四溴双酚-A与DAN的相互作用及其毒性研究.pdf

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1、中央民族大学硕士研究生论文摘要环境中许多化学污染物在生物体代谢过程中会导致DNA分子的损伤，而污染物与DNA作用形成的DNA加合物是DNA化学损伤的最普遍形式，它反映了污染物与DNA的作用，可以用来评价和预测化合物的潜在致癌性。目前因四溴双酚．A(TBBPA)的大量使用，已经在空气、土壤、水体底泥、海鸟和鱼体内，甚至人体血液和母乳等多种环境介质和生物样品中已经发现TBBPA的存在。由于1．氨基芘(1．AP)与DNA作用能形成加合物已经得到公认，因此本研究拟分别以l一氨基芘和四溴双酚．A为目标物，以pUCl8质粒DNA作为实验材料，采用DNA凝胶电泳和光谱的方法，研究两种物

2、质1．氨基芘和四溴双酚．A与DNA的作用和对DNA的损伤。本论文分别研究了1-AP、TBBP．A与DNA在四个体系中的相互作用，实验工作主要包括4部分：(1)1-AP、TBBP．A与DNA的直接作用研究：1-AP与DNA在直接作用时的电泳图像及紫外图谱证明并未发生结合，在相同条件下研究TBBP．A与DNA直接混合，结果表明TBBP—A对DNA在直接作用下不会造成损伤。(2)1-AP、TBBP．A与DNA在氙灯光照情况下的相互作用研究：当1-AP与DNA在混合后置于光照条件下时，光照后的样品的电泳图像有明显的损伤趋势，且紫外叠加图也同时证明两者发生作用。在相同条件下研究TB

3、BP—A与DNA混合后进行光照，电泳图像也发生明显的损伤趋势并且伴随着紫外图谱的变化，得到TBBP．A与DNA也发生相互作用的结论。(3)1-AP、TBBP．A与DNA在Fenton产自由基系统中的相互作用研究：在Fenton产羟基自由基系统中，1-AP与DNA混合的电泳图像有明显的损伤趋势，且改变1-AP、DNA与Fe2+的反应比例，其对DNA的损伤结果也会发生变化，当实验中加入Fe2+达到3009L时，1．AP对DNA的损伤达到半数，当加入量增加到5009L时DNA被完全损伤；同理可得出改变TBBP．A、DNA中央民族大学硕士研究生论文与Fe2+的反应比例，对DNA的

4、损伤结果发生变化，且TBBP．A对DNA的损伤结果随着Fe2+；lJlJ入量的增多呈线性相关。(4)1-AP、TBBP—A与DNA在S9肝微粒体酶的酶系统中的相互作用研究：在模拟体内代谢系统的S9肝微粒体酶混合液中，1-AP与DNA发生相互作用。改变1-AP(TBBP．A)、DNA与S9混合液的反应比例，得到的毒物对DNA的损伤剂量也发生变化。随着S9加入量的增多，受损伤的DNA的量变大，呈线性相关。当TBBP．A与DNA在S9肝微粒体酶酶系统模拟体内实验时，也出现和1-AP与DNA相互作用时比较吻合的结果。关键词：TBBP．A，DNA凝胶电泳，DNA加合物中央民族大学硕

5、士研究生论文ABSTRACTJ删JJ舢舢0珊删删I舢删删删Y2137496ManyofthechemicalpollutantsinenvironmentwillleadtodamageofDNAmoleculesbytakingpartintheprocessofmetabolism．TheDNAadductisthemostcommonformofchemicalinjury，anditreflectsthereactionofpollutantswithDNAandcanbeusedtoevaluatethepotentialcarcinogenicity．Duet

6、otheextensiveuseofTBBPA，TBBP—Ahasbeenfoundintheair，soil，watersediments，seabirdsandfish，andevenhumanblood，breastmilkandotherenvironmentalmediaandbiologicalsamples．Meanwhile，because1-AminopyreneandDNAcanformadducthasbeenrecognized，SOwewanttostudytheDNAadductandDNAdamagebychoosing1-aminopyre

7、neandtetrabromobisphenol-Aastheobjects，pUC18plasmidDNAasexperimentalmaterial，usingDNAgelelectrophoresisandabsorptionspectrummethod．Intheresearch，wehavestudiedtheinteractionsof1-AP，TBBP-AandDNAinthefoursystemsrespectively．Theexperimentalworkmainlyincludesfourparts：(1