实验十:barr小体的观察(精).doc

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1、遗传学实验巴氏小体的观察系院班级:化生系09级生物技术2班指导老师:李天星老师姓名:赵仁升20091052252同组人:蒋利国20091052251间:2011年11力9日-l-x.J=.刖B本实验的目的,一方面旨在让同学们进一步了解barr小体,了解其的由来及意义、其的形状结构及意义、其产生对生物的遗传学意义;另一方面是增强同学们对各种问题的思索,对生物所表现的各种性状或特殊结构,是如何产生或有什么样的生物学意义及对人类生活有何重要意义的思考。生物所出现的每一个性状或特殊结构或只在某一类群中才出现的特殊结构都有其独特的意义。在本实验的设计、操作及编写的过程

2、中,承李天星及各位同学的大力支持、提供实验方案及各种宝贵意见,在此仅表示感谢!因本人学识匮乏,本报告中不可避免的会出现诸多错误,望各位给予多多包涵,并帮忙指出,在此仅表示歉意!一・目的・4—.原理・4三•仪器、设备、试剂及材料•“五・注意事项・17六・现象・18七・分析与讨论79八.补充・28九•心得体会・32十.实验条件・33十一.作业・34十二.参考文献・36一・目的1•了解Barr小体的发现及其形态;2•学习人类Barr小体的检测方法;3•认识雌性哺乳动物X染色体失活假说和剂量补偿效应的机制;4•了解性别决定机制。二・原理(—)异染色质及barr小体4

3、•异染色质的介绍及其功能(1)在细胞周期中,间期、早期或中、晚期,某些染色体或染色体浅,具有这种的某些部分的固缩常较其他的染色质早些或晚些,其染色较深或较缩特性的染色体称为异染色质(heterochromatin)□具有强嗜碱性,染色深,染色质丝包装折叠紧密,与常染色质相比,异染色质是转录不活跃部分,多在晚S期复制。异染色质分为结构异染色质和功能异染色质两种类型。结构异染色质是指各类细胞在整个细胞周期内处于凝集状态的染色质,多定位于着丝粒区、端粒区,含有大量高度重复顺序的脱氧核糖核酸(DNA),称为卫星DNA(satel-liteDNA'功能异染色质只在一定

4、细胞类型或在生物一定发育阶段凝集,如雌性哺乳动物含一对X染色体,其中一条始终是常染色质,但另一条在胚胎发育的第16-18天变为凝集状态的异染色质,该条凝集的X染色体在间期形成染色深的颗粒,称为巴氏小体(Barrbodyb(2)区别常染色质易被碱性染料染成浅色,或对孚尔根反应呈弱阳性。异染色质易被碱性染料染成深,或对孚尔根反应呈阳性。(3)功能关于异染色质的功能,目前还未深入了解。但以下的几点是明显的。%1结构型异染色质可以加强着丝点区,使着丝粒稳定,以确保染色体分离。%1可以隔离和保护重要基因(例如NOR区的18S和28S基因),防止或减少基因突变和交换。%

5、1促进物种分化,同源染色体可通过其异染色质区的重复序列在减数分裂时配对,这种配对能帮助染色体全长的联会。重复序列中可以容纳突变,进而形成新的不同重复序列,由此而促进物种的分化和形成。%1有利于非必要基因在生存竞争中被淘汰。%1具有斑点位置效应能导致常染色质异染色质化,使其中的基因表达受到抑制。%1异染色质可以从两个方面参与基因调控:一是通过一种与“异染色质化”有关的过程,使多数大片段的染色质结构关闭;二是通过稳定更多的已开放的染色质结构来避免其关闭结构状态的存在。2.barr小体的发现.形状及其应用(1)1949年Barr和Bertran在研究猫的间期神经细

6、胞时,发现雌猫体细胞核膜边缘有一个可被碱性染料染色的小体而雄猫没有。后来发现人类正常女性口腔上皮、阴道上皮、皮肤、羊水等的细胞中都有一个这样的小体,继而有人进一步发现所有哺乳动物雌体细胞中都有同样的一个小体。一般认为这种小体是两个X染色体中的一个在间期发生异缩形成的,故而将其称为X小体,X染色质,又称为,乂小体一般1-1.5微米,呈三角形或卵圆形。234Barr小体。经观Barr小体出现在哺乳动物雌性个体细胞的细胞核膜边缘,这主要是因为这条染色体处在失活状态所致,Morishima等利用放射性标记的方法证实了失活状态的性染色体与其他异染色质(heteroch

7、romatin)—样,在DNA复制时总落后于其他常染色质,且大多出现在核膜边缘。性染色质的数目是X染色体数减1。故可以根据X小体的有无、数目来鉴定胎儿的性别和性别畸形。(2)应用通过巴氏小体检查可确定胎儿性别和查出性染色体异常的患者,如克氏(Klinefelters)综合征患者外貌为男性,但有一个巴氏小体,可判定患者的核型是47,XXY;而外表为女性的特纳氏(Turners)综合征患者却无巴氏小体,故判断患者的核型是45,XOo其他性染色体异常的患者如XXY、XXY丫有1个巴氏小体,而XXX、XXX丫有2个巴氏小体等。利用Barr小体预测胎儿的性别,方法是用

8、羊水细胞、胎盘绒毛膜细胞以及最近采用孕妇的血、尿、宫

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