肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抑制卵巢癌3AO细胞增殖并促进细胞凋亡.pdf

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1、细胞与分子免疫学杂志(ChinJCelMolImmuno1)2014，30(5453·论著·文章编号：1007—8738(2014)05—0453—05肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抑制卵巢癌3AO细胞增殖并促进细胞凋亡张少华，刘凯歌，·成碧萍，高倩，王莉。，杨筱凤(西安医学院第一附属医院：妇科，消化内科，科研科，陕西西安710077；西安交通大学医学院第一附属医院妇产科，陕西西安710061)[摘要]目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导卵巢癌3AO细胞凋亡的分子机制。方法用(12．5、25．0、50．0)ng／mL的重组人TRAIL蛋白与卵巢癌3AO

2、细胞共孵育72h，观察细胞的形态变化，在不同时间段收集细胞，MTT法检测细胞生长增殖，计算细胞的生长抑制率，annexinV-FITC／PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期，原位末端标记法(TUNEL)观察凋亡形态特征，Westernblot法检测凋亡相关蛋白caspase-3蛋白表达。结果各浓度组的TRAIL都可以引起3AO细胞形态学改变，对细胞增殖均有抑制作用(P<0．05)，25ng／mL和50ng／mLTRAIL处理的3AO细胞出现明显的细胞凋亡和周期阻滞，随着药物作用时间的延长，G1期细胞比例逐渐增多，而s期和G2／M期细胞比例减少，caspase

3、一3蛋白呈高表达，但两组之间的凋亡率和凋亡蛋白的表达无显著性差异(P>0．05)。结论TRAIL是通过抑制细胞周期、阻滞DNA合成、活化caspase-3诱导卵巢癌3AO细胞凋亡。[关键词]TRAIL；3AO细胞；细胞凋亡；细胞周期；caspase-3蛋白[中图分类号]R392．11，Q253[文献标志码]ATRAILinhibitsproliferationandpromotesapoptosisof3AOovariancancercellsZHANGShaohua，LIUKaige，CHENGBiping，GAOQian，WANGLi，YANGXiaofengDe

4、partmentofGynecology，DepartmentofGastrointestinalMedicine，ResearchServiceOfice，FirstAffiliatedHospital，Xi’anMedicalCollege，Xi’an710077；DepartmentofGynecologyandObstetrics，FirstAffiliatedHospital，MedicalCollege，Xi’anJiaotongUniversity，Xi’an710061，China[Abstract]ObjecfiveToinvestigatethee

5、fectoftumornecrosisfactOr-relatedapoptosis-inducingligand(TRAIL)ontheproliferationofovariancarcinoma3AOcells／nvitroanditsmolecularmechanism．MethodsOvariancarcinoma3AOcellswereincubatedwith12．5，25．0，50．0ng／mLTRAlLproteinsfor72hours，respectively．At24，48and72hours，thecellswerecollectedtoob

6、servethemorphologicalchangeunderaninvertedmicroscope，detectthecellproliferationusingmethylthiazolyltetrazolium(M1_r)assay，theapoptosisrateandcellcycleusingflowcytometry(FCM)，themorphologicalfeaturesofapoptoticcellsusingTdT-mediated-dUTPnickendlabeling(TUNEL)andtheexpressionofcaspase-3pr

7、oteinusingWesternblowing．ResultsThegrowthof3AOcellswasinhibitedbydiferentconcentrationsofTRAIL(P