实验南湖水、各种环境中微生物的测定.ppt

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1、实验南湖水、各种环境中微生物的测定比较不同场所和不同条件下细菌的数量和类型。观察不同类群微生物的菌落形态特征。体会无菌操作的重要性。掌握水和环境中微生物的测定方法。检测污染水域微生物的类型和数量。一、实验目的二、实验原理判断水质的标准，微生物在水中的数量、种类是必不可少的。我国饮用水卫生标准（GB5749-85）规定每ml水样细菌总数37度培养24h不得大于100个，每升水中总大肠菌群37度培养48h小于3个。水中细菌总数可说明被有机物污染的程度，细菌数越多，有机质含量越大应用平板菌落计数技术测定污染水的

2、细菌总数。由于细菌种类繁多，不可能找到一种培养基在一种条件下，使所有的细菌均能生长繁殖。因此，计算出来的细菌总数仅是一种近似值。利用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基可以大致测定不同环境中存在的微生物。样品的采取南湖水(必做)距水面10-15cm的深层水样自来水取自自来水管道。(必做)豆浆(必做)表皮、人民币和实验环境中的微生物。培养基牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。仪器或其他用具灭菌培养皿，无菌枪头，涂棒等。三、实验器材无菌操作采用10－1,10－2,10－3稀释液0.1ml涂布牛肉膏蛋白胨平板;每个稀释度2个重复。四

3、、实验步骤1.南湖水中微生物的测定每个培养皿加0.1ml稀释液水样100(LTA)2.表皮、人民币和门把手微生物的测定用棉签分别从表皮、人民币纸币和门把手表面挑取微生物，然后放入装有1ml无菌水的EP管中，颠倒均匀后，用移液器吸0.1ml入牛肉膏蛋白胨平板中，涂布均匀。方式二：将牛肉膏蛋白胨平板盖揭开，分别置实验台10，20，30，40，50，60min后，盖上皿盖，倒置培养。3.实验室空气中微生物的测定方式一：将牛肉膏蛋白胨平板盖揭开，分别置实验台地面，工作台，高架台30min后，盖上皿盖，倒置培养。4

4、.自来水、豆浆中微生物的测定取0.1ml自来水涂布(或倒平板法)牛肉膏蛋白胨平板。自来水用无菌平皿收集。取0.1ml豆浆涂布牛肉膏蛋白胨平板。5.培养、计数六、思考题（1）从自来水检测的细菌总数结果来看，是否合乎饮用水的卫生标准？（2）你所检测的其他样品的结果如何？说明什么？菌落计数方法先计算相同稀释度的平均菌落数。若其中一个平板有较大片状菌苔生长时，则不应采用，而应以无片状菌苔生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布又很均匀时，则可将此一半的菌落数乘2以代

5、表全平板的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落数。首先选择平均菌落数在30-300之间的，当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该样品的细菌总数。若有两个稀释度的平均菌落数均在30-300之间，则按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2，应采取两者的平均数；若大于2，则取其中较小的菌落总数。若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数。若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数。若所有稀释度的平均菌落

6、数均不在30-300之间，则以最近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数。五、实验结果计算每ml南湖水中含有微生物的数量。你所测定的环境中微生物的数量和种类；并试着分别记录每种细菌的大小、形态、干湿、透明度、颜色以及边缘等特征。名称南湖水自来水（个/mL）豆浆（个/ml）人民币（个/cm2）门把手（个/cm2）空气（分钟）（个）10-110-210-3总数数量形态六、思考题（1）从自来水检测的细菌总数结果来看，是否合乎饮用水的卫生标准？（2）你所检测的其他样品的结果如何？说明什么？