸氢二钠71.63g,加水使溶解成1000ml。取上述

3、甲液72.5ml与乙液27.5ml混合,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(pH2.5)取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。磷酸盐缓冲液(pH5.0)取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0,即得。磷酸盐缓冲液(pH5.8)取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH6.5)取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml,用水稀释至100ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH6.6)取磷酸二氢钠1.

4、74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g,加水使溶解成400ml,即得。磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8;另取胰酶10g,加水适量使溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH6.8)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.0)取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml,用水稀释至100

5、ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.2)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml,加新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.3)取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml,调节pH值至7.3,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.4)取磷酸二氢钾1.36g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml,用水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.6)取磷酸二氢钾27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.

6、4ml,再加水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.8)甲液:取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解,并稀释至500ml。乙液:取磷酸二氢钠2.76g,加水溶解,并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(pH7.8~8.0)取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g,加水使溶解成1000ml,即得。---------------------------------------------------------------------------------------------

7、-------------------磷酸盐缓冲液(PhosphateBuffer,PB)试剂:NaH2PO4·2H2ONa2HPO4·12H2O配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。1)0.2mol/L的Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O31.2g(或NaH2PO4·H2O27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。2)0.2mol/L的Na2HPO4:称取NaHPO4

8、.·12H2O71.632g(或Na2HPO4·7H2O53.6g或Na2HPO4·2H2O35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。3)0.2mol/LpH7.4的PB的配制:取19ml0.2mol/L的NaH2PO4和81ml0.2

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