拟南芥转录因子DYT1、TDF1和AMS功能的初步比较.pdf

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1、ShanghaiNormalUniversityDissertationforMasterDegreeFunctionComparisonofTranscriptionalFactorsDYT1，TDF1andAMSinArabidopsisthalianaFACULTYCollegeofLifeandEnvironmentScienceMAJORBiochemistryandMolecularBiologyDIRECTIONDevelopmentalMolecularBiologyAUTHORXiaJieADVISERGaoJufa

2、ngDATEOcterber,2012上海师范大学硕士学位论文中文摘要论文题目：拟南芥转录因子DYTl、TDFl和AMS功能的初步比较学科专业：生物化学与分子生物学申请人：夏杰指导老师：高菊芳IIllIIIIIIIlllIIIlllIIIIIIlY2284588摘要绒毡层的发育是一个复杂而精密的细胞行为，而且是在极短时间内接连完成，其中涉及到了大量基因的特异性表达与关闭。已有的研究表明拟南芥转录因子DYTl、TDFl和AMS在调控绒毡层细胞功能分化方面发挥重要的调控作用。为了详细了解这三个转录因子功能上的差异，本文的研究工作在前人的基

3、础上，对dytl．2突变体，tdfl突变体和ams的等位突变体ams．2突变体花药发育的第6．8期的细胞学变化进行了比较，并利用启动子驱动GUS报告基因的方法研究了DYTl的表达谱，同时获得了一株tdfl的等位突变体npg。主要结果如下：l、对咖fJ．2、taft和ams．2突变体花药发育第6．8期横切面药室壁组成的观察发现：三者共同的变化是中层细胞退化过程不完全，绒毡层细胞空泡化，不能特化为分泌型细胞；不同之处是dytl．2突变体药室壁中层细胞能按时启动退化，蝴突变体药室壁中层细胞不能启动退化，ams-2突变体药室壁中层细胞提前启动

4、退化。上述结果提示转录因子DYTl、TDFl和AMS在中层细胞退化和绒毡层细胞功能分化中具有不同的功能。2、对dytl．2、rayl和rims．2突变体花药发育第6．8期横切面观察还发现dytl．2突变体和五西口突变体的花粉母细胞虽能形成胼胝质壁，但胼胝质在细胞表面的分布不均匀，其四分体小孢子之间的胼胝质含量也减少，并且花粉母细胞和小孢子细胞内容物也较少。ams．2突变体的花粉母细胞形态较饱满，但胼胝质壁较薄。这三个突变体的共同特征是胼胝质不能及时降解，小孢子不能从四分体中释放出来。上述结果表明DYTl和TDFl在花药发育的第6期可能

5、促进花粉母细胞内容物的合成，调控胼胝质的合成以及在细胞壁上的沉积，而在花药发育第7期，参与调控小孢子之间胼胝质的合成，在花药发育的第8期，DYTl、TDFl和AMS可能都参与调控胼胝质的降解过程。3、为了了解DYTl的表达谱，构建了proDYTl631：：GUS载体并获得了转基因植株。对proDYTl631：：GUS转基因植株花序GUS染色结果的观察发现GUS活性开始出现于花药发育第6期的雄蕊，并且在花丝基部活性最高；在花药发育上海师范大学硕士学位论文中文摘要第6-8期在花丝和花药组织的各种细胞中都有活性，到花药发育的第9．11期，只

6、在花药的各种组织细胞中具有活性。上述结果提示DYTl蛋白在花药发育的第6期开始出现于整个雄蕊，包括花丝和花药，并且在花丝基部含量最高；在花药发育第7、8期在花丝和花药组织的各种细胞中都有DYTl蛋白，到花药发育的第9-1l期，只在花药的药室壁细胞和花粉中存在DYTl蛋白，花丝中已不存在DYTl蛋白。4、npg突变体是从拟南芥Salk_041443株系中筛选得到的。通过对npg突变体花药发育的细胞学观察，发现该突变体的表型与已经研究清楚的dytl．2、rayl和ams．2突变体表型十分相似。等位分析结果表明npg突变体是tdfl的等位突

7、变体。将npg突变体中编码TDFl的序列克隆后测序发现npg突变体中编码TDFl蛋白的基因第三个外显子上发生了两处碱基替换：一个是459bp处TGG-TGA，另一个是988bp处CAT-丸讧造成编码TDFl蛋白的序列提前终止。本文还根据已公开的基因芯片数据，对拟南芥转录因子DYTl、TDFl和AMS在功能上的差异进行了初步分析，并提出了进一步深入研究的可能途径。关键词：拟南芥转录因子DYTl．TDFl．AMS；绒毡层功能分化；中层退化；胼胝质合成与降解II上海师范大学硕士学位论文英文摘要AbstractTapetumdevelopme

8、ntisacomplexandsophisticatedcellbehavioLandiscompletedinaveryshorttime，whichinvolvesalargenumberofspecificgene