植物组织培养是园艺技术专业技能训练课程之一.doc

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1、植物组织培养是园艺技术专业技能训练课程Z-,是遵循高职教育规律，坚持以服务为宗旨，就业为导向，进行教学改革，是以2008年教学大纲为基础，将组织培养以工作过程分解能力培养体系，按工作任务模块进行了调整和修改,注重加强理论与实践的结合，在掌握“必需、够用”的组培基本理论同时，能够进行娴熟的植物组织培养操作，充分利用校外实习基地与学校组培实训基地，采取“校企一体、工学结合”，并以真实项H为载体，在教师指导下，以学生为主体实现项做到“项FI驱动，学做一体”的教学特色，使学生完全符合植物组织培养岗位的职业要求，培养学生的组织培养岗位职业

2、能力，满足学生在浙江大学试验农场、连云港振兴恒巨生物有限公司、三益集团实习就业需求。第一部分：组织培养常用仪器设备使用及维护1—1高压蒸汽灭菌锅的使用及维修I原理高压蒸汽火菌是将待火菌的物品放在i个密闭的加压火菌锅内，通过加热，使火菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。从而使沸点增高，得到高于ioo°c的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。2使用方法（1）装锅：先在外锅加入适量的水，然后将火菌物品直立放入内锅，试管口或三角瓶口向上且不要贴锅边，避免冷凝水浸入试管或三角瓶。灭菌物品不要装得太满，留出一定空间，便于蒸汽流通，否则易

3、造成灭菌不彻底。（2）盖上锅盖：盖锅盖时应将锅盖上的排汽管插入锅内壁管孔内，然后对角线方向拧紧锅盖上的螺丝，并将放汽阀肓立打开，安全阀横向关闭。（3）排放冷空气：将火菌锅放在电炉上加热，当锅内蒸汽大量排出时再继续排汽：3〜5min,关闭放气阀。（4）升压、保压、降压：当压力表指针指到1.05kg/cm2处时（灭菌所需压强）开始计时，继续维持该压强20〜30mino灭菌结束待压力表指针自然I叫到“0”位时打开放汽阀，排出锅内剩余蒸汽后，打开锅盖。注意切忌在压力表未到“0”位时就放汽，以免试管内的培养基向上冲浸湿棉塞，造成以后菌种的

4、污染。1—2超净工作台超净工作台是为实验室工作提供无菌操作环境的设施，以保护实验免受外部环境的影响，同时为外部环境提供某些稈度的保护以防污染并保护操作者。1原理超净工作台的洁净环境是在特定的空间内，洁净空气（进滤空气）按设定的方向流动而形成的。以气流方向来分，现有的超净工作台可分为垂直式，由内向外式以及侧向式。从操作质量和对环境的影响来考虑，以垂！［式较优越。由供气滤板提供的洁净空气以…个特定的速度下降通过操作区，在大约操作区的屮间分开，由前端空气吸入孔和后吸气窗吸走，在操作区下部前后部吸入的空气混合在一起，并由鼓风机泵入后正压

5、区，在机器的上部，30%的气体通过排气滤板从顶部排出，大约70%的气体通过供氧滤板重新进入操作区。为补充排气口排岀的空气，同体积的空气通过操作口从房间空气屮得到补充。这些空气绝对不会进入操作区，只是形成一个空气屏障。2调试所在的超净工作台出厂前祁经过严格的测试，以保证正常的使用。但这并不是说，厂家的测试就能代替操作者使用前作必要的检验和调试。因为超净工作台所处的环境备异，只有经过适半的检验和调试，才能最大限度地发挥设备的作川。在调试前应为机器选定一个较好的环境。将其置于一间有空气消毒设施的无菌室是最好的,如果条件不具备，就应将机

6、器安放于人员走动少、较清洁的房间屮。调報各脚的高度，以保证稳妥和操作面的水平。超净工作台的供电应采用一条专门电路，以避免电路过载造成空气流速的改变。与简陋的无菌罩相比，超净台具有允许操作者自由活动，容易达到操作区的任何地方以紫外线杀菌灯和照明川口光灯是超净T作台的标准配置，鼓风机提供空气流动的动力，这些部件是否正常工作是一H了然的。最困难也是最重要的是检查空气滤板其密封性,它育接关系到机器的正常使用。最简单的检杳方法是营养琼脂平板法。新购买的和久置未用的超净工作台除用紫外灯等照射外，最好能进行熏蒸处理，然后在机器处于工作状态时在

7、操作区的四角屮心位置各放一个打开的营养琼脂平板,两小时示盖上盖并置37°C培养箱屮培养24小时，计算出菌落数。平均每个平皿菌落数必须少于0.5个。3维护超净工作台是一台较精密的电气设备，对具进行经常性的保养和维护是非常重要的。首先要保持室内的干燥和清洁，潮湿的空气既会使制造材料锈蚀，还会影响电气电路的正常工作，潮湿空气还利于细菌、霉菌的生长。清洁的环境还可延长滤板的使用寿命。另外，定期对设备的清洁是正常使用的巫要环节。清洁应包括使用前后的例行清洁和定期的处理。熏蒸时，应将所有缝隙完全密封，如操作II设有可移动扌当板封盖的类型超净

8、丁作台,可用舉料薄膜密封。超净工作台的滤板和紫外杀菌灯都有标定的使用年限,丿应按期更换。1-3光照培养箱的使用光照培养箱是具有光照功能的高精度恒温设备，通常用于植物发芽与培养。1•把电源开关拨至“1”处，此时电源指示灯亮，控温仪有数字显示，钟控仪上有时间显示。2