猪产肠毒素大肠杆菌987p菌毛卵黄抗体的研究.pdf

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1、南方农业学报2011,42(10):1284—1287JournalofSouthernA—culturebLip;IP,~㈣.nfnyxb.corn猪产肠毒素大肠杆菌9盯P菌毛卵黄抗体的研究谢志恒-,赛金1,张开宇1,张卉2,王士长P(1广西大学动物科学技术学院。南宁530005;2河南黄淮学院,河南驻马店463000)摘要:【目的】探索产肠毒素大肠杆菌(ETEC)。P菌株培养的最佳条件及。P菌毛诱发蛋鸡制备卵黄抗体(IgY)的最佳免疫程序,为IgY的工业化、规模化生产提供参考。【方法】扩大培养,7P菌株,抽提层析纯化。7P菌毛蛋白,然后以其为抗原免疫20周龄开产海兰蛋鸡,采用间接ELIS

2、A检测。P菌毛蛋白免疫IgY效价。【结果】嘶P菌株的最佳培养条件为37℃下Slanctz固体培养基培养24h;以纯化,7P菌毛蛋白为抗原免疫20周龄开产蛋鸡,发现蜘P菌毛蛋向二免、三免IgY效价总体趋势基本一致,均在第3周达到峰值并维持1周,二免抗体峰值为2”,三免抗体峰值是二免峰值的2倍(2“),但第4周过后三免IgY效价仍保持在2”,且持续时间长,一般维持2—3周。【结论】以纯化蝴P菌毛蛋白为抗原免疫蛋鸡,能获得较高效价的IgY,且适当增加免疫次数能有效提高抗体水平和延长持续时间。关键词:猪;产肠毒素大肠杆菌(ETEc);。P菌株;菌毛蛋白;卵黄抗体(IgY)中图分类号:$852.43文

3、献标志码:A文章编号:2095—1191(2011)10—1284--04ResearchsonyolkantibodyofswineenterotoxigenicEscherichiacoli毋piliXIEZhi-heng1,SAIJinl,ZHANGKai-yul,ZHANGHui2,WANGShi-chang1+(1CollegeofAnimalSciencesandTechnology,GuangxiUniversity,Nanning530005,China;2HuanghuaiUniversity,Zhumadian,Henan463000,China)Abstract:【Ob

4、jective]ThepresentexperimentwasaimedtodevelopthebestcultureconditionsforenterotoxigenicEs-chenchiacoli(ETEC)%Pandthebestimmunityprocedureforpreparationofyolkantibody(19Y)withlayerinducedby嘟PpilitoprovidereferenceforindustrialscaleproductionofIgY.【Method]Thestrain%Pwasculturedanditspiliproteinwasext

5、ractedandpurified.Thepurifiedpiliproteinwasusedasantigentoimmune20-weekegg—productionHailanlayer,andindirectELIZAmethodwasusedfordetectionofIgYtiterofpiliproteinimmunityyolkantibody.【Result]Theresultshowedthatthebestcultureconditionsof%PwasinSlanctzsolidculturemediumfor24hoursat37℃.Usingpurifiedpil

6、iproteinasantibodytoimmune20-weeklayer.thelgYtitersof2““and3‘4immunityin9滞piliproteinshowedsimilaritychangetrends.whichattainedthepeakandkeptconstantforaweek.Theantibodytiterpeakof2“4and3一immunitywas20and2“.After4“week,theIgYtiterof3“immunitystillkeptat2”foralongtimeof2-3weeks.【Conclusion]Thehigher

7、titerIgYmaybeobtainedbyusingpurified987Ppiliasantibodytoimmunelayer,andtheantibodylevelcanbeenhancedanditsdurationcanbeelongatedwithsuitablyincreasedimmunitytimes.Keywords:swine;ETEC;987P;piliprotein;yolkan

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