决明子有效成分黄酮类化合物的提取.doc

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1、决明子有效成分黄酮类化合物的提取生科院093班谈洋成09243226一、摘要：决明子是一种常用中药，富含黄酮，蒽醌和多糖，具有广泛的药理活性。现代药理学研究又表明，决明子具有降血压、降血脂，保肝及抑菌等活性，被应用于多种降脂减肥的成方制剂中。同时，决明子又可作食用中药，是保健饮料的良好原料。实验过程中测定了决明子中黄酮类化合物的含量，采用乙醇回流水浴提取黄酮，对比研究提取时间、乙醇浓度、浸出温度和料液比等因素对提取效果的影响,再进行正交实验优化工艺条件。含量测定应用紫外—可见分光光度法进行测定，并使用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色体系。实验结果表明乙醇提取法效果最佳。在最

2、佳提取条件75％乙醇为提取剂，80℃下提取，提取时间3.5h，料液比1:30时。以芦丁为标准物质，绘制的标准标准曲线其回归方程为C=96.838A-2.8675，相关系数R2=0.9951。又测得提取液吸光度为0.428，黄酮浓度为37.0μm/mL，提取率为88.61%。二、关键词：决明子，黄酮类化合物，乙醇，提取工艺。三、材料和方法：1、实验仪器名称型号生产厂家循环水式多用真空泵SHB—Ⅲ郑州长城科工贸有限公司电子恒温不锈钢水浴锅HHS—2S上海市南阳仪器有限公司可见分光光度计722N上海精科电子有限公司调温电加热套DZHW河北省黄骅市中兴仪器有限公司电子天平AW220慈溪市天东

3、衡器厂大功率粉碎机QE—100武汉县工具有限公司索氏提取器-天津北辰区光明仪器厂蒸馏装置M22型中量天津玻璃仪器厂电热干燥箱202—3北京金北德工贸有限公司2、实验药品选用决明子在药房购得，产地为广西省。-11-名称分子式纯度生产厂家芦丁标准物质C27H30O16A.R西安旭煌生物技术有限公司95%乙醇CH3CH2OHA.R天津永晟精细化工有限公司无水甲醇CH3OHA.R天津光复精细化工研究所丙酮CH3COCHA.R天津风船化学试剂科技有限公司石油醚-A.R天津永晟精细化工有限公司亚硝酸钠NaNO2A.R天津永晟精细化工有限公司硝酸铝Al2(NO3)3·9H2OA.R天津永晟精细化工

4、有限公司氢氧化钠NaOHA.R天津永晟精细化工有限公司。3、实验流程及装置图黄酮提取实验流程4、实验所用仪器装置见图-11-5、实验方案5.1标准溶液的配制和标准曲线制作将芦丁于120℃下干燥至恒重，准确称取芦丁标准样品0.0200g，用30％乙醇溶解，定溶于100mL，得浓度为0.200mg/mL芦丁标准液。准确吸取芦丁标准液0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL于10mL容量瓶中，加入5%NaNO2液0.3mL，摇匀，放置6min后加入10%Al(N03)3溶液0.3mL，摇匀，放置6min后加入4%NaOH溶液4.0mL，再用30%乙醇定

5、容，摇匀，以30%乙醇为空白参比，l0min后用lcm比色皿于510nm测定吸光度A，得到芦丁标样含量Y(μg/mL)与吸光度A间的关系，画出标准曲线[]。5.2决明子中黄酮平均含量的提取及测定决明子中总黄酮平均含量的测定。分3次分别准确称取3.0决明子粉末，用滤纸包住并用棉线捆好，置于索氏提取器中，用100mL甲醇体积浓度75％，80℃水浴加热回流，当索氏提取器中的溶液由黄色接近无色时，取出用滤纸包住的决明子粉末，蒸馏回收甲醇至近干，加水约80mL溶解，加入20mL石油醚脱色2次，弃去醚层。加水于100mL容量瓶中定容，作为待测液[17]。取待测液10mL于50mL容量瓶中，用30

6、％乙醇定容，取2.0mL于10mL容量瓶中，以下按照测定芦丁标准液吸光度的方法测定吸光度A。重复3次，结果取平均值[]。从决明子中提取的黄酮含量可按下列公式计算：M(%)=[Y×(100/10)×(50/2)×10×10-6×100]/w式中：100/10和50/2—稀释倍数；w—决明子重(g)。提取率(%)=(提取黄酮含量/决明子中总黄酮的平均含量)×100[18]。5.3决明子中总黄酮的提取及测定准确称取3.0g决明子粉末置于磨口三颈烧瓶中，按照设计的配方加入一定量的提取剂，在一定温度下回流提取一定时间，趁热减压抽滤，滤渣加适量水洗涤、过滤．合并清液后得提取液，再蒸馏，回收溶剂至

7、近干，再按照2中的步骤配置待测液，以下按照测定芦丁标准液吸光度的方法测定吸光度A，计算黄酮提取率[]。5.4提取溶剂的选择分别用沸水、碱性水溶液(pH值9.0)、75％乙醇溶液、75％甲醇溶液、75％丙酮溶液[16]，80℃水浴下，回流浸提3.0h，料液比为1:20分别提取，测定其吸光度，计算其提取率分别。5.5影响提取效果的因素1）乙醇浓度对浸提效果的影响分别采用65%、75%、80%、85%、95%的乙醇浓度按3的操作步骤进行试验，在80℃下，回流提取