稀释接种法测BOD.doc

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1、稀释接种法测BOD1方法与原理生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物所进行化学过程中消耗溶解氧的量。BOD5是指在20+1℃培养5d分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的mg/L表示，测试范围2mg/L～6000mg/L。2仪器2.1恒温培养箱（20±1℃）2.2300mL细口玻璃瓶2.31000mL量筒2.4玻璃搅棒棒的长度长于普通玻璃棒，在棒的底端固定一个直径比量筒底小，并带有几个小孔的硬橡胶板。2.5溶解氧瓶：300mL，带有磨口玻璃塞并

2、且有供水封用的钟形口。2.61、2、5、10、20mL吸量管：供分取水样和添加稀释水用。3试剂3.1磷酸盐缓冲溶液将8.5g磷酸二氢钾，21.75g磷酸氢二钾，33.4g七水合磷酸氢二钠和1.7g氯化铵溶于水中，稀释至1000mL，此溶液的pH值应为7.2。3.2硫酸镁溶液将22.5g七水合硫酸镁溶于水中，稀释至1000mL。3.3氯化钙溶液将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释1000mL。3.4氯化铁溶液将0.25g六水合氯化铁（FeCl3•6H2O）溶于水中，稀释至1000mL。3.5盐酸溶液将40m

3、L（=1.18mg/L）盐酸溶于水，稀释至1000mL。3.6氢氧化钠溶液（0.5mol/L）将20g氢氧化钠溶于水中，稀释至1000mL。3.7亚硫酸钠溶液(=0.025mol/L)将1.575g亚硫酸钠溶于水中，稀释至1000mL。（此溶液不稳定，需每天配制。）3.8葡萄糖-谷氨酸标准溶液将葡萄糖和谷氨酸在103℃干燥1h后，各称取150mg溶于水中，移入1000mL容量瓶内稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。3.9稀释水在5-20L玻璃瓶内装入一定量水。控制水温在20℃左右，然后用无油空气

4、压缩机，将吸入的空气经活性碳吸附管及洗涤管后，导入稀释水内曝气2-8h。使稀释水中的溶解氧接近饱和。放置于20℃培养箱中放置数小时。使水中的溶解氧达到8mg/L左右，临用前每升加入氯化钙、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲液各1mL，并混合均匀，稀释水的PH值应为7.2。其BOD5应为小于0.2mg/L。3.10接种液城市污水，在室温下放置一昼夜，取上清液使用。3.11接种稀释水分取适量接种液，加入稀释水中、混匀。每升稀释水中接种液加入量为：生活污水1～10mL.接种液配置后立即使用。4分析步骤4.1水

5、样的预处理4.1.1调节pH值a）水样的PH若超出6.5-7.5范围时，可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调节PH近于7，但用量不要超过水样体积的0.5%。若水样的酸度或碱度很高，可改用高浓度的碱或酸液进行中和。保持20℃的水样温度。b）确定稀释倍数：由重铬酸钾法测定的COD值来确定，通常需做三个稀释比。使用稀释水时，由COD值分别乘以系数0.075、0.15、0.225，即可得三个稀释倍数；使用接种稀释水时，则分别乘以0.075、0.15、0.25三个系数。c）稀释操作按照选定的稀释比例，用虹吸沿筒壁先引入部分

6、接种稀释水于1000mL量筒中。加入需要量的均匀水样。再加入接种稀释水至1000mL，用带胶板的玻璃棒搅拌均匀，搅拌时防止出现气泡。然后以虹吸法将约20℃的混匀水样转移入两个溶解氧瓶内，转移过程中应注意不使产生气泡，以相同的操作使两个溶解氧瓶充满水样后溢出少许，加塞。瓶内不应留有气泡。其中一瓶即测定溶解氧，另一瓶的瓶口进行水封后，放入培养箱，在20+1℃培养5d，在培养过程中注意添加封口水。5d后测定其溶解氧。另外取两个溶解氧瓶用相同的方法装满接种稀释水作为空白试验，其中一瓶即测定溶解氧，另一瓶瓶口进行

7、水封后，放入培养箱，在20+1℃培养5d，在培养过程中注意添加封口水。5d后测定其溶解氧。五结果计算经过稀释后的水样的BOD5按下式（4）计算：式中：C1——水样在培养前的溶解氧浓度，mg/L；C2——水样经5d培养后，剩余溶解氧浓度，mg/L；B1——接种稀释水在培养前的溶解氧浓度mg/L；B2——接种稀释水在培养后的溶解氧浓度，mg/；f1——接种稀释水在培养液中所占比例；f2——水样在培养液中所占比例。